无菌工艺验证培养基模拟灌装试验

无菌工艺验证培养基模拟灌装试验国家大容量注射剂工程技术研究中心123|42

|Cont

tents培养基灌装相关法规要求如何设计培养基灌装方案

培养基灌装的评价与调查常见问题及FDA

483缺陷

国家大容量注射剂工程技术研究中心3

|

无菌药品基本理念无菌药品的生产须满足其质量和预定用途的要求，应最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染。生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度是达到上述目标的关键因素无菌药品的生产必须严格按照精心设计并经验证的方法及规程进行

|处理或成品检验。国家大容量注射剂工程技术研究中心空调系统资质职责公用设施人员操作生产设备环境监控容器密封质量保证|

质量控制质量受权人

过程控制4

|无菌特性组成清洁消毒

质量保证更衣确认

人员卫生

文件体系物料质量

无菌药品风险分析为基础国家大容量注射剂工程技术研究中心5

|

培养基模拟灌装试验培养基模拟灌装试验---使用培养基作为药品的替代品（Placebo）进行无菌模拟生产，对无菌工艺进行验证。

–

培养基灌装在某种意义上是一种挑战性试验，因为几乎在

所有情况下，微生物在培养基中的繁殖和生长要比在实际

产品中更容易全面反映整个生产过程采用无菌工艺生产无菌产品的能力。

|各国药品法规要求的基本内容。国家大容量注射剂工程技术研究中心6

|培养基模拟灌装试验

相关法规要求

|国家大容量注射剂工程技术研究中心7

||

ng

US

FDA和EU

GMP的要求

FDA

CGMP

无菌工艺药品指南An

aseptic

processing

operatio

on

should

be

validated

using

a

microbiological

growth

mediu

um

in

place

of

the

product.

This

process

simulati

ion,

also

known

as

a

media

fill.

EU

GMP

Annex1

无菌药品的生产Validation

of

aseptic

processin

should

include

a

process

simulation

test

using

a

nutrient

t

medium

(media

fill).国家大容量注射剂工程技术研究中心8

|

2010版GMP附录一：无菌制剂第四十七条

无菌生产工艺的验证应包括培养基模拟灌装试验。

应根据产品的剂型以及培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基。应尽可能模拟常规的无菌生产工艺，包括所有对产品的无菌特性有影响的关键操作，及生产中可能出现的各种干预和最差条件。

培养基模拟灌

|

装试验的首次验证，每班次应连续进行3次合格的试验。空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应重复进行培养基模拟灌装试验。培养基模拟灌装试验通常应按生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。国家大容量注射剂工程技术研究中心9

|

2010版GMP附录一：无菌制剂

培养基灌装容器的数量应足以保证评价的有效性。批量较小的产品，培养基灌装的数量应至少等于产品的批量。培养基模拟灌装试验的目标是零污染，应遵循以下要求：

（1）灌装数量少于5000支时，不得检出污染品；

（2）灌装数量在5000至10000支时：

有1支污染，需调查，可考虑重复试验；

有2支污染，需调查后，进行再验证。

（3)

灌装数量超过10000支时：

|

有1支污染，需调查；

有2支污染，需调查后，进行再验证。

（4）发生任何微生物污染时，均应进行调查。国家大容量注射剂工程技术研究中心批量（瓶）3000允许染菌的数量（瓶）010

|

注册申报要求SFDA

化学药品注射剂基本技术要求（2008）

…

培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证,是判断无菌保证水平的关键手段…工艺验证工作主要为培养基灌装验证试验。灌装的批数、批量与合格标准见表1。

|4750

63007760≤1≤2≤3国家大容量注射剂工程技术研究中心fofo

|11

|

相关指南文件PDA

关于培养基模拟灌装的技术报告

–

PDA

Technical

Repo

ort

No.

