药物分析08第八章杂环类药物分析课件

第八章杂环类药物的分析

AnalyticalofHeterocyclicdrugs第八章杂环类药物的分析

AnalyticalofHe本章简介本章介绍五类：1、吡啶类：异烟肼、尼克刹米和硝苯地平2、喹啉类：硫酸奎宁、奎尼丁、盐酸环丙沙星等3、托烷类：硫酸阿托品、氢溴酸东莨菪碱等4、吩噻嗪类：氯丙嗪、异丙嗪、奋乃静和盐酸硫利达嗪等5、苯并二氮杂卓类：地西泮、奥沙西泮和氯氮卓等杂环化合物：碳环中夹杂有非碳原子的环状有机化合物，其中非碳原子称为杂原子，一般为O、S、N等。在化学合成药中，已成为现代药物中应用最多、最广的一大类。本章简介本章介绍五类：杂环化合物：碳环中夹杂有非碳原子的环状第一节吡啶类药物一、典型药物的结构与主要化学性质（一）典型药物的结构

吡啶（pyridine）异烟肼（isoniazid）第一节吡啶类药物一、典型药物的结构与主要化学性质3药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件4（二）主要化学性质

1.弱碱性

吡啶环上的氮为碱性氮原子，吡啶环的pKb

值为8.8（水中）。尼可刹米除了吡啶上氮外，β位上被酰氨基取代。酰氨基化学性质不甚活泼，但遇碱水解后释放出具有碱性的二乙胺，故可以进行鉴别。

（二）主要化学性质5

2．还原性

异烟肼的吡啶环γ位上被具有还原性酰肼取代，可被氧化剂氧化，可与含羰基的化合物发生缩合反应。

3．吡啶环的特性

异烟肼和尼可刹米的吡啶环α、α’位未取代，而β或γ位被羧基衍生物所取代；硝苯地平的吡啶环β、β’位被甲酸甲酯所取代，其吡啶环可发生开环反应。

2．还原性异烟肼的吡啶环γ位上被具有还原性6二、鉴别试验（一）吡啶环的开环反应

本反应适用于吡啶环的α、α’位无取代基的异烟肼和尼可刹米。1.戊烯二醛反应（köning反应）尼可刹米+溴化氰H2O戊烯二醛衍生物苯胺黄色二、鉴别试验（一）吡啶环的开环反应1.戊烯二醛反应（kön7（黄色~黄棕色）（黄色~黄棕色）82．二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）吡啶及其衍生物+2,4-二硝基氯苯至熔融或混合

醇制KOH紫红色无水条件2．二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）吡啶及其衍9采用本法鉴别异烟肼、尼可刹米时，需适当处理，即将酰肼氧化成羧基或将酰胺水解为羧基后进行鉴别。如异烟肼鉴别：采用本法鉴别异烟肼、尼可刹米时，需适当处理，10异烟肼不经处理的反应：异烟肼+2，4-二硝基氯苯乙醇OH-紫红色异烟肼不经处理的反应：异烟肼+2，4-二硝基氯苯乙醇OH11（二）酰肼基团的反应

1．还原反应异烟肼+AgNO3异烟酸银+N2+Ag(白色）银镜异烟肼+亚硒酸硒（红色）1．还原反应异烟肼+AgNO3异烟酸银+N2+Ag(白色）122．缩合反应

异烟肼的酰肼基与芳醛缩合形成腙，其有固定的熔点，可用以鉴别。ChP和BP均采用本法鉴别.

异烟腙黄色结晶mp为228℃～231℃

2．缩合反应异烟腙13-NH2活性-CH2-+1，2-萘醌-4-磺酸OH-红色-NH2+1，2-萘醌-4-磺酸OH-红色14（三）

形成沉淀的反应

具有吡啶环的结构，可与重金属盐类及苦味酸等试剂形成沉淀。

如尼可刹米+CuSO4+硫氰酸铵草绿色尼可刹米异烟肼+HgCl2白色（三）

形成沉淀的反应尼可刹米+CuSO4+硫氰酸铵草绿色15

（四）分解产物的反应使湿润的红色石蕊试纸变蓝尼可刹米异烟肼+无水Na2CO3Ca(OH)2吡啶臭尼可刹米+NaOH

二乙胺使湿润的红色石蕊试纸变蓝尼可刹米+无水Na2CO3吡啶16（五）

紫外吸收光谱特征

本类药物的分子结构中均含有芳杂环，在紫外光区有特征吸收，其最大、最小吸收波长及百分吸收系数可供鉴别。本类药物的紫外特征吸收鉴别方法见下表。本类药物的紫外特征吸收鉴别方法

