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基因工程及其应用第2节临沂一中孙晓月基因工程及其应用第2节临沂一中孙晓月能发光的水母不能发光的热带斑马鱼能发光的水母不能发光的热带斑马鱼基因工程及其应用第2节基因工程及其应用第2节学习目标1.简述基因工程的基本原理2.通过模型制作理解基因工程的关键步骤学习目标1.简述基因工程的基本原理一、基因工程(geneengineering)又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。别名原理结果一、基因工程(geneengineering)别名原理结果能产生人胰岛素的大肠杆菌能产生人胰岛素的大肠杆菌美国人在1978年用大肠杆菌生产出了胰岛素,大肠杆菌产生胰岛素并进行批量生产的原理是运用到了现代生物技术的转基因技术,它是先将人胰岛素基因从人的染色体DNA上剪切出来,插入从细菌细胞中提取出来的质粒(作为载体)中,再将这个合并起来的、带有胰岛素基因的质粒,转移入大肠杆菌的细胞中,随后该胰岛素基因会指导大肠杆菌细胞产生胰岛素,人类即可将这些胰岛素提取并收集出来,用于治疗糖尿病病人,给糖尿病患者带来了福音.阅读以下资料,找出能代表培育转基因大肠杆菌关键步骤的三个动词,时间2min。美国人在1978年用大肠杆菌生产出了胰岛素,大肠杆菌产生胰岛1.ONE胰岛素基因从染色体DNA剪切出来2.TWO插入质粒3.THREE胰岛素基因转移入大肠杆菌的细胞中基因的“剪刀”基因的“针线”基因的运载体限制性核酸内切酶DNA连接酶质粒1.ONE胰岛素基因从染色体DNA剪切出来2.TWO插入质粒合作探究根据课本102页最后一段至103页第二段,合作探讨以下问题,4min:1.限制酶的分布、作用及特性2.DNA连接酶的作用、作用对象和作用部位3.运载体的常见种类、作用合作探究根据课本102页最后一段至103页第二段,合作探讨以1、基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶二、基因操作的工具分布:作用:特性:主要存在于原核生物中识别特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子专一性和特异性1、基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶二、基因操作的工具分思考:限制性核酸内切酶切割的是DNA分子的哪个部位磷酸二酯键12思考:磷酸二酯键121、基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶二、基因操作的工具分布:作用:特性:主要存在于原核生物中识别特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子专一性和特异性1、基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶二、基因操作的工具分黏性末端EcoRⅠ例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别
GAATTC序列,并在G和A之间切开。黏性末端EcoRⅠ例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识
被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?思考:被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?思基因的针线:DNA连接酶
G
AA
TT
CC
TT
AA
GG
AA
TT
CC
TT
AA
GGC
TT
AA
AA
TT
C
GG
C
TT
AA
AA
TT
C
GGC
TT
AA
AA
TT
C
G用同种限制酶切割基因的针线:DNA连接酶
GAATTCC作用:2、基因的“针线”——DNA连接酶作用部位:作用对象:两个具有相同末端的DNA分子片段将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。磷酸二酯键作用:2、基因的“针线”——DNA连接酶作用部位:作用对象思考:DNA连接酶与DNA聚合酶有何区别?DNA连接酶DNA聚合酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键只能将单个脱氧核苷酸加到已有的DNA片段上形成磷酸二酯键不需要需要1.形成磷酸二酯键的方式2.是否需要模板思考:DNA连接酶与DNA聚合酶有何区别?DNA连接酶DN条件②能够在宿主细胞中复制并稳定地保存①具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接③具有标记基因,便于进行筛选常用的运载体:质粒、噬菌体和动、植物病毒等3、基因的运输工具——运载体作用:将目的基因转移到受体细胞条件②能够在宿主细胞中复制并稳定地保存①具有多个限制酶切点,
质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物的细胞中,是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子.
质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物的细胞中,是拟核或细基因工程操作的基本步骤示意图读图(课本103页),用自己的话描述基因工程操作的一般步骤。1min.基因工程操作的基本步骤示意图读图(课本103页),用自己的话从大肠杆菌中提取质粒限制酶提取目的基因限制酶目的基因与运载体结合DNA连接酶目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定从细胞中分离出DNA从大肠杆菌中提取质粒限制酶提取目的基因限制酶目的基因与运四个基本步骤:1)提取目的基因2)目的基因与运载体结合3)将目的基因导入受体细胞4)目的基因的检测与鉴定三、基因工程的操作步骤四个基本步骤:1)提取目的基因三、基因工程的操作步骤动动手制作模型模拟基因工程的关键操作步骤,4min
材料:剪刀—限制酶(—G↓AATTC—
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