28,

Process

Simulation

Testing

or

Sterile

Bulk

Pharmaceutical

Chem

micals,

Revised

Supplement

2006

–

PDA

Technical

Repo

ort

No.22

1996,

Process

Simulation

Testing

or

Aseptically

Filled

Products

）国家大容量注射剂工程技术研究中心12

|培养基模拟灌装试验

试验设计

|国家大容量注射剂工程技术研究中心13

|

1、试验涵盖范围模拟必须包括产品成为无菌状态后的所有的无菌生产工艺步骤(如转运,

灌装,

装载/卸载,

冻干,

加塞,

轧盖)

模拟必须包括所有的无菌处理(如灌装线的设置,

无菌连接,人员的干扰操作)

培养基灌装研究不包括非无菌混合操作或产品的除菌工艺(如无菌过滤)

培养基的制备和灭菌可以与产品的

|国家大容量注射剂工程技术研究中心14

|

2、多产品简化试验思路一条灌装线生产多个产品时，

根据下列因素可被划分为不同的类型组

灌装工艺

不同的容器、密封方式由此选出两个或更多个在下列方面能涵盖所有其它相关产品的产品：

容器的大小、开放或密封的设计

灌装线的速度和干预

|

冻干,

贮存容器的形式、转移的方式推荐使用类似于矩阵式试验设计，选择产品和工艺国家大容量注射剂工程技术研究中心15

|

模拟灌装实验的设计包装容器代表性选择：

–

对于多规格、容器形状不同的灌装生产线，应对不同大

小、形状的容器进行评估。

–

多数可能选用最大敞口直径的容器和最低生产线速度；

–

有时也会选择容易倒落的小型容器用来代表最差情况，

因可能需要更多的人工干预；

–

当不能兼顾

|

时，应考虑选取有代表性的几种容器进行培

养基模拟灌装试验。国家大容量注射剂工程技术研究中心材质与安装质量16

|

3、验证与确认稳定的产品质量性能确认及工艺验证（PQ/PV）可靠的设备性能

运行确认（OQ）安装确认（IQ）

|用户需求与设计

设计确认（DQ）国家大容量注射剂工程技术研究中心17

|

验证开始前的准备工作设备设施确认

HVAC及压空系统（或氮气）的确认

设备的在线清洗和灭菌CIP

P,SIP灭菌工艺验证

湿热、干热灭菌工艺

除菌过滤验证及空气过滤器的完整性检测

容器/胶塞密封完好性测试人员培训

|

无菌更衣确认环境监控符合要求国家大容量注射剂工程技术研究中心18

|

4、模拟灌装实验的设计最差状况：高于或低于正常范围的条件限度，与正常生产条件相比最有可能造成工艺或生产失败的条件。宜尽可能模拟实际无菌生产过程，并包括产品加工中的“最差状况”。其设计应具有以下几方面的代表性：

–

时间代表性

|

–

运行代表性

–

包装容器代表性国家大容量注射剂工程技术研究中心19

|

模拟灌装实验的设计时间代表性：

–

应选择正常工作阶段的不同的时间间隔，并考虑可能

的中断、换班。培养基灌装应持续足够长的时间，覆

盖允许的工艺时间限度，并包括实际加工中最常发生

的操作。操作代表性：

–

根据实际生产中可能发生的动作或操作来设计培养基

|

中发生的、允许和禁止的干预事件的一览表，并在试

验中进行模拟。国家大容量注射剂工程技术研究中心20

|

模拟灌装实验的设计运行代表性：应模拟包括“最差状况”的生产条件下进行培养基灌装。（如：最大干预次数、模拟的加卸料、可能的生产线停机的纠正、灌装针/管的调整和更换、人工轧盖、在线过滤器的更换以及所用人员的数量等）

|国家大容量注射剂工程技术研究中心|21

|

最差条件的设计（1）储存时间的验证灌装设备、部件、储罐、无菌物料、药液在实际灌封前能够放置的最长时间

–

1.