药物溶剂λmax（nm）λmin（nm）E1cm1%

异烟肼HCl（0.01mol/L）265—

约420水266234378尼可刹米HCl（0.01mol/L）263—285NaOH（0.1mol/L）255—840260—860

硝苯地平无水乙醇333—140（五）

紫外吸收光谱特征17

（一）异烟肼中游离肼的检查

1.TLC法

Ch.P中异烟肼及其注射,采用TLC法中杂质对照法。

对照品：硫酸肼0.20mg/ml（相当于游离肼50μg）

薄层板：硅胶（用羧甲基纤维素钠溶液制备）

展开剂：异丙醇-丙酮（3：2）

显色剂：乙醇制对-二甲氨基苯甲醛试液

检测结果：供试品主斑点前方，不得显黄色斑点

三、有关物质检查三、有关物质检查18

BP的检查方法：

供试品溶液制备:

取异烟肼1.0g，加丙酮-水(1:1)制成10ml.

对照溶液制备:

取硫酸肼50mg，加水50ml使溶解后，加丙酮稀释至100ml；量取10ml，加供试品溶液0.2ml，加丙酮-水(1:1)稀释至100ml。

薄层板：硅胶GF254薄层板

展开剂：醋酸乙酯-丙酮－甲醇－水(50:20:20:10)

显色剂：乙醇制对-二甲氨基苯甲醛试液BP的检查方法：19

检测结果：

于254nm紫外光下检测，供试品中的杂质斑点强度应小于对照溶液中异烟肼色谱斑点；再喷以对-二甲氨基苯甲醛溶液，并在日光下检视，对照溶液中硫酸肼斑点的强度大于供试液中的杂质斑点。检测结果：20

2．比浊法

JP（14）采用样品中加水杨醛的乙醇溶液观察混浊的方法来控制游离肼的限量。

此法专属性差，因异烟肼(慢)和硫酸肼均生成腙而析出沉淀。

213.差示分光光度法

肼异烟肼+对-二甲氨基苯甲醛黄色缩合物对-二甲氨基苯甲醛连氮(λmax=456nm有最大吸收)形成的缩合产物对-二甲氨基苄叉(于λmax=456nm波长处无吸收)

可在456nm波长处测定并计算二者的差示吸收度ΔA456，同时以对照品比较法计算游离肼含量。3.差示分光光度法肼+对-二甲氨基苯甲醛黄色缩合22

具体测定法：

对照品溶液：硫酸肼CR＝1μg/ml

5ml+丙酮λmax=456nm测A1+对-二甲氨基苯甲醛(ΔA456＝A2－A1)ΔAR5mlλmax=456nm测A2

供试品溶液：异烟肼C＝2mg/ml

游离肼CX=ΔAs/AR×CR

1份+丙酮

λmax=456nm测A1

+对-二甲氨基苯甲醛

(ΔA456＝A2－A1)ΔAs

2份

λmax=456nm测A2药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件23(二)尼可刹米中有关杂质检查

因有关杂质的化学结构不明，故Ch.p采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。

(二)尼可刹米中有关杂质检查24

(三)硝苯地平中有关物质检查

硝苯地平遇光分子内部发生光化学歧化作用，降解为4-（2-硝基苯基）-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸二甲酯（A）和4-（2-亚硝基苯基）-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸二甲酯（B）。其化学结构如下:(三)硝苯地平中有关物质检查25具体方法

1。供试液Ⅰ和Ⅱ的制备2。有关杂质对照品液Ⅰ和Ⅱ的制备3.色谱条件与灵敏度调节填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶

