烟草基因型对烟气中sod,gsh-px和mda的影响

烟草基因型对烟气中sod,gsh-px和mda的影响

中国的卷烟生产和消费是世界上最重要的。有研究表明,吸烟与慢性阻塞性肺疾病、心血管疾病、肺癌等存在密切的相关性本研究采用体外细菌诱变分析(Ames试验)和大鼠亚慢性毒性试验,初步分析了新型烟草的毒理学效应,旨在为指导烟草品种的遗传改良提供理论依据。1材料和方法1.1鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验CS-1为我国烟草栽培品种,CS-2为山西农业大学烟草育种室培育的新型烟草品种,这2种测试所用的单料烟,均由山西昆明烟草有限责任公司卷制;鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型标准菌株TA97,TA98,TA100和TA102,均由中国检验检疫研究院提供。健康、清洁级SD大鼠(雄性,6周龄,体质量约180g),购自军事医学科学院动物实验中心。1.2试剂SOD,GSH-Px和MDA检测试剂盒,购自南京建成生物工程研究所。1.3多功能酶标仪;高速冷冻离心检验光学显微镜(OlympusBX51,日本);石蜡切片机(LeicaRM2255,德国);多功能酶标仪(SpectraMaxM5,美国);高速冷冻离心机(KDC-140HR,安徽中科中佳);高速匀浆机(S10,宁波新芝)等。1.4方法参考GB15193.4—2003《鼠伤寒沙氏菌门/哺乳动物微粒体酶试验》其制备参照ISO标准1.4.1.肝组织匀浆s的制备多氯联苯溶于玉米油中,大鼠腹腔注射(剂量为500mg/kg),5d后颈椎脱臼处死。在无菌超净工作台内,解剖取出肝脏,去除肝脏周围的结缔组织,用冰冷的0.15mol/LKCl溶液清洗,称质量,用电动匀浆器将其制成肝组织匀浆,4℃,9000r/min离心10min,吸出上清液即为S依据GB15193.4—2003CSE设5个剂量组(分别稀释0,2,4,8,16倍),另外设置酒精和无菌水混合液为阴性对照(V∶V=1∶1),敌克松和2-氨基芴为阳性对照。在添加代谢活化物(+S1.4.2亚慢性毒性试验参考Zeng等按照试剂盒说明书进行SOD,GSH-Px和MDA含量测定。1.5均值标准差表示采用SPSS16.0统计软件进行分析处理,所有数据均以均值±标准差表示。采用One-wayANOVA进行单因素方差分析和差异显著性检验,P<0.05为差异显著。2结果与分析2.1生物学特征的测定试验菌株生物学特性鉴定结果表明,各菌株均符合生物学特性的要求。2.2同时，由于平板摄入试验的再现突变结果采用平板掺入法分别检测2种CSE对鼠伤寒沙门氏菌TA97,TA98,TA100和TA102菌株在-S2.3农机病理改变病理观察结果显示,对照组大鼠肺组织结构正常,肺组织中无明显炎症细胞浸润;小支气管壁结构完整且无增厚现象(图2-A)。试验大鼠烟熏暴露14d后呈现出病理改变,支气管壁周围及肺间质间有炎症细胞浸润(图2-B,E)。烟气暴露时间延长至28d后,炎症细胞聚集、浸润愈加严重,肺泡腔不规则扩大,部分肺泡间隔断裂,但支气管管壁无明显变化(图2-C,F)。烟熏56d后,肺泡结构紊乱,肺泡间隔断裂愈加严重,形成较大的囊腔。支气管管壁黏膜皱壁增多并突入管腔内,导致官腔狭窄。CS-1组肺泡腔扩大损伤程度明显比CS-2组严重(图2-D,G)。2.4不同烟气暴露对大鼠sod,gsh-px活力的影响从图3可以看出,烟气暴露56d后,CS-1组SOD活性显著低于对照组,而CS-1和CS-2组的GSH-Px活力均显著高于对照组(P<0.05);但试验组CS-1与CS-2组的SOD,GSH-Px活力差异均不显著(P>0.05)。烟气暴露28d后,试验组大鼠血清中的MDA含量,随着烟气暴露时间的延长均显著高于对照组(P<0.05)。烟气暴露56d后,CS-1组的MDA含量较CS-2组提高了14.5%,表明CS-1组大鼠脂质损伤程度比CS-2组严重。3吸烟和自由基有研究显示,香烟烟雾含多种诱变剂和致癌剂,吸烟与人类30%的肿瘤发生密切相关有研究表明,香烟烟雾中富含自由基,每喷出的一口烟雾中大约含101.4.1测试方法ase1.4.1.1.香烟烟雾提取物cse的制备1.4.1.3.真菌生物学特性的测定1.4.1.4采用平板混合法[12]进行检测1.4.2.1.香烟暴露1.4.2.组织病理学观察收集肺组织,用预冷的0.9%生理盐水清