治疗药物监测工作中常见血药浓度测定方法的研究进展

治疗药物监测工作中常见血药浓度测定方法的研究进展

在过去五年中，通过出版和分发药物监测（tdm），人们达到了一个新的水平。随着技术的发展和计算机的普及，tdm工作中出现了一种新的氛围，其效果也越来越受到重视。详情如下。一、sdm主要特点为在TDM中最常见的血药浓度测定方法有三类,即:光谱学、色谱学和免疫学,由于光谱学的灵敏低、专属性差,单独应用已经越来越少,常与色谱学结合使用。(一)色谱学中以HPLC在TDM中最为常用,发展也快,目前还处在方兴未艾的时候,一些新技术的引入,提高了HPLC的灵敏度与分离度,使TDM的工作不断深入。1.液-固萃取法在体液样品处理中的应用.液-固萃取法(LSE)是应用LC原理处理样品,将萃取剂填入小柱,以溶剂淋洗老化,将样品通过,药物保留在小柱上,用适当溶剂洗去杂质,再用适当溶剂将药物洗脱下来。本法操作简单,样品处理迅速,容易自动化。2.连接柱的应用。将液一固萃取柱作为预柱与HPLC连接,增加一个泵,先将样品泵经预柱或富集柱,使起到纯化与富集作用,再泵经分析柱,能提高分析的灵敏度。此法可举一反三,装配成双泵双柱,或三泵双柱、或双泵三柱等各种形式。甚至有的工厂根据此原理,设计制成专用的萃取仪,操作更方便,效率更高,如吉尔森的自动试样萃取仪。3.HPLC多种药物分析系统.本系统充分发挥了色谱仪的分离性能,使一台HPLC同时能测定多种药物,还可以通过更换流动相和紫外检出器的波长,使测定的药物可达数十种以上。Bio-Rad公司销售同一类药物的专用柱和流动相,如苯二氮(二)免疫学方法是TDM中常规测定最常用的方法。由于其灵敏度高,样品用量少,对TDM工作者有很大的吸引力,近年来这方面发展也较快。七十年代初,放免法的应用曾促进了TDM的开展,七十年代后期,酶免法代替了放免法,克服了放免法的同位素污染,而作为常规测定方法之一.八十年代初期萤光免疫法又提高了免疫学方法的稳定性,八十年代中期,萤光偏振免疫法的出现,进一步提高了荧光免疫法的灵敏度,尤其自动化程度高、性能稳定的TDx血药浓度测定仪的推厂,使TDM工作真正能成为常规化的可能,也使TDM工作者从繁重费时的分析中解放出来,促使TDM深入发展。免疫方法还在发展,如荧光偏振免疫法单一试剂的应用二、疾病控制的疗效药效主要由游离药物产生,游离药物浓度与血浆蛋白结合率有关,其个体差异比药动学的个体差异小得多,但(一)与血浆蛋白具有高度亲和力的药物,其蛋白结合呈明显的浓度依赖,如双异丙吡胺是血浆蛋白结合引起非线性动力学的典型.(二)疾病可改变药物与血浆蛋白的结合率.如肝硬化病人奎尼停的游离药物分数几乎增加三倍;肾病时,苯妥英、水杨酸、安妥明等的血浆蛋白结合率明显下降.(三)有些药物血浆蛋白结合率存在着明显的个体差异,如奎尼停的血浆蛋白结合率的范围为50～90%,不同个体间游离药物浓度差达10倍.(四)游离药物浓度简易测定方法的建立,是促进游离药物测定的重要条件。在治疗药物监测的领域里常用的有二种:一是平衡透析法,常应用改进了的装置,将一张透析膜夹在二块有对应孔穴的不锈钢块中,夹紧,在透析膜二侧分别加样品与渗透液,在一定温度下放置一定时间,测定药物浓度;另一种是超滤法,将样品通过超滤膜,可以应用减压法、加压法或者离心法(也是一种加压法)三、活性代谢的监测除前体药物外,一般情况下,由于活性代谢物浓度低,并不显得重要,然而,当活性代谢物浓度不低时、活性较强时、肾功能有障碍时,对活性代谢物的存在应给予足够的重视(一)活性代谢的检测1.