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文档简介
金黄色葡萄球菌定性检验金黄色葡萄球菌定性检验
1.了解金黄色葡萄球菌生物学特性。
2.掌握金黄色葡萄球菌定性检测程序和检验方法。
学习目的与要求1.了解金黄色葡萄球菌生物学特性。学习目的一、生物学特性——菌体形态及培养特征革兰氏阳性球菌,直径为0.5-1.0微米,镜检时呈单个、成对、四联或不规则的簇群,如葡萄状,故称为葡萄球菌。一、生物学特性——菌体形态及培养特征革兰氏阳性球菌,直径为0大多数菌株产生类胡萝卜素,使细胞团呈现出深橙色到浅黄色,色素的产生取决于生长的条件,故称金黄色葡萄球菌(高盐甘露醇平板:金黄色葡萄球菌为淡黄色菌落;其他葡萄球菌为白色菌落)。大多数菌株产生类胡萝卜素,使细胞团呈现出深橙色到浅黄色,色素
最适生长温度37℃,最适pH为7.4;兼性厌氧菌,在好氧条件下生长最好;可在高盐环境下生长,15%氯化钠环境下还能生长;一般用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌或7.5%氯化钠肉汤增菌。最适生长温度37℃,最适pH为7.4;
所有的毒株产生血浆凝固酶,人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。金黄色葡萄球菌产生磷脂酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶等,大多数菌株可水解天然的动物蛋白并释放脂肪酸。在BP平板产生磷脂环。所有的毒株产生血浆凝固酶,人和动物来源的菌株通常可凝生物学特性——致病性金黄色葡萄球菌为条件致病菌,菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶:a.溶血素:外毒素,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死;在血平板培养出现溶血环。b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞;c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。d.耐热核酸酶
e.肠毒素:引起急性胃肠炎。生物学特性——致病性金黄色葡萄球菌为条件致病菌,菌株致葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病,可引发不同程度的急性胃肠炎症状,恶心、呕吐最为突出而且普遍,腹痛、腹泻次之。当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品,如牛奶和奶制品、肉、蛋等,在温度条件适宜时,经8-10小时即可相当数量的肠毒素。葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病,可引发不同程二、检验程序与操作方法食品安全国家标准GB4789.10-2016食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验第一法金黄色葡萄球菌定性检验
二、检验程序与操作方法食品安全国家标准GB4789.10-检样25g(ml)样品+225ml7.5%氯化钠肉汤,均质Baird-parker平板,血平板BHI肉汤和营养琼脂小斜面涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验报告36±1℃36±1℃18h-
24hBP平板
24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-
24h检样25g(ml)样品+225ml7.5%氯化钠肉汤,均质Baird-parker平板,血平板BHI肉汤和营养琼脂小斜面涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验报告36±1℃36±1℃18h-
24hBP平板
24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-
