组化和免疫组化染色结果定量测定课件

第十四章.组化和免疫组化染色结果的定量测定(TheQuantitationAssayofHistochemistryImmunohistochemistryStaining)将组化,免疫组化和原位杂交等的染色结果分析提高到定量水平.最常用的有图像分析术(mageanalysistechnique),显微分光光度术(Microspectrophotomettechnique),流式细胞术,(Techniqueofflowcytometry,FcM)和激光扫描共聚焦显微镜术Techniqueoflaserscanningconfocalmicroscopy,LSCM)f第十四章.组化和免疫组化染色结果的定量测定1.图像分析术A.目测半定量:依据反应产物的面积和颜色深浅,主观性大B.图像分析仪(mageanalyzer:又称图像分析系统1.主要结构和工作原理:a.显微镜:获取染色结果的光学信息.b.图像输入装置:摄像机或扫描器,将光学信息输入电脑c.电脑:将光学信息转换成电子信息将光学信号的灰度分为256级可发现染色深浅的微小差别彩色有两种:真彩色(Realcolo)是指标本染色的真实颜色,而假彩色(Pseudocolor是指将不同灰度转换成不同的颜色以增强对比度d.输出装置:显示器或打印机等给出图象表面几何形状测量(体积面积表面积长度等和图象密度测量(数目)等客观数据.图像分析术22.应用:定量给出组织细胞形态的几何参数和组织结构(包括宏观和微观)的特征性参数,从平面测量推算到空间参数和组织结构的三维图像重建3注意事项加c9a.照片高质量高倍对照组照片的放大倍数应相同b复染会影响灰度值的准确性.c.必要时要进行图像的加工处理,如阳性区选择和图像切割2.应用:定量给出组织细3左侧睾丸和附睾体部精子结合抗原蛋白异构体11(SPAG11日免疫组化染色西安交通大学医学院解剖与组胚专业博士生田宏2019左侧睾丸:A左侧假手术对照组;B.精索静脉曲张(ELV)2周组周;C.ELV4周附睾体部:D左侧假手术对照组;E.ELV2周;FELV4周左侧睾丸和附睾体部精子结合抗原蛋白异构体11(SPAG11日4TestisEpidydimisControl10392±2.291181727210082±2.5512385±1.26Controln55551155512.279844+3.13127.35±0.76ELV大鼠睾丸和附睾SPAG11E免疫组化灰度值测定结果睾丸:ELV2周和4周组SPAG1E蛋白的平均灰度值与其相应的对照组比较未见明显改变(P>0.05附睾:ELV2周和4周组SPAG11E蛋白的表达均较同期对照组显著减弱(P<0.05或P≤0.01),ELV4周组附睾SPAG11E蛋白的表达较ELV2周组显著减弱(P<0.01)Testis5组化和免疫组化染色结果定量测定课件6组化和免疫组化染色结果定量测定课件7组化和免疫组化染色结果定量测定课件8组化和免疫组化染色结果定量测定课件9组化和免疫组化染色结果定量测定课件10组化和免疫组化染色结果定量测定课件11组化和免疫组化染色结果定量测定课件12组化和免疫组化染色结果定量测定课件13组化和免疫组化染色结果定量测定课件14组化和免疫组化染色结果定量测定课件15组化和免疫组化染色结果定量测定课件16组化和免疫组化染色结果定量测定课件17组化和免疫组化染色结果定量测定课件18组化和免疫组化染色结果定量测定课件19组化和免疫组化染色结果定量测定课件20组化和免疫组化染色结果定量测定课件21