灌封设备、灌封部件、储罐、无菌物料需要再灭菌（除菌

）的时间间隔

•

用超出单项验证后确定的最长保存时间的设备部件、储

罐、无菌物料参与培养基灌装试验

–

2.

产品从无菌过滤到灌封加塞完成所需要的时间

•

无菌过滤后存放在中间储罐内的培养基模拟实际生产时产

品的最大储存时间后再灌封产品在灌装后密封前的储存时间国家大容量注射剂工程技术研究中心22

|

最差条件的设计（2）最长灌装的持续时间最保守的设计：在培养基灌封试验中，模拟生产用时最长的批量所需要的时间，其中包括正常的干扰时间（换班、设备维修）。（一般不采用）其他的设计：1

1.在生产完成后接着进行培养基灌封实验2.为了减少灌封瓶数，在每批试验开始、中间及结束前均灌装培养基，

|

–

任何干扰操作都应在培养基灌装时进行

–

在正常生产过程中所需的最长时间，包括可能发生的事件，人员的

换班等国家大容量注射剂工程技术研究中心|拟一次23

|

最差条件的设计（3）干预的设计所有干预都应是预先设定和进行记录正常的—每班次都会发生（灌封线装配，称量调节，加胶塞/铝盖，处理倒瓶，中控取样，环境监测，手工补充轧盖等）非正常的—非正常情况才会发生（设备故障，灌封线堵塞，轨道调节，拆卸/替换破损的部件）SOP中应列出哪些干预是容许的，非正常的干预至少每年模干预的次数应该等于正常生产时发生的次数国家大容量注射剂工程技术研究中心|设备组装加入胶塞取出卡住的胶塞取走倒下的玻瓶手工装载到冻干机放置热电偶环境监测-放置和取走培养皿操作人员进出及更衣24

|干预举例—冷冻干燥工艺不同区域玻瓶破碎设备故障更换灌装针头灌装针头位置调整自动称量故障自动加塞故障国家大容量注射剂工程技术研究中心25

|

5、培养基灌装试验的频率新建的或生产工艺、设备、人员等重大变更后的无菌工艺生产线，必须经至少连续三批合格的培养基灌装试验常规生产条件下的再验证频率，培养基模拟试验通常按生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。生产线生产不同规格的无菌产品，则应考虑不同规格的产品的因素，培养基灌装试验的最差状况进行评估。