流动相：甲醇-水（3：2）；检测波长：235nm。取对照品溶液Ⅱ20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使杂质A和B组分色谱峰的峰高为满量程的20%；杂质A和B组分之间，杂质B与硝苯地平之间的分离度均符合规定。具体方法264.有关物质检测

取供试液Ⅰ和对照液Ⅱ各20μl，分别进样记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试液Ⅰ如出现与对照液Ⅱ中杂质A和B相对应的峰，其峰面积不得大于对照液Ⅱ中杂质A和B的峰面积；如出现除杂质A和B以外的其他杂质峰，其峰面积不得大于对照液Ⅱ中硝苯地平的峰面积；各杂质总量不得大于0.5%。供试液Ⅰ中小于对照液Ⅱ中硝苯地平峰面积的10%以下的杂质峰忽略不计。

4.有关物质检测27

一、基本结构与化学性质（一）典型药物的结构硫酸奎宁硫酸奎尼丁（quininesulfate）(quinidinesulfate)第二节

喹啉类药物一、基本结构与化学性质第二节喹啉类药物28

盐酸环丙沙星(ciprofloxacinhydrochloride)盐酸环丙沙星29（二）主要化学性质

1.碱性

喹啉环上的氮原子具有碱性，与强酸形成稳定的盐。

环丙沙星与盐酸成盐，奎宁和奎尼丁可与二元酸成盐，结构中喹核碱含脂环氮，碱性强，可与硫酸成盐；而喹啉环系芳环氮，碱性较弱，不与硫酸成盐。奎宁pKb1为5.07，pKb2为9.7，饱和溶液的pH值为8.8。奎尼丁pKb1为5.4，pKb2为10。

（二）主要化学性质302.旋光性硫酸奎宁为左旋体，其比旋度为-237o至-244o；硫酸奎尼丁为右旋体，其比旋度为+275o至+290o；而盐酸环丙沙星无旋光性。3.荧光特性硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光，而盐酸环丙沙星则无荧光。2.旋光性硫酸奎宁为左旋体，其比旋度为-237o至-231

（一）绿奎宁反应（Thalleioquin）

绿奎宁反应是奎宁和奎尼丁的特殊鉴别反应。其反应如下：Ch.P收载方法二、鉴别试验（一）绿奎宁反应（Thalleioquin）二、鉴别试验32（二）光谱特征1.UVCh.P采用本法鉴别盐酸环丙沙星。2.荧光光谱特征硫酸奎宁和硫酸奎尼丁，在稀H2SO4中均显蓝色荧光，盐酸环丙沙星则无荧光，可用于本类药物的鉴别。3.IRCh.P中硫酸奎宁和盐酸环丙沙星均采用红外光谱的方法进行鉴别，而硫酸奎尼丁未采用此法。（二）光谱特征33（三）无机酸盐

硫酸奎宁、硫酸奎尼丁→硫酸根－氯化钡＝白色沉淀盐酸环丙沙星→盐酸根－硝酸银＝白色沉淀（三）无机酸盐34

（一）硫酸奎宁中特殊杂质检查

1.酸度主要控制药物中酸性杂质。用pH计测定,pH为5.7～6.6。

2.氯仿-乙醇中不溶物主要控制药物中不溶性杂质或无机盐类.

3.其他金鸡纳碱主要控制硫酸奎宁中其他生物碱，因没有合适的对照品，因此采用薄层色谱中的高低浓度对比法进行检查。三、特殊杂质检查（一）硫酸奎宁中特殊杂质检查三、特殊杂质检查35（二）盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查1。酸度主要控制药物中酸性杂质。用pH计测定,pH为3.0～4.5。2.溶液的澄清度与颜色主要控制本品中不溶性物质和有色杂质。3.有关物质主要控制本品中可能引入结构不清的有关杂质，采用HPLC法中归一化法进行检查，其检查方法如下：（二）盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查36色谱条件与系统适用性试验：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱流动相：0.05mol/L枸橼酸-乙腈(82:18)用三乙胺调节pH值3.检测器：UV检测波长为277nm；按盐酸环丙沙星峰计算n＞2000;

