液相色谱柱后衍生法lc-msms测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留

液相色谱柱后衍生法lc-msms测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留

氨基丙烯酸农药对各种害虫都有良好的杀虫效果，是最常见的农药。在植物栽培过程中，尤其是在种子处理方面，氨基丙烯酸农药得到了广泛使用。然而,氨基甲酸酯类化合物属于乙酰胆碱酯酶的抑制剂1材料和方法1.1柱后衍生试剂甘蓝市售。氨基甲酸酯类农药标准品[涕灭威亚砜(aldicarbsulfoxide)、涕灭威砜(aldicarbsulfone)、3-羟基克百威(3-hydroxycarbofuran)、涕灭威(aldicard)、克百威(carbofuran)、灭多威(methomyl)、西维因(carbary)]国家标准物质中心。柱后衍生试剂乙腈、甲醇(均为色谱纯)德国Meker公司;丙酮(重蒸)、氯化钠(140℃烘烤4h)天津市化学试剂一厂;固相萃取柱、氨基柱(容积6mL,填充物500mg)、滤膜(0.2μm)天津津杨公司。1.2超纯水质谱仪以及仪器2695高效液相色谱仪(配有2695四元梯度泵、2475荧光检测器、柱后衍生系统)、超高效液相色谱仪Waters公司;TSQQUATUM质谱仪(配有ESI源、色谱工作站)Thermo公司;超纯水仪Millipore公司;KL512J氮吹仪北京康林科技公司;T18basic匀浆机德国IKA公司;RE-52A旋转蒸发器上海亚荣生仪器公司。1.3氨基柱的制备准确称取25.0g样品倒入匀浆机中,加入50.0mL乙腈,高速匀浆2min。滤液收集到装有5~7g氯化钠的50mL具塞量筒中,收集滤液40~50mL。盖上塞子,剧烈振荡1min,在室温下静置分层约10min。从100mL具塞量筒中准确吸取10.00mL乙腈相溶液,放入150mL烧杯中,将烧杯放在80℃电热板上加热,杯内缓缓通入空气流,将乙腈蒸发近干,加入2.0mL甲醇-二氯甲烷(1:99,V/V)溶解残渣,盖上铝箔待净化,将氨基柱用4.0mL甲醇-二氯甲烷(1:99)预洗条件化,当溶剂液面到达柱吸附层表面时,立即加入样品溶液,用15mL离心管收集洗脱液,用2mL甲醇-二氯甲烷(1:99)洗烧杯后过柱,并重复一次。将离心管置于氮吹仪上,水浴温度50℃氮吹蒸发至近干,用甲醇准确定容至2.5mL,在混合器上混匀后,用0.2μm滤膜过滤,待液相色谱-柱后衍生系统测定。氮吹蒸发至近干后,用体积分数0.1%甲酸溶液定容2.0mL,在混合器上混匀后,用0.2μm滤膜过滤,待液相色谱-质谱联用仪测定。1.4条件11.4.1水、甲醇和乙腈的梯度洗脱程序色谱柱:CarbamateAnalysisColomn;柱温:40℃;流动相:水、甲醇和乙腈,其梯度洗脱程序见表1;荧光激发波长339nm,发射波长445nm。柱后衍生反应器:A为0.05mol/LNaOH溶液,流量0.5mL/min;B为衍生试剂,流量0.5mL/min;柱后反应单元的温度为80℃。1.4.2在液体层析成像-质量分析的条件下2结果与分析2.1氨基甲酸酯农药残留分析在本实验条件下,两种方法均能对7种氨基甲酸酯农药取得较好的分离效果和很好的峰形,没有互相干扰,满足多组分农药残留分析要求,结果见图1、2。2.2色谱质谱条件对7种氨基甲酸酯类农药在甘蓝中进行回收实验,按上述前处理方法处理后分别上液相色谱仪和液相色谱质谱联用仪,结果见表4、5。由表可知,液相色谱法测定氨基甲酸酯类农药回收率为75.5%~103.5%,检出限为(R3液相色谱质谱联用法多采用低能耗试剂,有利于提高检测效率液相色谱法和液相色谱质谱联用法都可以用来测定蔬菜中的氨基甲酸酯类农药,其检出限、回收率均能满足测定要求,从表1、2的洗脱程序可以看出,液相色谱法上机时间为30min,而液相色谱质谱联用法上机时间为8min,液相色谱质谱联用法可以大大提高工作效率;从表4、5对比可以看出,液相色谱质谱法检出限更低,灵敏度更高,适合做农药残留微量检测;用液相色谱质谱法不需要用衍生试剂,节约了实验成本。液相法衍生实验的衍生试剂价格比较贵,而且溶液配好后容易氧化不能长时间放置,大