葛根总黄酮对急性酒精中毒小鼠自主行为活动的影响

葛根总黄酮对急性酒精中毒小鼠自主行为活动的影响

酒精饮料被称为急性酒精饮料。这是由于喝得太多的酒精或酒精饮料，中枢神经系统会从兴奋变为抑制，并表现出一些中枢神经系统症状，如肝脏、肾脏、胃、脾、心脏和其他重要的人体器官。可能会死亡。葛根为豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.)Ohwi或甘葛藤P.thomsoniiBenth的干燥根,味甘,性辛、凉,归脾、胃经,具有解酒,透疹、解肌退热、除烦、生津止渴等功效。葛根一直是众多解酒方药中的重要组成部分,含葛根的方药较多,有很好的解酒和预防作用。但葛根中具有解酒作用的具体成分尚不明确。本实验以葛根总黄酮为研究对象,研究其对醉酒小鼠的行为学的影响,并评价其对醉酒的预防作用,为开发预防醉酒的药品或保健品提供基础。1浓缩和浓缩方法1.1实验动物SPF级昆明小鼠,体质量(20±2)g,雄性,购于广州中医药大学实验动物中心,许可证编号:SCXK(粤)20130020。1.2药物与试剂葛根加8倍量70%乙醇水浴回流3h。共2次,合并滤液,减压浓缩。浓缩液甲醇溶解,过已活化300目硅胶柱,甲醇与氯仿混合溶剂(甲醇:氯仿=2∶7)洗脱。收集洗脱液,减压浓缩,真空干燥得葛根总黄酮1.3主要仪器恒温水浴箱(北京医疗设备厂),旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),自主活动仪(成都泰蒙仪器有限公司),TGL-16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂),分析天平(上海海康电子仪器厂),气相色谱分析仪(北京瑞利仪器有限公司)。2对小鼠的影响2.1单次预防给药雄性KM小鼠60只,体质量(20±2)g。随机分为正常组、模型组、葛根高剂量组、葛根中剂量组、葛根低剂量组,共5组,每组12只。正常组、模型组灌胃生理盐水,葛根高、中、低剂量组给予相应剂量的葛根总黄酮。灌胃体积均为0.2mL/10g。灌胃给药后30min,按0.14mL/10g体重给予56%红星二锅头2.2多次预防给药雄性KM小鼠60只,体质量(20±2)g。随机分为正常组、模型组、葛根高剂量组、葛根中剂量组、葛根低剂量组,共5组,每组12只。正常组、模型组灌胃生理盐水,葛根高、中、低剂量组给予相应剂量的葛根总黄酮。灌胃体积均为0.2mL/10g。连续灌胃3d,末次灌胃给药后30min,按照0.14mL/10g体质量给予56%红星二锅头,造成醉酒模型。测定小鼠攀附时间、睡眠潜伏时间、睡眠时间。并记录给酒30min后小鼠5min内自主活动次数,以后每1h记录,记录5h。2.3葛根总黄酮对血液中乙醇浓度的影响小鼠禁食不禁水12h后,每组小鼠按照500mg/kg进行给药,30min后每组按0.14mL/10g灌胃红星二锅头。小鼠给药后分别在0.5h、1h、1.5h、2h、3h,5个时段各取5只小鼠的血液。置于38℃的水浴锅中,静置2h后,3000r/min离心机离心10min,取上层血清,并用0.45μm微孔滤膜滤过,滤液用蒸馏水稀释1倍,取5μL进行乙醇含量的测定,得出的峰面积通过用乙醇标准曲线Y=345.0X+248.0(r=0.99),计算得出小鼠血清中乙醇的含量。2.4统计学方法实验数据采用SPSS20.0统计软件单因素方差分析、非参数检验处理,实验结果以均数±标准差(ue0af±s)表示。P<0.05、P<0.01为差异有统计学意义。3单次给药后大鼠自主活动及血液中乙醇浓度ld503.1.1单次给药对小鼠醉酒及醒酒的影响葛根高、中、低剂量组攀附时间、睡眠潜伏期均长于模型组,睡眠时间均短于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);表明葛根总黄酮提取物具有显著延长醉酒小鼠攀附时间、延长睡眠潜伏期、缩短睡眠时间的作用。