盐酸环丙沙星峰与相邻杂质峰的分离度R＞1.5.测定方法：取本品适量，加水制成每1ml中含0.4mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度和记录仪衰减，使主成分的峰高为记录仪满量程的2-4倍，记录时间应为主成分峰保留时间的2倍。按面积归一化法计算，杂质总量不得超过1.5%。

药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件37

一、基本结构与化学性质（一）典型药物的结构

硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱（atropinesulfate）(copolaminehydrobromide）第三节托烷类药物一、基本结构与化学性质第三节托烷类药物38（二）主要化学性质1。水解性本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。以阿托品为例，水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。2.碱性

阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有叔胺氮原子,具有较强的碱性,易与酸成盐。如阿托品的pKb1为4.35。（二）主要化学性质2.碱性阿托品和东莨菪碱的结构中，五393.旋光性

氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋体，比旋度为-24ο至-27ο，而阿托品结构中虽然也含有不对称碳原子，但因外消旋化而为消旋体，无旋光性。利用此性质可区别阿托品与东莨菪碱。

3.旋光性40（一）托烷生物碱一般鉴别试验二、鉴别试验生物碱水解莨菪酸发烟硝酸

三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固体KOH有色的醌型产物（深紫色）（一）托烷生物碱一般鉴别试验二、鉴别试验生物碱水解莨菪酸发烟41（二）氧化反应

本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：（二）氧化反应42(三)沉淀反应

本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。如：阿托品+氯化汞醇试液黄色沉淀东莨菪碱+氯化汞醇试液白色沉淀(三)沉淀反应43硫酸阿托品：水溶液加氯化钡生成白色沉淀，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解；加醋酸铅试液也生成白色沉淀，在醋酸铵或氢氧化钠试液中溶解。氢溴酸东莨菪碱：水溶液加硝酸银试液，生成淡黄色凝乳沉淀，能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶；滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层显黄色或红棕色。（四）硫酸盐与溴化物反应硫酸阿托品：水溶液加氯化钡生成白色沉淀，沉淀在盐酸或硝酸中均44

1.酸度

东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过其5%水溶液的pH值为4.0～5.5，来控制本品中的酸性杂质。

2.其他生物碱三、氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查本品水溶液+氨试液不混浊合格混浊存在其他生物碱+KOH试液混浊（东莨菪碱）三、氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查本品水溶液+氨试液不混浊合格混45

3.易氧化物

主要是检查本品在生产中可能引入的阿扑阿托品及其它含有双键的有机物质，可使KMnO4溶液褪色。3.易氧化物46第四节吩噻嗪类药物一、基本结构与化学性质（一）结构特点与典型药物R’:-H、-Cl、-CF3、 -COCH3、-SCH2CH3R:具有2～3碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物第四节吩噻嗪类药物一、基本结构与化学性质R’:-H、-C47药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件48药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件49奋乃静奋乃静50癸氟奋乃静癸氟奋乃静51盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静52盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪53（二）主要化学性质1.紫外和红外吸收光谱特征硫氮杂蒽母核为共轭三环л系统

三个最大吸收峰别在：205nm、254nm、300nm由于2位、10位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。

硫氮杂蒽母核的硫为二价，易氧化为砜和亚砜，其紫外吸收光谱有明显不同，它们具有四个峰值。另外，取代基R和R’的不同，则可产生不同的红外光谱（二）主要化学性质542.易氧化呈色二价硫易氧化，遇不同氧化剂如硫酸、硝酸、三氯化铁试液及过氧化氢等，随着取代基的不同，而呈不同的颜色。

3.与金属离子络合呈色

本类药物中未被氧化的硫，可与钯离子形成配位化合物，其氧化产物则无此反应。此性质可用于鉴别和含量测定，并具有专属性，可消除氧化产物的干扰。2.易氧化呈色二价硫易氧化，遇不同氧化剂如硫酸、硝酸、55（一）紫外特征吸收和红外吸收光谱