|员，保证每年至少参加一次成功的培养基灌装试验。国家大容量注射剂工程技术研究中心26

|

变更后培养基模拟灌装试验变更及其评估

对产品或生产线的每一种变更，均应根据书面的变更控

制系统进行评估

。

如果通过评估认为此项变更会影响到无菌生产工艺产品

的无菌保证水平，则需要进行增补性培养基模拟灌装实

验。

比如，设施或设备的变化、生产线配置的变动、人员重

|

环境监控异常和无菌检查结果阳性等。国家大容量注射剂工程技术研究中心|培养温度27

|

6、实验用培养基和培养温度的选择培养基选择

适应广谱微生物生长，包括细菌和真菌

较好的澄明度，较小的粘度

液体培养基易于除菌过滤

常用培养基：3％大豆胰蛋白肉汤（TSB）

厌氧培养基仅在特殊情况下使用（FTM）

干粉工艺：具备与干粉产品流动性能相似的无菌TSB干粉或

无菌安慰剂粉末（PEG,乳糖,甘露醇…)20-35℃，目标值±2.5℃，不少于14天；如选择两个温度，

则每一温度下至少培养7天，从低温开始。国家大容量注射剂工程技术研究中心28

|

惰性替代粉末的选择惰性替代品选择要求：

–

无活性、易灭菌

–

易溶解

–

对培养基促进生长作用无副作用

–

易灌装，流动性要好（培养基流动性较差）常用替代品

–

聚乙二醇Polyethylene

glycol

系列(PEG

6000,PEG

8000）,

甘露醇Mannitol，乳糖Lactose等

|

–

事先需要伽马辐照灭菌（钴60，用量约15～25kGy）

–

应进行无菌性、抑菌性和溶解度的测试国家大容量注射剂工程技术研究中心29

|

培养基的适应性检查培养基适应性检查

应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。本检

查培养基灌装试验前或同时进行。

必须用药典要求的标准微生物或工厂特定微生物（分离

自环境人员监测及无菌试验）来进行

通常为枯草芽孢杆菌、白色念珠菌，菌液浓度控制约在

100个菌/ml

加入的菌液应小于100

CF

FU/单位

|

生长良好，判该培养基的适应性检查符合规定国家大容量注射剂工程技术研究中心30

|

7、灌装体积与数量单位灌装体积

选择的体积要使培养基能适当地接触容器内表面，并且适当翻

转或旋转，接触到密封件的内表面。

每只容器的灌装体积一般不少于总容积的1/3，但也要考虑保

留25

%

至40

%的顶空能确保肯能存在的微生物获得足够的氧

气生长。

对于厌氧灌装:

用惰性气体代替氧气，

并使之完全充满容器灌封试验数量

综合考虑统计学要求和实际生产批量。

|

5000瓶，则培养基灌封至少应为实际生产线的最大批次量。

PIC

(>3000瓶)：如果正常生产的批次量低于3000瓶，则培养

基灌封至少应为实际生产线的最大批次量。国家大容量注射剂工程技术研究中心|31

|

8、培养基模拟灌装实验的阳性对照培养基阳性对照实验：

随机选取已经完成14天培养的灌装培养基样品，按照药典要求

–

常用枯草芽孢杆菌、白色念珠球菌或工厂特定菌作为阳性菌

–

将每个菌种准备含<100cfu

u/0.1ml的菌液，每个菌种接种2支

培养基样品，同时并平板计数（双份）

–

对真菌在20-25°C下培养，对细菌在30-35

°C下培养，每天

检查，5天内需有生长迹象国家大容量注射剂工程技术研究中心I.32

|MP

9、培养基灌封实验的合格标准FDA、EU

GMP

和中国新版GM

无菌附录：灌封量<5000瓶时，若有1瓶污染，需彻底调查，并重新验

证(3批)。II.

灌封量为5000-10000瓶时，若有1瓶污染，视调查结果决定

是否需要重新进行1批培养基灌封试验；若有两瓶污染，必

须重新验证（3批），同时进行彻底调查。III.

灌封量>10000瓶时，若有1瓶污染，需彻底调查；若有两瓶

|国家大容量注射剂工程技术研究中心污染瓶数01234595%置信限值333

|

培养基灌封实验的合格标准PIC及SFDA研发注册标准：在95

5%置信限时污染率低于0.1%。

计算公式：污染率

=

(95%置信限值)/(灌封容器数)

×

100%

污染瓶数与95%置信限值间的关系678910

|4.74

6.3

7.75

9.15

10.

.51

11.84

13.15

14.43

15.7116.9

6国家大容量注射剂工程技术研究中心菌空气破真空（不使用惰性气体），全压塞、轧盖1.2.3.4.

1.

2.

3.34

|

10

0、举例-冻干工艺方式A：模拟灌装、装载/卸载过程，缩短放置时间容器内灌封好培养基，以半压塞状态装入冻干机冻干机内部分抽真空，在室温放置一定的时间，不进行冷冻。用无菌空气破真空（不使用惰性气体），全压塞、轧盖缺点:真空度不能过高，不能照成培养基沸腾。方式B：以经稀释的培养基模拟冻干过程容器内灌封好经稀释的培养基，以半压塞状态装入冻干机模拟冻干过程，直到容器内的培养基大致达到正常浓度。用无

|缺点：耗时长，需开发特殊的冻干程序，营养支持性不均一，影响微生物的存活力。

国家大容量注射剂工程技术研究中心1.2.35

|

冻干工艺方式C：模拟灌装、装载/卸载过程，缩短放置时间，不抽真空或补充空气容器内灌封好培养基，以半压塞状态装入冻干机冻干机不抽真空或者边抽真空边补充无菌空气。在室温放