24h检样25g(ml)样品+225ml7.5%氯化钠肉汤,均质Baird-parker平板,血平板BHI肉汤和营养琼脂小斜面涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验报告36±1℃36±1℃18h-
24hBP平板
24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-
24h检样25g(ml)样品+225ml7.5%氯化钠肉汤,均质Baird-parker平板,血平板BHI肉汤和营养琼脂小斜面涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验报告36±1℃36±1℃18h-
24hBP平板
24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-
24h检样25g(ml)样品+225ml7.5%氯化钠肉汤,均质检样Baird-parker平板,血平板BHI肉汤和营养琼脂检验程序——样品处理
称取25g(mL)样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤的无菌均质杯内,8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或放入盛有225mL7.5%氯化钠肉汤无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min。检验程序——样品处理称取25g(mL)样品至检验程序——增菌
利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性(最高可耐受15%的氯化钠),用7.5%氯化钠肉汤增菌。
36±1℃培养18h~24h。检验程序——增菌利用金黄色葡萄球菌耐盐的特检验程序——分离培养(血平板和BP平板)血平板:金黄色葡萄球菌可以产生溶血素,因此在血平板上产生明显的溶血环。典型菌落:呈金黄色,有时也为白色,大而突起,圆形,不透明,表面光滑,菌落周围有完全透明溶血环。检验程序——分离培养(血平板和BP平板)血平板:金黄色葡萄大而突起,圆形,不透明,表面光滑,有溶血环阳性阴性大而突起,圆形,不透明,表面光滑,有溶血环阳性阴性BP(贝尔德-帕克)平板:胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和矿物元素丙酮酸钠是一种生长促进剂亚碲酸盐对除金黄色葡萄球菌外的其他能分解卵黄的菌株有毒性,并使菌落产生黑色卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。检验程序——分离培养BP(贝尔德-帕克)平板:检验程序——分离培养
在BP平板上典型菌落为:圆形,表面光滑、凸起、湿润、菌落直径为2mm~3mm,颜色呈灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圈(沉淀),其外常有一清晰带。当用接种针触及菌落时具有黄油样黏稠感。有时可见到不分解脂肪的菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同。从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落,其黑色常较典型菌落浅些,且外观可能较粗糙,质地较干燥。
在BP平板上典型菌落为:圆形,表面光滑、凸起B-P平板圆形、光滑、黑色有光泽,周围绕以不透明圈,其外有清晰带B-P平板圆形、光滑、黑色有光泽,周围绕以不透明圈,其外有革兰氏阳性,球形,葡萄状,无芽孢,无荚膜检验程序——确证鉴定1.革兰氏染色镜检革兰氏阳性,球形,葡萄状,无芽孢,无荚膜检验程序——确证鉴检验程序——确证鉴定2.血浆凝固酶试验