本类药物可用UV和IR鉴别，Ch.P中UV鉴别实例如下：

药物名称溶剂浓度（μg/ml）λmax（nm）AE1%1cm盐酸氯丙嗪盐酸（9→1000）52540.46915306—

—盐酸异丙嗪盐酸（0.01mol/L）6249—883~937奋乃静无水乙醇72580.65—癸氟奋乃静乙醇10260—

—盐酸氟奋乃静盐酸（9→1000）10255—553~593盐酸三氟拉嗪盐酸（1→20）10256—630盐酸硫利达嗪乙醇8264与315—

—二、鉴别试验（一）紫外特征吸收和红外吸收光谱二、鉴别试验56

（二）显色反应

1.与氧化剂的显色反应

药物名称硫酸硝酸过氧化氢

盐酸氯丙嗪显红色,渐变淡黄色—盐酸异丙嗪显樱桃红色,放置生成红色沉淀,加热即溶解,后颜色渐变深溶液由红色转变为橙黄色奋乃静—

—显深红色;放置后红色渐褪去盐酸氟奋乃静显淡红色,温热—

—后变成红褐色盐酸三氟拉嗪—生成微带红色的白色沉淀;放—置后,红色变深,加热后变黄色

盐酸硫利达嗪显蓝色

—

—

（二）显色反应57

2.与钯离子络合显色反应

利用分子结构中未被氧化的硫与金属钯离子络合形成有色络合物，如与癸氟奋乃静形成红色络合物。2.与钯离子络合显色反应58药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件59（三）分解产物的反应

癸氟奋乃静碳酸钠及碳酸钾F-+酸性茜素锆试液[ZrF6]2-配位离子，茜素磺酸钠游离使溶液由红色变为黄色。600℃炽灼600℃炽灼60

(一)盐酸异丙嗪中特殊杂质检查

主要有：2-二甲氨基-1-丙醇；N,N,β-三甲基-10H-吩噻嗪-10-乙胺异构体和结构不清的分解产物

。因此采用TLC法中的

高低浓度对比法控制上述这些杂质的限量。(二)盐酸硫利达嗪中有关物质检查

本品遇光不稳定，在生产和贮藏过程中易引入有关物质，因其结构不清，因此也采用TLC法中的高低浓度对比法控制杂质的限量。三、特殊杂质检查(一)盐酸异丙嗪中特殊杂质检查三、特殊杂质检查61第五节苯并二氮杂卓类药物一、结构特征与典型药物

地西泮阿普唑仑奥沙西泮氯氮卓(diazepam)(alprozolam)(oxazepam)(chlordiazepoxide)第五节苯并二氮杂卓类药物一、结构特征与典型药物62碱性： 非水溶液滴定法测定含量水解： 在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物，具有的特性可用于鉴别和含有测定二、化学性质碱性：二、化学性质

(一)化学鉴别试验

1。沉淀反应

氯氮卓

橙红色沉淀

阿普唑仑盐酸氟西泮

＋KBiI4

也生成橙红色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀颜色变深，

因此可以相互区别。三、鉴别试验阿普唑仑+遇硅钨酸白色沉淀，药典中也用于鉴别。(一)化学鉴别试验三、鉴别试验阿普唑仑+遇硅钨酸642.水解后呈芳伯胺反应

氯氮卓和奥沙西泮，其反应如下：2.水解后呈芳伯胺反应65药物硫酸稀硫酸地西泮黄绿色黄色氯氮卓黄色紫色艾司唑仑亮绿色天蓝色硝西泮淡蓝色蓝绿色3.硫酸-荧光反应

本类药物溶于硫酸/稀硫酸后，在紫外光（365nm）下，显不同颜色的荧光。例如：药物硫酸稀硫酸地西泮黄绿色黄色氯氮卓黄色紫色艾司唑仑亮绿色天4.分解产物的反应

本类药物多为有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，显氯化物反应。Ch.P用于地西泮和三唑仑药物的鉴别。