置一定的时间，不进行冷冻。注意：用培养基完全模拟冻干工艺非常困难(

如时间长、真空、低温等)

应该首先识别有污染风险的活动，并加以模拟(

如未完全密封小瓶

|

小瓶必须不被冷冻

注意确保培养基的需氧状态国家大容量注射剂工程技术研究中心|注意事项36

|

举例-无菌粉末分装工艺方法A

在灌装线上手工或增加灌装设备，先灌装液体培养基，再分装无

菌替代品粉末后压塞、轧盖。方法B

在灌装线上手工或增加灌装设备，先分装无菌替代品粉末，再灌

装液体培养基后压塞、轧盖。方法C

先灌装干粉培养基，再手工或增加设备加入注射用水所用惰性剂或干粉培养基需事先经过辐射灭菌。常用替代品粉末有聚乙二醇、甘露醇、乳糖等。应对添加替代品的量和对培养基适应性的影响进行研究和评估。国家大容量注射剂工程技术研究中心|37

|

举例-无菌原料药原料药生产工艺中常有结晶步骤，因结晶过程有相变产生，也使模拟过程存在困难。可用一种液体介质模拟结晶过程，让其流经除菌过滤器和所有管路加到结晶罐中。若结晶过程有加晶种的操作，模拟过程中也应有这样的操作，晶种也可用模拟介质代替。为使晶体粒度均匀，有些结晶过程需要降温，在模拟过程中一般不应降温，因在低温下抑制微生物生长。离心、洗涤和干燥环节一般采用常温，以免温度对微生物的影响。国家大容量注射剂工程技术研究中心38

|

11、环境及人员监测环境和人员监测－按照相应的规程和方案进行，应涵盖无菌工艺各工序，频次数与正常生产一致。包括：

空气粒子数

沉降菌

浮游菌

表面微生物

人员监测

|国家大容量注射剂工程技术研究中心39

|

12、其他建议要点模拟灌装全过程建议应进行录像，便于事后调查分析和原因查找，也有利于员工培训。如有可能，应有专人观察和记录操作人员的有意或无意的干预行为及时间。在试验设计时，有时还要考虑人员状态，如夜班人员的注意力往往不够集中。培养基灌封后可以进行生产，但要等培养基灌封合格后产品才能放行

|样品或按照托盘应进行编号，以便

于调查和追溯国家大容量注射剂工程技术研究中心40

|培养基模拟灌装试验

结果分析与调查

|国家大容量注射剂工程技术研究中心41

|

培养后检查目检培养基是否浑浊，是否有微生物生长要由经过培训、并且有资质能够发觉微生物生长迹象的人员进行检查如果在两个温度下培养时，必须在温度切换时进行中间判读可疑单位立即交给质量控制的微生物