金黄色葡萄球菌可以产生血浆凝固酶,因此对其鉴别的主要试验是测定其凝固酶。试管法挑取BP平板或血平板上至少5个可疑菌落(少于5个全选,分别接种于BHI肉汤和营养琼脂小斜面,36±1℃培养18h-24h。取0.5mL无菌生理盐水加入瓶装冻干兔血浆中至完全溶解,加入培养后的BHI肉汤培养物0.2-0.3mL,振荡摇匀,放36±1℃恒温箱或水浴内,每半小时观察一次,观察6h,如凝固体积大于原体积一半时,判定为阳性。如结果可疑,从营养琼脂小斜面挑去菌落到BHI肉汤,重复凝固酶试验。检验程序——确证鉴定2.血浆凝固酶试验金不凝固少量、零散凝固明显的块状凝固巨大块凝固完全凝固,倒置不流动阴性阳性不凝固少量、零散凝固明显的块状凝固巨大块凝固完全凝固,倒置不试管法试管法结果报告在25g(mL)样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。即:检出/25g(mL)或未检出/25g(mL)结果报告在25g(mL)样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。小结了解金黄色葡萄球菌的生物学特性(耐盐,能产毒素、凝固酶等)掌握检验流程知识点:增菌液,BP平板和血平板的典型菌落特征,凝固酶试验。小结了解金黄色葡萄球菌的生物学特性(耐盐,能产毒素、凝固酶等历史ⅱ岳麓版第13课交通与通讯的变化资料精品课件欢迎使用历史ⅱ岳麓版第13课交通与通讯的变化资料精品课件欢迎使用金黄色葡萄球菌检验课件金黄色葡萄球菌检验课件金黄色葡萄球菌检验课件[自读教材·填要点]一、铁路,更多的铁路1.地位铁路是
建设的重点,便于国计民生,成为国民经济发展的动脉。2.出现1881年,中国自建的第一条铁路——唐山
至胥各庄铁路建成通车。1888年,宫廷专用铁路落成。交通运输开平[自读教材·填要点]一、铁路,更多的铁路交通运输开平
3.发展(1)原因:①甲午战争以后列强激烈争夺在华铁路的
。②修路成为中国人
的强烈愿望。(2)成果:1909年
建成通车;民国以后,各条商路修筑权收归国有。4.制约因素政潮迭起,军阀混战,社会经济凋敝,铁路建设始终未入正轨。修筑权救亡图存京张铁路3.发展修筑权救亡图存京张铁路
二、水运与航空1.水运(1)1872年,
正式成立,标志着中国新式航运业的诞生。(2)1900年前后,民间兴办的各种轮船航运公司近百家,几乎都是在列强排挤中艰难求生。2.航空(1)起步:1918年,附设在福建马尾造船厂的海军飞机工程处开始研制
。(2)发展:1918年,北洋政府在交通部下设“
”;此后十年间,航空事业获得较快发展。轮船招商局水上飞机筹办航空事宜处二、水运与航空轮船招商局水上飞机筹办航空事宜处三、从驿传到邮政1.邮政(1)初办邮政:1896年成立“大清邮政局”,此后又设
,邮传正式脱离海关。(2)进一步发展:1913年,北洋政府宣布裁撤全部驿站;1920年,中国首次参加
。邮传部万国邮联大会三、从驿传到邮政邮传部万国邮联大会2.电讯(1)开端:1877年,福建巡抚在
架设第一条电报线,成为中国自办电报的开端。(2)特点:进程曲折,发展缓慢,直到20世纪30年代情况才发生变化。3.交通通讯变化的影响(1)新式交通促进了经济发展,改变了人们的通讯手段和
,
转变了人们的思想观念。(2)交通近代化使中国同世界的联系大大增强,使异地传输更为便捷。(3)促进了中国的经济与社会发展,也使人们的生活
。台湾出行方式多姿多彩2.电讯台湾出行方式多姿多彩[合作探究·提认知]
电视剧《闯关东》讲述了济南章丘朱家峪人朱开山一家,从清末到九一八事变爆发闯关东的前尘往事。下图是朱开山一家从山东辗转逃亡到东北途中可能用到的四种交通工具。[合作探究·提认知]
电视剧《闯关东》讲述了济南章丘依据材料概括晚清中国交通方式的特点,并分析其成因。
提示:特点:新旧交通工具并存(或:传统的帆船、独轮车,近代的小火轮、火车同时使用)。
原因:近代西方列强的侵略加剧了中国的贫困,阻碍社会发展;西方工业文明的冲击与示范;中国民族工业的兴起与发展;政府及各阶层人士的提倡与推动。依据材料概括晚清中国交通方式的特点,并分析其成因。[串点成面·握全局][串点成面·握全局]金黄色葡萄球菌检验课件
一、近代交通业发展的原因、特点及影响1.原因(1)先进的中国人为救国救民,积极兴办近代交通业,促进中国社会发展。(2)列强侵华的需要。为扩大在华利益,加强控制、镇压中国人民的反抗,控制和操纵中国交通建设。(3)工业革命的成果传入中国,为近代交通业的发展提供了物质条件。一、近代交通业发展的原因、特点及影响2.特点(1)近代中国交通业逐渐开始近代化的进程,铁路、水运和航空都获得了一定程度的发展。(2)近代中国交通业受到西方列强的控制和操纵。(3)地域之间的发展不平衡。3.影响(1)积极影响:促进了经济发展,改变了人们的出行方式,一定程度上转变了人们的思想观念;加强了中国与世界各地的联系,丰富了人们的生活。(2)消极影响:有利于西方列强的政治侵略和经济掠夺。2.特点1.李鸿章1872年在上海创办轮船招商局,“前10年盈和,成为长江上重要商局,招商局和英商太古、怡和三家呈鼎立之势”。这说明该企业的创办 (