5.氯化铜焰色反应

分子结构中含有氯元素的药物，在铜网上燃烧发出CuCl2绿色火焰。此反应药典未用于本类药物鉴别。4.分解产物的反应

本类药物多为有机氯化合物，用氧67

（二）紫外特征吸收和红外吸收光谱

药物名称溶剂浓度（μg/ml）λmax（nm）A

地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242约0.51282

约0.23366氯氮卓盐酸溶液(9→1000)7245,308阿普唑仑盐酸溶液(9→1000)12264盐酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2,284±2比值1.95～2.50362±2氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2,307±2奥沙西泮乙醇10229,315±2(较弱)

红外吸收光谱:已用于地西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、盐酸氟西泮、氯硝西泮和奥沙西泮的鉴别。

药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件68（三）TLC法

1.常用的五种苯并二氮杂卓类药物的TLC法

按常规法点样10μl于硅胶G薄层板上，以苯-丙酮（3：2）为展开剂,饱和15min，用上行法展开15cm，挥发溶剂，用稀硫酸喷雾，于105℃干燥30min，置紫外灯下检视荧光斑点，结果见表8-6。

（三）TLC法692.酸水解产物的TLC法

利用苯并二氮杂卓类药物经酸水解产生的二苯甲酮衍生物进行鉴别。由于不同的苯并二氮杂卓类药物水解后可能会获得相同的二苯甲酮衍生物，因此本法的专属性较差。

（三唑仑、阿普唑仑等经水解后不产生二苯甲酮衍生物，可以区别）。2.酸水解产物的TLC法70

1.地西泮中有关物质的检查

地西泮在合成过程中因其副反应，可能引入N-去甲基苯甲二氮卓及化学结构不清的有关物质，可采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。

2.氯氮卓中有关物质的检查

USP(24)用TLC法检查氯氮卓中的有关物质，并规定其分解产物2-氨基-5-氯-2-苯甲酮含量不得过0.01%；中间体7-氯-1，3-二氢-5-苯基-2H-1，4-苯并二氮杂卓-2-酮-4-氧化物含量不得过0.1%。四、特殊杂质检查1.地西泮中有关物质的检查地西泮在合成过程中因其副反713.氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法

色谱条件：色谱柱为250mm×2.6mm（i.d.）Nucleosil10C18柱；

n=3000；流动相为甲醇-磷酸液(0.05mol/L)(60:40),40%氢氧化钠溶液调pH为6.0；流速为1ml/min;紫外检测器波长为254nm。

检测结果：氨基物（Ⅱ）的tR为12.0min、氧化物（Ⅲ）的tR

为4.3min，痕量杂质（Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ）的tR为13.8、3.6、4.7min。

3.氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法72(二)降解产物的检查

地西泮注射液列入此项检查，因本品在贮藏过程中有可能分解成2-甲氨基-5-氯-二苯甲酮等杂质。采用HPLC法进行检查。(二)降解产物的检查73一、非水溶液滴定法(一)基本原理第六节含量测定当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。一、非水溶液滴定法第六节含量测定当HA酸性较强时，反应不能74(二)一般方法供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果高氯酸滴定液滴定以空白试验校正(二)一般方法供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢75(三)问题讨论1.适用范围

主要用于Kb＜10-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为8～13的弱碱性药物采用本法滴定。

一般来说：

Kb为10-8～10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；药物的Kb为10-10～10-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；Kb＜10-12时，应用醋酐作为溶剂。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。

(三)问题讨论76

2.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：

高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸

消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2

量不足终点不明显，结果偏低。

2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

过量(1～3倍)不影响测定结果2.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递773.滴定剂的稳定性非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10℃时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正：

p3064.终点指示方法常用电位法和指示剂法。Ch.P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。3.滴定剂的稳定性非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有78(四)应用实例

1.游离弱碱性药物测定

异烟肼、尼可刹米、地西泮及氯氮卓等。基于这些药物分子结构中氮原子的弱碱性，可用非水溶液滴定法直接测定其含量。由于这些药物的碱性强弱不同，测定时所采用溶剂、指示剂及其指示终点的方法也不尽相同。