人员，进行进

|一步分离培养和鉴定。根据染菌单位数，判断是否达到验

证接受标准国家大容量注射剂工程技术研究中心污染

率|42

|灌装污染曲线图

1

污染可能来源于液体培养基

(

如与培养基贮罐非无菌连接，

在循环管路中受到污染，微生

物持续繁殖)。在灌装结束时，

应注意保持培养基贮罐处于无菌密闭状态，在储罐内取样测

试，可以核实这样的假设。灌装过程(时间或灌装数量)国家大容量注射剂工程技术研究中心污染率|43

|灌装污染曲线图

2

表明污染仅发生在试验初

期，可能污染来自起始的

生产设备中（

胶塞容器/

轨道,

计量泵

/

针头)，在灌装过程中污染被部分或

全部“清洗掉”。灌装过程(时间或灌装数量)国家大容量注射剂工程技术研究中心染率

污

|灌装过程(时间或灌装数量)44

|灌装污染曲线图

3

出现一个尖峰（在短时段的一

些产品被污染）可能与在灌装

过程中不正确操作或干预导致

的污染有关。

很关键的是必须知道被污染产

品灌装的准确时间，以及当时

实施的干预措施（灌装操作过

程的录像是非常有用的），这

样会比较容易调查到原因。国家大容量注射剂工程技术研究中心率

污染灌装过程(时间或灌装数量)45

|

灌装污染曲线图

4

同样可能是某个如果错误

的干预措施所造成的，不

同的是该污染影响到液体

的管路/回路时（如培养

基贮罐的变化，泵或针的|

替换），导致微生物持续

繁殖。国家大容量注射剂工程技术研究中心污染率

|灌装过程(时间或灌装数量)46

|灌装污染曲线图

5

非常不幸的是，这种现象

是最常出现的，也是最难

调查的。如果这种现象在

多次试验中反复出现，可

能说明这个工艺存在不确

定因素，需要采取根本的

措施（如

更衣/着装、消

毒剂和气流模式的改变)国家大容量注射剂工程技术研究中心47

|

失败调查流程|国家大容量注射剂工程技术研究中心

–

人员样

–

表面样

–

环境空气样2.

对培养基污染的评估

–

培养条件

–

对污染培养基的菌种必须进行

鉴定

–

确定培养基污|染可能发生的时

间3

3.

惰性粉末无菌测试的评估48

|

培养基灌装失败调查

11.

生产环境的监控数据评估

4.

对气体取样结果的评估

–

压缩空气

–

氮气等5.

对水的微生物的评估

–

纯水

–

WFI6

6.

对培养基评估

–

培养基的配制和消毒记录

–

培养基预培养的条件

–

培养基预培养的结果中国家大容量注射剂工程技术研究

48

心1.

粒子监控评估–––––粒子测试监控情况层流风速报警记录烟雾测试历史的监控情况和趋势2.

清洁和消毒评估

–

设备的清洁

|消毒3.

消毒剂的配制检查

–

来源或配制比例记录

–

效期及效力

49

|培养基灌装失败调查

24

4.

人员的评估–––––灌装间最多的人数操作人员连续工作时间其它人员更衣情况手消毒及污染可能中

5

5.

