维生素C的测定实验报告

附1：学生实验报告格式浙江万里学院实验报告课程名称：生化实验指导教师：谭志文、汪财生实验项目：维生素C的定量测定—2,6二氯酚靛酚法专业班级生物技术112姓名邱玉兰学号2011013451实验日期2013.4.15实验步骤：各步骤现象记录：滴定开始时，滴下的蓝色被中和，滴定终点时溶液出现粉红色，并在15s内颜色不褪去结果计算与分析：Va=（8.752+8.749+8.734)/3=8.745mlVb=（0.190+0.191+0.192)/3=0.191mlS=1/[(7.533+7.581+7.512)/3]=0.133mlW=10*15.160/100=1.516g猕猴桃中维生素C浓度（mg/100g）=（8.745-0,191）*0.133*100/1.516=75.05mg/100g结果分析：本次实验我组用的实验材料是八成熟的猕猴桃。实验结果中猕猴桃的Vc含量比文献资料中Vc的含量（100-300mg/ml)正常范围小。对出现这样的结果分析：（1）新鲜时的猕猴桃Vc的含量是最高的，随着时间的推移Vc的含量开始损失，八成熟的猕猴桃Vc已经损失很多。（2）在实验研碎的过程中用的是研碎机，在快速研碎的过程中有空气进入，其中的氧气将Vc部分氧化。(3)在滴定的过程中，由于微量滴定管会漏液，需要对微量滴定管进行调整使滴定过程过长，Vc被氧气部分氧化。（4）在标准液的滴定时，由于微量管的问题，使滴定时间过长Vc被氧化，最后导致样品Vc计算结果偏小。注意事项与建议：（1）在研碎的时候，水果样品最好用刀切的碎点，这样用研碎机研碎的时间会缩短很多，Vc的损失也会少点同时节约时间。（2）在滴定前先用水检查下微量滴定管会不会出现漏液的现象，出现漏液就要求老师更换，这样既节约时间又能减小实验误差。（3）在样品滴定前进行样品的预滴定，看看滴定体积是不是小于1mL或多于4mL，如果样品含维生素C含量太高或太低时，可酌情增减样液的用量或者改变提取液的稀释度。同时也可大致知道所需的体积，知道大致的体积数就可以开始滴定时液体流速快点，快到滴定终点时放慢点，这样可以节约时间。思考题解答：1、总结本次实验操作的注意事项。答：（1）某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。（2）整个操作过程要迅速，防止还原性抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不能超过2min。滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含维生素C含量太高或太低时，可酌情增减样液的用量或者改变提取液的稀释度。（3）本实验必须在酸性条件下进行。在此条件下，干扰物反应进行的很慢。（4）2%草酸有抑制抗血酸氧化酶的作用，而1%草酸与此作用。（5）干扰滴定的因素有：若提取液中色素很多时，滴定不易看出颜色的变化，可用白陶土脱色，或加1mL氯仿，达到终点时，氯仿层呈现出淡红色。亚铁离子可还原可还原二氯酚靛酚。对含有大量的亚铁离子的样品可用8%的乙醇溶液代替草酸溶液提取，此时亚铁离子不会很快与染料起作用。样品中可能含有其他杂质还原二氯酚靛酚，但反应速度均较抗坏血酸慢，因而滴定开始时，染料要迅速加入，而后尽可能地一点一点地加入，并要不断地摇动锥形瓶直至呈现粉红色，于15s内不褪色，保证滴定过程不要超过2min。（6）提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留取上清液进行滴定。指出本实验采用的定量测定维生素C的方法有何优缺点？答：优点：2,6-二氯靛酚（DCIP)滴定法利用还原型VC能将染料DCIP还原为无色的原理，有经济、准确、快速、简便的特点，常用于果蔬中还原型VC含量测定。缺点：该方法是利用DCIP染料滴定果蔬提取液，只能测定还原型抗坏血酸，不能测出具有同样生理功能的氧化型抗坏血酸和结合型抗坏血酸。滴定终点为过量一滴染料呈现的红色，所以待测果蔬呈红色，提取液本身颜色会干扰滴定终点的观察。试简述维生素C的生理意义及应用情况。答：维生素C不足会引起坏血病，维生素C还与病毒抑制因子的长生有关，因而维生素C对预防感冒有很大的作用。同时还有让胆固醇值下降的作用，保持女性排卵的退性作用。对抗精神压力有很大作用。维生素C有分解皮肤中黑色素，预防色素沉着，预防黄褐斑、雀斑发生，使皮肤保持洁白细嫩的功能，并有促进伤口愈合、强健血管和骨骼的作用。维生素C的应用：胶原蛋白的合成；治疗坏血病；预防牙龈萎缩、出血；预防动脉硬化；抗氧化剂；治疗贫血；防癌；保护作用；提高人体的免疫力；提高机体的应急能力。为何整个滴定过程不要超过2分钟？答：因为还原型抗坏血酸易被氧化，空气中的氧气会氧化Vc，样品中没有抗氧化的2%的草酸Vc就更容易被氧化，所以滴定过程不要超过2分钟。为什么滴定终点以在淡红色存在15s内为准？答：当一种溶液滴加到另一种溶液中时,会突然打破原来溶液保持的动态平衡,在这个过程中就出现了"假变色",等半分钟就达到新的动态平衡了,颜色就不再改变了查阅资料，介绍其他测定VC含量的方法和原理。答：用三价铁和邻菲罗啡分光光度法