药物名称取样量(g)溶剂指示剂终点颜色

尼可刹米0.15冰醋酸10ml结晶紫蓝绿色地西泮0.2冰醋酸、酸酐10ml结晶紫绿色氯氮卓0.3冰醋酸10ml结晶紫蓝色(四)应用实例79

2.氢卤酸盐类药物测定

当这些药物溶于冰醋酸时，由于氢卤酸在冰醋酸中酸性较强，对测定有干扰，必须先加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成难以电离的卤化汞，而氢卤酸盐药物，则转变成可测定的醋酸盐。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可获得满意的结果。应用示例如下：

药物名称取样量(g)溶剂加入醋酸汞试液(ml)指示剂终点颜色盐酸氯丙嗪0.2醋酐10ml5橙黄Ⅳ玫瑰红色盐酸异丙嗪0.3冰醋酸10ml4结晶紫蓝色盐酸氟奋乃静0.3冰醋酸20ml5结晶紫蓝绿色盐酸环丙沙星0.2冰醋酸25ml5橙黄Ⅳ粉红色氢溴酸东莨菪碱0.3冰醋酸20ml5结晶紫纯蓝色盐酸硫利达嗪0.3丙酮100ml5电位滴定法

2.氢卤酸盐类药物测定803.硫酸盐类药物测定

硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二级解离，生成SO42-，但在非水介质中，只显示一元酸解离为HSO4-，即只供给一个H+，所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。3.硫酸盐类药物测定81（1）硫酸阿托品测定：阿托品为碱性较强的

一元碱药物，因而硫酸阿托品的化学结构式可以简写为(BH+)2·SO42-，用高氯酸直接滴定时的反应式为：(BH+)2·SO42-+HClO4→(BH+)·ClO4-+(BH+)·HSO4-可根据1mol的硫酸阿托品消耗1mol高氯酸的关系计算其含量。（1）硫酸阿托品测定：阿托品为碱性较强的(BH+)2·SO482（2）硫酸奎宁测定：奎宁为二元碱，其中喹核碱的碱性较强，可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能与硫酸成盐，而保持游离状态。当用高氯酸直接滴定硫酸奎宁时，1mol的硫酸奎宁消耗3mol的高氯酸。其反应式如下：(C20H24N2·H+)2SO4+3HClO4→(C20H24N2·2H+)·2ClO4-

+(C20H24N2·2H+)·HSO4-·ClO4-

Ch.P和USP(24)都采用此法测定硫酸奎宁和硫酸奎尼丁的含量。（2）硫酸奎宁测定：奎宁为二元碱，其中喹核碱的碱性较强，83(3)硫酸奎宁片的测定：

硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。此时1摩尔的硫酸奎宁可消耗4摩尔的高氯酸，因此片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同。

药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件844.硝酸盐的测定

硝酸在冰醋酸介质中酸性不强，滴定反应可以进行完全。但是硝酸具有氧化性可以破坏指示剂使其变色，使指示剂无法指示终点。因此采用非水溶液滴定法测定硝酸盐时，一般不用指示剂法而用电位法指示终点。4.硝酸盐的测定855.磷酸盐与有机酸盐

磷酸与有机酸在冰醋酸介质中酸性极弱，不影响滴定反应的定量完成，可以按常规方法直接滴定。5.磷酸盐与有机酸盐86（一）硝苯地平的测定

基本原理硝苯地平的测定原理，可用下列反应式表示：

终点时:微过量的Ce4+将指示剂中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙红色配合物离子呈淡蓝色或无色，以指示终点的到达。二、铈量法（一）硝苯地平的测定二、铈量法87（二）吩噻嗪类药物的测定药物Ce(SO4),-e红色Ce(SO4),-2e红色消退自身指示终点或电位法、永停法指示终点（二）吩噻嗪类药物的测定药物Ce(SO4),-e红色Ce(88(一）酸性染料比色法

1.基本原理三、比色法三、比色法89

2.影响因素

(1)水相最佳pH值的选择：本法中水相的pH应使有机碱性药物均成阳离子(BH+)，而酸性染料应电离足够的阴离子(In-),阴阳离子才能定量生成离子对，并完全溶于有机溶剂中，而过量的染料完全保留在水相中，才能保证定量的测定。

(2)酸性染料及其浓度：常用酸性染料有溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚绿等。酸性染料浓度，对测定影响不大，有足够量即可。