)A.打破了外商对中国航运业的垄断B.阻止了外国对中国的经济侵略C.标志着中国近代化的起步D.使李鸿章转变为民族资本家1.李鸿章1872年在上海创办轮船招商局,“前10年盈和,成解析:李鸿章是地主阶级的代表,并未转化为民族资本家;洋务运动标志着中国近代化的开端,但不是具体以某个企业的创办为标志;洋务运动中民用企业的创办在一定程度上抵制了列强的经济侵略,但是并未能阻止其侵略。故B、C、D三项表述都有错误。答案:A解析:李鸿章是地主阶级的代表,并未转化为民族资本家;洋务运动二、近代以来交通、通讯工具的进步对人们社会生活的影响(1)交通工具和交通事业的发展,不仅推动各地经济文化交流和发展,而且也促进信息的传播,开阔人们的视野,加快生活的节奏,对人们的社会生活产生了深刻影响。(2)通讯工具的变迁和电讯事业的发展,使信息的传递变得快捷简便,深刻地改变着人们的思想观念,影响着人们的社会生活。二、近代以来交通、通讯工具的进步对人们社会生活的影响2.清朝黄遵宪曾作诗曰:“钟声一及时,顷刻不少留。虽有万钧柁,动如绕指柔。”这是在描写 (
)A.电话B.汽车C.电报 D.火车解析:从“万钧柁”“动如绕指柔”可推断为火车。答案:D2.清朝黄遵宪曾作诗曰:“钟声一及时,顷刻不少留。虽金黄色葡萄球菌检验课件[典题例析][例1]
上海世博会曾吸引了大批海内外人士利用各种交通工具前往参观。然而在19世纪七十年代,江苏沿江居民到上海,最有可能乘坐的交通工具是 (
)A.江南制造总局的汽车B.洋人发明的火车C.轮船招商局的轮船D.福州船政局的军舰[典题例析][例1]上海世博会曾吸引了大批海内外人[解析]由材料信息“19世纪七十年代,由江苏沿江居民到上海”可判断最有可能是轮船招商局的轮船。[答案]
C[解析]由材料信息“19世纪七十年代,由江苏沿江居[题组冲关]1.中国近代史上首次打破列强垄断局面的交通行业是(
)A.公路运输 B.铁路运输C.轮船运输 D.航空运输解析:根据所学1872年李鸿章创办轮船招商局,这是洋务运动中由军工企业转向兼办民用企业、由官办转向官督商办的第一个企业。具有打破外轮垄断中国航运业的积极意义,这在一定程度上保护了中国的权利。据此本题选C项。答案:C[题组冲关]1.中国近代史上首次打破列强垄断局面的交通行业是2.右图是1909年《民呼日报》上登载的一幅漫画,其要表达的主题是(
)A.帝国主义掠夺中国铁路权益B.西方国家学习中国文化C.西方列强掀起瓜分中国狂潮D.西方八国组成联军侵略中国2.右图是1909年《民呼日报》上登载的解析:从图片中可以了解到各国举的灯笼是火车形状,20世纪初的这一幅漫画正反映了帝国主义掠夺中国铁路权益。B项说法错误,C项不能反映漫画的主题,D项时间上不一致。答案:A解析:从图片中可以了解到各国举的灯笼是火车形状,20世纪初的金黄色葡萄球菌检验课件[典题例析][例2]
(2010·福建高考)上海是近代中国茶叶的一个外销中心。1884年,福建茶叶市场出现了茶叶收购价格与上海出口价格同步变动的现象。与这一现象直接相关的近代事业是(
)A.电报业 B.大众报业C.铁路交通业 D.轮船航运业[解析]材料主要反映了信息交流的快捷,故选A。[答案]
A[典题例析][例2](2010·福建高考)上海是近[题组冲关]3.假如某爱国实业家在20世纪初需要了解全国各地商业信息,可采用的最快捷的方式是 (
)A.乘坐飞机赴各地了解B.通过无线电报输送讯息C.通过互联网D.乘坐火车赴各地了解解析:本题考查中国近代物质生活的变迁。注意题干信息“20世纪初”“最快捷的方式”,因此应选B,火车速度远不及电报快。20世纪30年代民航飞机才在中国出现,互联网出现在20世纪90年代。答案:B[题组冲关]3.假如某爱国实业家在20世纪初需要了解全国各地4.下列不属于通讯工具变迁和电讯事业发展影响的是(
)A.信息传递快捷简便B.改变着人们的思想观念C.阻碍了人们的感情交流D.影响着人们的社会生活解析:新式通讯工具方便快捷,便于人们感情的沟通和交流。答案:C4.下列不属于通讯工具变迁和电讯事业发展影响
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