章抗原抗体反应

临床免疫学检验

（ClinicalImmunoassay）昆明医科大学附属甘美医院检验医学教研室田敏

(MinTian)

学好临床免疫检验，必须掌握“一个核心，三个要素与四个标记”。一个核心：抗原抗体反应(Antigen-antibodyinteraction)三个要素：抗原、抗体和免疫细胞四个标记：酶标记技术、放射免疫标记技术、荧光素标记技术与化学发光标记技术。第二章抗原抗体反应

目的掌握:

1.抗原抗体反应原理及特点。

2.带现象、前带、后带、亲合力、亲和力概念。熟悉:

影响抗原抗体反应的因素。了解:

免疫学检测的类型。

（antigen-antibodyreaction）

概念：抗原抗体反应是指抗原抗体的特异性结合反应体内杀菌、溶菌、调理、中和毒素免疫病理损伤—超敏反应、免疫性疾病等体外：凝集、沉淀、溶细胞、中和毒素、补体结合等曾称：serologicalreaction本章内容：§1抗原抗体反应的原理§2抗原抗体反应的特点§3影响抗原抗体反应的因素§4免疫学检测的类型第一节

抗原抗体反应的原理基本原理：特异性（AD----HVR）可见性（凝集、沉淀、溶血等）结合力(4种)高度互补（AD-HVR）紧密接触产生结合力抗原

抗体带电离子异性相吸静电引力分子极化范德华引力形成氢键氢键引力形成疏水基团

疏水作用力作用最小最具特异性作用最大抗原抗体结合可见反应比例合适抗原抗体结合力1.静电引力（electrostaticforces）或库仑引力（Cou-lombicforces）指带电离子基团（如：—NH3+和—COO-）之间的引力，距离越近引力越大。2.范德华引力（VanderWaalsforces）

分子间（或原子间)相互接近，分子极化产生引力，其作用取决于分子空间构型，如：凹槽与凸起互补，抗原与抗体，酶与底物。能量小于静电引力。（3）氢键结合力（hydrogenboundingforce）

指供氢体氢原子与受氢体原子之间的引力—“氢键桥梁”，能量大于范德华引力。4.疏水作用力（hydrophobicforce）

指疏水基团间排斥水分子，相互聚集的力。作用力最强，占总结合力的50％。

抗原抗体结合力大小都与两分子间的距离密切相关只有两分子表面密切接触时，才能产生足够的力使其结合抗原与抗体之间高度的空间互补结构恰好为这些结合力的发挥提供了条件

结合力的大小

亲和力（affinity）表示

亲合力（avidity）一个抗体结合点与一个抗原表位间的结合强度。“（singlepoint－－－singlepoint）”亲和力用平衡常数表示：K=K1/K2亲和力（affinity）：即：结合常数/解离常数

K值越大，亲和力越高，与抗原的结合越牢固亲合力（avidity）指整个抗体分子与抗原表位之间结合的强度

“allpoints-------allpoints”与抗体的结合价直接相关。亲合力高，与抗原结合牢固不易解离。第二节

抗原抗体反应的特点一、特异性（specificity）概念：一种抗原只能与其相应的抗体结合起反应（eg.）分子基础：Ag-ADHVR-Ab空间结构高度互补VH和VL各具三个HVR与AD互补意义免检中常用已知Ag未知Ab，反之亦然。查相对性：当抗原之间有相同或相似结构的AD时（共同抗原）交叉反应（crossreaction）干扰结果实验诊断如何解决？如何利用？两种不同的抗原分子具有相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应抗原抗体交叉反应示意图交叉反应（crossreactions）二、比例性

(proportionality)指抗原抗体的量比关系，即只有当抗原抗体的浓度比例适当时，才出现可见反应。以沉淀反应为例（Ab量固定,Ag量递增）

图Question：等价带前带后带

抗原抗体反应比例性示意图Why?抗原多价，抗体双价二者比例合适Ag/Ab过剩网格学说网格学说（图）抗体的两个Fab段分别结合两个Ag分子，相互交叉结合连接成巨大的网格状立体聚合物，（可见）。二者比例合适：Ab/Ag过剩过剩方的结合价得不到饱和，大多数游离存在，只形成小分子复合物（不可见）。网格学说（图）切记！！！！确定

的浓度非常重要，即在实验中需对Ag/Ab进行适当的

，调整二者的比例，产生可见反应。一般原则：固定

含量（Ag/Ab）的浓度，稀释

含量的(Ab/Ag)。一般可溶性Ag稀释

，颗粒性Ag，稀释

。Ag/Ab稀释低高AgAb三、可逆性（reversibility）或表面性解离1.Ag+AbAg—A