脂肪乳剂对布比卡因药代动力学的影响

脂肪乳剂对布比卡因药代动力学的影响

布比卡中毒可导致心血管系统衰竭和心脏停止，并在临床上无法恢复心脏活力。目前,动物实验和临床病例证实了脂肪乳剂能快速救治酰胺类局麻药导致的心脏骤停,并对药代动力学有影响1数据和方法1.1仪器、检测设备主要仪器有:呼吸机(Evita4,Drager公司,德国)、监护仪(HewletttPackardModel66S,惠普公司,美国)、高效液相色谱仪(LC-10,岛津公司,日本)、离心机(上海精密仪器有限公司)、血气分析仪(Premier3000,通用公司,美国)、色谱工作站(CLASS-VP6.2,岛津公司,日本)、pH计(320pH,瑞士梅特勒一托利多上海有限公司)、微量泵(WZ-50C,浙江医科大学医学仪器厂)、色谱柱(DimaC18200mm×4.6mmI.D./5μm,迪马公司,美国)、动脉压力传感器(贝朗医疗有限公司,德国)、自制动物实验手术包等。主要试剂有:布比卡因标准品(批号:S20061002,上海三维制药有限公司)、0.75%布比卡因(批号:6H04004,上海禾丰制药有限公司)、20%英脱利匹特(无锡华瑞制药有限公司)、维库溴铵(浙江仙居制药有限公司)、甲醇(J.T.Baker公司,美国)、叔甲醚(J.T.Baker公司,美国)、三乙胺(Tedia公司,美国)、磷酸(Tedia公司,美国)、生理盐水(上海旭东海普药业有限公司)、正己烷(国药集团化学试剂有限公司)、氢氧化钠(国药集团化学试剂有限公司)等。1.2实验方法1.2.1lectroctoriogh监测无目的饲养新西兰大白兔16只缓慢静脉给予20%乌拉坦1.0~1.2g/kg麻醉,连续三导联心电图(electrocardiograph,ECG)监测。气管T形切开后进行气管内插管,然后连接呼吸机行控制性机械通气,设定吸入氧浓度为100%,容量模式,潮气量15~18ml/kg,呼吸频率40次/min。根据呼气末二氧化碳分压(endialcarbondioxidepartialpressure,P1.2.2两组恒速输注后血清控制指标麻醉后新西兰大白兔随机分为对照组和实验组,每组7只。为减少麻醉对实验的影响,两组动物均在给予乌拉坦后60min时,静脉缓慢匀速推注0.1%布比卡因2mg/kg,持续时间3min内,然后在7min内,分别给予以下处理:对照组静脉恒速输注生理盐水15ml/kg,而实验组恒速输注20%英脱利匹特15ml/kg。两组动物均在布比卡因开始输注后的第3min(即布比卡因输注完毕时)、10min、20min、30min、40min、50min和60min时,动脉抽血测定血浆布比卡因浓度。布比卡因开始输注后的第65min时开胸后取左心室心肌,测定心脏组织布比卡因浓度。1.2.4待去线产物的测定200μl血浆加入100μl4%NaOH,先涡旋30s后,然后再加入3ml萃取液涡旋3min,以3000r/min离心,持续10min。抽取有机相2ml,35℃水浴下持续氮气吹干,试管残留物加入100μl流动相后涡旋30秒,以12000r/min离心,持续10min。抽取上层液75μl加入容积250μl的管形瓶中,高效液相色谱法(high-performanceliquidchromatography,HPLC)系统每次抽取上层液25μl自动检测。心脏组织布比卡因浓度测定过程:心肌组织标本解冻后,先用滤纸吸干标本表面液体,再取0.5g组织加入2ml的50%甲醇匀浆,取200μl的匀浆液进行分析,操作方法同血浆分析过程。根据各时间点的布比卡因图谱面积计算各时间点血浆布比卡因浓度,并使用Winlonin软件计算给予布比卡因10min后的药代动力学参数。1.2.5标准曲线绘制抽取无实验目的正常兔血浆0.5ml,分别加入各种浓度的布比卡因标准液,浓度范围在20~5000ng/ml(取8个浓度点,分别是20、50、100、200、500、1000、2000和5000ng/ml),然后采用以上血浆布比卡因浓度测定的处理方法进行高效液相测定,以布比卡因的浓度对布比卡因峰面积值行线性回归,绘制标准曲线。1.3方法的线性范围、回归方程采用SPSS18.0统计软件进行统计学分析,计量资料以均数±标准差(ue0af±s)表示。两组平均动脉压(meanarterialpressure,MAP)、心率(heartrate,HR)的比较采用重复测量数据方差分析;两组相同时间点血浆布比卡因浓度、药代动力学参数和心肌布比卡因浓度的组间比较采用独立样本t检验;采用Excel2003计算线性回归方程。P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1过性改变、10min内恢复布比卡因输注过程中偶有室性早搏,QRS增宽,但均为一过性改变,10min内均恢复正常。布比卡因开始输注后第0~60min期间的MAP和HR,2组差异无统计学意义(P>0.05),见表1。2.2高效液相图谱锋面积的线性回归分析新西兰大白兔血浆布比卡因浓度区间在20~5000ng/ml时,其和高效液相图谱锋面积成良好线性相关,相关系数显示线性回归方程为:Y=58.84X+395,R2.3血浆布比卡因浓度实验组与对照组血浆布比卡因浓度分布布比卡因开始输注后第3min时,实验组和对照组血浆布比卡因浓度差异无统计学意义(P>0.05),而在其它相同时间点的血浆布比卡因浓度,实验组均显著高于对照组(P<0.01),见表2。对照组心肌布比卡因浓度为(304±61)ng/g,显著高于实验组[(176±50)ng/g,P<0.01]。2.4药房动态参数对照组房室参数t3布比卡因的用量临床麻醉管理水平的提高和新型局麻药的应用,大大降低了局麻药中毒的发生率,硬膜外麻醉局麻药中毒的发生率约为4/10000,外周神经阻滞约为7.5/10000~20/10000目前脂肪乳剂快速逆转局麻药中毒的动物实验和临床报道逐渐增多,还有学者发现脂肪乳剂对其它脂溶性药物的中毒具有治疗作用实验中选择布比卡因和英脱利匹特的剂量选择考虑多个方面。选择2mg/kg布比卡因的原因如下:作者早期计划给予大剂量10mg/kg布比卡因致兔心脏停搏,检测整个中毒和复苏过程中的布比卡因药代动力学变化,但作者发现各组动物的复苏结果和复苏成功的时间不同,复苏过程中的血流动力学也不同,这些对药代动力学都有很大影响,不能准确反映药代动力学变化。预实验发现2mg/kg布比卡因虽然可致一过性偶发室性早搏,但对新西兰大白兔血流动力学无显著影响,给予脂肪乳剂可准确反映其对布比卡因药代动力学的影响。选择20%英脱利匹特15ml/kg对布比卡因药代动力学的影响有以下原因:20%脂肪乳剂在大鼠的LD作者在先前的研究中发现,使用脂肪乳剂或生理盐水预处理后,给予布比卡因导致心脏骤停时的心肌布比卡因浓度两组没有统计学差异1.2.3流动相v/v回收反应血浆和心肌布比卡因浓度测定采用高效液相技术,使用液-液萃取方法。萃取液为正己烷和叔甲醚,容积比例1∶1(v/v),预