有利于深入指导临床合理用药.2.有助于解释血药浓度与药效间的矛盾,如浓度与效应间的不平行现象.3.也有助于解释和预防治疗期间出现的某些不良反应,即某些药物代谢物的治疗活性不一定很高,然而,肾功能障碍时.代谢物的浓度积蓄到一定程度时,出现不良反应.由于色谱方法的发展,分离度与灵敏度都有很大的提高,代谢物的测定方法正在逐步解决.当前问题比较突出的是活性代谢物标准品的来源不易,尤其在国内解决更困难.乙胺碘酜酮及N-去乙基碘酜酮;利多卡因及GX、MEGX;奎尼停及3-羟基尼奎停;扑(四)代谢是否有积累1.代谢物药理活性与原型药物的关系,它们的作用是相加、协同或拮抗,作用强度比是多少?2.代谢物与原型药物的处置动力学有无异同?3.肝、肾功能有障碍时,代谢物是否有积累,积累程度为多少?四、屏幕监控(一)不同的康复剂具有不同的效果（见表1）(二)不同给药途径对映射体的影响1.药物对映体的总体清除率的不同见表2.2.给消旋体后,血浆中对映体的比值有较大的个体差异,如单剂量口服40mg心得安消旋体后,对映体比值在15例病人上的3.在不同给药途径时,对映体的比值也是不同的。如给戊脉安后,首过效应优先选择性转化R(一)对映体。因此,戊脉安(一)/(+)比值,iv时为0.56±0.10,po时为0.23±0.05,欲得到相同的PR间期延长值时,po给药比iv给药需要更高的血药总浓度。(三)物体的测量1.化合物衍生物化标准(1)应用化学结合手性固定相、流动相中加入手性复合物、用手性化合物衍生物化等方法,分离消旋体中的对映体。(2)手性固定相柱已广泛用于分离酸性和碱性药物,如阿托品、达舒平、布洛芬、酮基布洛芬、美多心胺、镇痛新、心得安、托卡因、戊脉羟、间羟舒喘宁等.(3)衍生物化后再用色谱法分离,如心得安可应用(一)N-trifuoroacetyl-1-prolylchloride(TPC)试剂衍生物化.对映体选择放免测定法的试剂包括化学立体选择性的抗血清,和高度光学纯的放射性配体的结合.现已有氚标的戊巴比妥、华法令及已巴比妥的药合。五、体化给药与生物资本七十年代Sheiner和Beal等基于非线性混合效应模型的理论,编制了NONMEM程序,到八十年代逐渐发展为一步法估算群体药动学参数,并开始应用于治疗药物监测的回顾性分析,以及新药上市前群体药动学特征的分析。群体药动学参数在个体化给药中,有着极其重要的地位.给药个体化可以概括为三个阶段:经验法、个体化药动学参数法、和群体药动学参数结合个体血药浓度反馈法(即NONMEM程序结合Bayesian反馈法),第三阶段国外已经开始,并正在发展中,国内处在萌芽状态.NONMEM程序不仅可以应用在来源于均匀群体数据的拟合与参数的估算,其更突出的优点是应用在来源于非均匀群体数据的拟合与参数的估算。所谓非均匀群体数据是指每一个病人所取的样本,在时间和次数上都是不相同的,可以把多个病人,每个病人的少数数据积累起来使用,因此,它可以与日常的TDM工作结合起来,易为病人所接受,结果也更具有代表性。一步法估算群体药动学参数,结合Bayesian反馈方法估算个体化药动学参数,设计个体化给药方案,将使合理用药提高到一个新水平.六、血药浓度与药物浓度的关系治疗药物效果的评值,最直接的方法是监测药理效应或临床效果,但在很多情况下,定量评价效果或效应是很困难的,因此,常常通过测定血