2.影响因素90(3)有机溶剂的选择

有机碱药物应对离子对提取率高，不与水混溶，或能与离子对形成氢键的有机溶剂。常用的有机溶剂有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、苯、甲苯、四氯化碳等。(4)水分的影响：严防水分混入有机溶剂中，水相中过量有色酸性染料，而影响测定结果；水分的混入使氯仿混浊，而影响比色测定。一般加入脱水剂，或滤纸过滤的方法，除去混入的水分。(3)有机溶剂的选择有机碱药物应对离子对提取率高，不与913.应用示例

Ch.P中硫酸阿托品片、氢溴酸东莨菪碱片和氢溴酸山莨菪碱片等，采用本法测定含量测定。3.应用示例92（二）钯离子比色法优点：钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定。

max~500nm吩噻嗪类药物

+Pd2+pH2±0.1红色络合物在

max处测定A，以对照法定量（二）钯离子比色法优点：max~500nm吩噻嗪类药物+93（一）直接分光光度法

供试品不需提取分离，溶于适当的溶剂中即可进行含量测定。

1.奥沙西泮原料的测定在229nm，采用标准对照法测定。

2.盐酸异丙嗪片的测定在249nm，采用E1cm1%＝910测定。

3.盐酸异丙嗪注射液的测定

测定波长的选择：注射液处方加VC作抗氧剂，可还原异丙嗪红色氧化产物，从而防止异丙嗪氧化变色。VC在盐酸异丙嗪最大吸收波长249nm处有吸收，干扰注测定。因此选用299nm波长测定盐酸异丙嗪注射液的含量时，维生素C在此波长处则不产生干扰,但E1cm1%＝108。四、紫外分光光度法（一）直接分光光度法四、紫外分光光度法94(二)萃取后分光光度法盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪氨水碱化氯丙嗪乙醚提取乙醚层盐酸提取盐酸氯丙嗪

max254±1nm处测定A，E1cm1%＝915(二)萃取后分光光度法盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪氨水碱化氯丙95（三）萃取-双波长分光光度法

本法是USP（24）收载的方法，用于盐酸氯丙嗪注射液的含量测定，主要用来校正样品中氧化物对测定的干扰。测定原理利用氯丙嗪的最λmax为254nm，其氧化物在此波长也有吸收，同时在277nm氧化物也有吸收，且其A254=A277.而氯丙嗪在此波长无吸收。因此，可由两波长处测得△A计算氯丙嗪含量。（三）萃取-双波长分光光度法96药物分析08第八章杂环类药物分析ppt课件97五、气相色谱法（一）硫酸阿托品片的含量测定

USP(24)采用的方法。以后马托品作为内标,采用标准对照法。

测定方法

(1)内标溶液的制备：(2)供试品溶液与对照品溶液的制备：(3)色谱系统：色谱柱为1.8m×2mm的玻璃柱；担体为与碳酸钠混合于900℃熔融后，经酸和碱处理的硅烷化藻土；固定相为3%的OV-17（即50%甲基，50%苯基的聚硅氧烷）；载气为氮气，流速为25ml/min；检测器为氢火焰离子化检测器。五、气相色谱法（一）硫酸阿托品片的含量测定98

(4)系统适用性试验：取对照品溶液1μl，进样6次，所得的对照品和内标峰面积之比的RSD不大于2.0%；对照品峰和内标峰的分辨率Rs＜4.0；T＜2.0。

(5)测定方法：取供试液和对照液各进样1μl，记录各峰面积，用下式计算所取片粉中硫酸阿托品[(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O]的重量:[(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O]的重(mg)=(694.85/676.83)(W/10)(Ru/Rs)（二）人血浆中硝苯地平的气相色谱法测定及药代动力学研究(5)测定方法：取供试液和对照液各进样1μl，记录99

(一)反相高效液相色谱法

1.地西泮注射液的反相HPLC法

地西泮注射液曾用萃取后分光光度法测定含量，因萃取不完全，及有关物质和分解产物等对测定有干扰，故中国药典自1995版改用HPLC法。此法