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流式细胞术系列讲座之一免疫标记流式细胞术免疫标记应用简介2009-12-03流式细胞术系列讲座之一免疫标记1上次流式细胞术讲座内容(概述)流式细胞术的一般介绍流式细胞术在临床检测和科研中的应用上次流式细胞术讲座内容(概述)2中性拉细胆流式细胞仪可检测的细胞参数细胞结构细胞功能细胞大小细胞表面蛋白抗原细胞颗粒性程度细胞胞浆内蛋白性细胞表面面积抗原核浆比例细胞内细胞因子DNA含量与细胞周细胞增殖期细胞内钙离子浓度RNA含量中性拉细胆3免疫标记技术免疫标记技术(immunolabellingtechnique):是指用荧光素、放射性同位素、酶、发光剂或电子致密物质等作为示踪剂,标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应流式细胞术检测蛋白质分子:免疫荧光标记技术免疫标记技术4FACSCalibur流式细胞仪能够检测的荧光(Fluorescence)信号FL1(第一荧光)-FITc(异硫氰酸荧光素)FL2(第二荧光)-PE(藻红蛋白)FL3(第三荧光)-PerCP,Pecy5等PL4(第四荧光)-APc(藻青蛋白)听育双色直接染色CDSFITCFACSCalibur流式细胞仪能够检测的荧5流式细胞术免疫荧光标记的应用检测细胞表面蛋白抗原检测细胞胞浆内蛋白性抗原检测细胞内细胞因子优势:在同一细胞上同时检测多种标志流式细胞术免疫荧光标记的应用6血液系统各型细胞免疫标志Haomatopoctistomcolloo兴nglemShorttermMutateHP8-BC2-2RPo-BC2xlpr/iprCML/BLstMRF8-BCRab[BCL2Platelets血液系统各型细胞免疫标志7造祖/干细胞CD34+抗原在早期造血祖细胞内呈高水平表达,随着细表达呈进化性下降,继而消失。CD38抗原是造血干细胞向多系定向分化的标志之一,并随一定的分化过程表达上调■最近发现CD90(Thy-1)是比CD34更早的干、祖细胞■结合多种分化抗原的表达可以作为造血细胞不同发育阶段的标志如CD34+、CD33+细胞群为多能干细胞向髓系定向的标志CD34+、CD19+多为多能干细胞向B系定向的祖细胞CD34+、TdT+、CD10+、CD7+则被认为是向T系定向的祖细胞。造祖/干细胞8T细胞标志T细胞及其亚群T祖细胞(pro-T)的表型为CD34+、TdT+、CD10CD7+未成熟T细胞标志CD3、CD和CD8。在T细胞发育过程中,CD7是最早出现的T细胞标志,且贯穿表达在整个T细胞分化发育过程中胸腺细胞要分化发育为有功能的成熟T细胞,细胞表面标志需经历一定的变化过程。T细胞标志9CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCRCD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR(即CD4、CD8双阴性)CD7+、CD1+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+(即CD4、CD8双阳性)CD7+、CD2+、CD7+、CD2+CD3+、CD4+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR+CD8+、TCR+进入外周淋巴器官和血液,执行免疫功能CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR10流式细胞术免疫标记简介学习资料课件11流式细胞术免疫标记简介学习资料课件12流式细胞术免疫标记简介学习资料课件13流式细胞术免疫标记简介学习资料课件14流式细胞术免疫标记简介学习资料课件15流式细胞术免疫标记简介学习资料课件16流式细胞术免疫标记简介学习资料课件17流式细胞术免疫标记简介学习资料课件18流式细胞术免疫标记简介学习资料课件19流式细胞术免疫标记简介学习资料课件20流式细胞术免疫标记简介学习资料课件21流式细胞术免疫标记简介学习资料课件22流式细胞术免疫标记简介学习资料课件23流式细胞术免疫标记简介学习资料课件24流式细胞术免疫标记简介学习资料课件25流式细胞术免疫标记简介学习资料课件26流式细胞术免疫标记简介学习资料课件27流式细胞术免疫标记简介
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