(见表1)3.1.2单次给药对自主活动影响葛根高、中、低剂量组及模型组小鼠给酒30min、1h、2h、3h、4h、5h后自主活动次数均大于正常组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);葛根高、中、低剂量组小鼠给药30min、1h、2h、3h、4h、5h后自主活动次数均低于及模型组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);表明葛根总黄酮能明显降低醉酒小鼠兴奋性,表现为自主活动次数显著减少。(见表2)3.2多次给药3.2.1多次给药对小鼠醉酒及醒酒的影响多次给药后葛根高、中、低剂量组攀附时间、睡眠潜伏期均长于模型组,睡眠时间均短于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);表明葛根总黄酮提取物具有显著延长醉酒小鼠攀附时间、延长睡眠潜伏期、缩短睡眠时间的作用。(见表3)3.2.2多次给药自主活动影响多次给药后葛根高、中、低剂量组及模型组小鼠给药30min、1h、2h、3h、4h、5h后自主活动次数均大于正常组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);葛根高、中、低剂量组小鼠给药30min、1h、2h、3h、4h、5h后自主活动次数均低于及模型组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);表明葛根总黄酮能明显降低醉酒小鼠兴奋性,表现为自主活动次数显著减少。(见表4)3.3葛根总黄酮对血液中乙醇浓度的影响葛根高、中、低剂量组小鼠给药30min、1h、2h、3h、4h、5h后血液中乙醇浓度均低于及模型组,差异有统计学意义(P<0.05);表明葛根总黄酮能在一定程度上影响酒精的吸收或代谢,使血清中乙醇含量相应的降低。(见表5)。4对酒精发酵的影响葛根总黄酮是葛根提取物中的主要有效成分,对预防醉酒有一定的作用。结果表明:葛根总黄酮能明显延长急性酒精中毒小鼠攀附时间、延长睡眠潜伏期;缩短睡眠时间,降低醉酒后小鼠的自主活动次数。醉酒时大量的酒精经胃壁、肠壁吸收后快速进入人体而大量的蓄积在血液或组织中。酒精首先作用于脑干网状体致使大脑皮质的机能亢进,当脑中酒精浓度增加到一定量时,大脑皮层就产生睡觉的意识,最后发生麻木性昏迷。体内酒精经代谢消耗后恢复其原有状态。酒精由消化系统吸收进入人体的速度快。空腹饮酒,第1小时就可吸收60%,1个小时后,可高达90%以上。而酒精在体内气化和排泄较慢,因此,大量的酒精积累在血液或组织中。酒精可作用于中枢神经系统,使机体产生相应的变化,并依次表现为兴奋期、共济失调期、昏睡期。小鼠酒精灌胃后主要由胃、肠道吸收,并迅速进入血液、组织中,血清中乙醇浓度逐渐上升。小剂量的乙醇作用于脑中突触后膜苯二氮卓-γ-氨基丁酸受体而影响大脑皮层,而表现出兴奋状态本实验中给酒后小鼠血液中的乙醇含量在1.5-2h达到最大值,之后乙醇含量逐渐降低。葛根总黄酮高、中、低剂量均使小鼠血清中乙醇浓度降低,乙醇浓度上升的趋势较缓慢,在小鼠血清中乙醇浓度达到最大值之后,葛根总黄酮高、中、低剂量组小鼠血清中乙醇浓度明显降低,即高、中、低浓度葛根总黄酮均能抑制胃肠道对酒精的吸收或加速小鼠体内的酒精代谢;高、中、低浓度葛根总黄酮均能延长醉酒小鼠的睡眠潜伏期,缩短醉酒小鼠的睡眠时间;降低醉酒小鼠的兴奋性。表明葛根总黄酮高、中、低剂量均有较好的解酒作用,高剂量组明显优于中、低剂量组,中、低剂量组无明显差别。单次给药与多次给药均有很好的解酒效果,单次给药与多次给药之间没有明显差别。本研究结果表明,葛根总黄酮能明显延长小鼠的醉酒时间,显著降低醉