干预操作的评估

–

频次，是否有非预期干预

–

危险的程度

–

污染的样品与干预的关联国家大容量注射剂工程技术研究

49

心50

|

培养基灌装失败调查

3设备的评估

–

灭菌柜

•

灭菌装载情况，灭菌程序和记录等

•

最近的穿透试验，泄漏试验和干燥试验的结果

–

隧道烘箱，洗瓶机等

•

运行状态，参数是否正确

•

隧道烘箱各段层流压差是否正确

–

灌装设备的

|状态

•

设备是否存在偏差和非计划干预

–

过滤器完整性测试评估

•

产品和空气过滤器完整性测试的结果中国家大容量注射剂工程技术研究

50

心51

|

培养基灌装失败后续措施调查结论与风险评估

培养基灌装实验结果有效

暂停生产，直至确定污染来源并采取有效的纠偏措施。

对培养基灌封实验后和此前所生产的产品，进行风险评估

培养基灌装实验结果无效，重新进行培养基模拟灌装

实验

无菌灌装区的物理条件不满足要求

|后续措施

根据调查情况，采取纠偏措施后，进行一批或多批的培养

基模拟灌装试验。国家大容量注射剂工程技术研究中心52

|要点提示：

任何失败的样品都应单独进行分离培养和鉴定，因为可能不只有一个污染源。

人员与环境等监控的微生物也应进行分离鉴定，并与污染菌相比较。

避免试验室引入新的污染，导致误判

|国家大容量注射剂工程技术研究中心53

|培养基模拟灌装试验

常见问题及缺陷

|国家大容量注射剂工程技术研究中心|54

|

常见问题如何判断哪些灌装样品不需要进行培养？

破损，影响到密封性的样品

完整性测试（泄漏测试）失败的样品

文件中明确规定予以丢弃的中控测试样品

设备自动剔除的样品

文件中明确规定，每次干扰后应予手工剔除的样品

（规定应详细、明确，并需证明其可操作性和稳定可

信性）。

剔除的样品应进行记录注明丢弃原因国家大容量注射剂工程技术研究中心55

|

常见问题是否需要厌氧工艺的模拟灌装实验？

如果工艺中存在冲氮气等惰性气体操作时

如果在环境监测样品或无菌试验中检出厌氧菌

有公司认为，即使常规无菌工艺，也应定期使用硫乙醇酸

盐培养基进行厌氧工艺模拟实验，或在模拟过程中进行培

养基的切换。培养基灌装试验中的样品是否需要在培养过程中进行

|

不需要。培养基灌装的样品应在开始培养前进行操作，使

培养基充分接触到内部各个表面，开始培养后不应再进行

反转等干扰。国家大容量注射剂工程技术研究中心56

|

常见问题如何对培养基灌装试验中的干预进行设计？

考虑到最差状况

涵盖整个生产周期，包括换班、连续生产等

所有干预应经预先批准和文件化，干预描述、发生时间、频

率、持续时间、受影响的瓶数等

常规干预每次培养基灌装都要模拟，非常规干预可每年一次。培养基灌装试验是否要模拟所有生产过程？是否可以分段进行模拟试验？

|

菌过滤以后。

可以，比如冻干工艺，可以把无菌灌装和冻干模拟分开；粉

针工艺中可把加注培养基与粉剂分装分开。但都需要有明确

方案和判断标准。国家大容量注射剂工程技术研究中心|57

|

常见问题什么情况下，可以认为培养基灌装试验无效？

阳性对照失败

工艺过程中在无菌操作区发生重大偏差，如停电，高效过

滤器损坏等在培养基灌装试验中，是否必须进行录像？录像的保存期需要多长？

不是必需的，录像仅是一种可选的辅助调查和培训手段。

如果采用了录像措施，也仅作为公司内部的资料（如同内

部审计报告），不必向检查员出示。

公司应有文件规定，什么情况下要进行录像，录像的储存

时间等国家大容量注射剂工程技术研究中心58

|

Warning

LetterYour

firm

failed

to

design

and

perform

an

adequateaseptic

process

simulation

(i.e.,

media

fill)

basedupon

the

same

controls

used

for

routineproduction.

We

note

that

t

the

(b)(4)

wasobserved

(b)(4)

during

ac

ctual

production.

However,this

intervention

was

per

rformed

only

once

duringthe

media

fill

in

2009.

–

公司的培养

|

基灌装验证未根据日常生产的控制进行设计

和完成，如在实际生产中观察到的一些干预操作国家大容量注射剂工程技术研究中心th59

|

Warning

LetterThe

written

procedur

res

related

to

theproduction

simulations

–

“media

fills”

-conducted

to

validate

e

your

capability

toaseptically

produce

s

small

volume

parenteral(SVP)

were

found

to

be

inadequate.

The

mediafills

for

this

line

did

not

represent

actualoperations

used

in

he

aseptic

production

ofampoules

and

vials.培养基灌

|装没有模拟实际的生产过程。国家大容量注射剂工程技术研究中心60

|

Warning

Letter-

A

routine

production

of

a

(b)(4)

Injection

vials

lot

would

take

approximately

(b)(4)

hours

to

be

filled.

Your

written

pro

ocedures

for

routine

production

require

tha

at

an

intervention

take

place

every

(b)(4)

minu

utes

for

fill-weight

verification

measurements.

SOP规定每几分钟就要对装量进行测试，但是模拟

|国家大容量注射剂工程技术研究中心61

|

Warning

Letter–

The

process

simulatio

ons

(media

fill)

do

not

represent

actual

production

operations

for

your

sterile

API.

The

proces

ss

simulation

performed

by

your

firm

in

July

20

009

failed

to

include

simulation

of

the

routine

interventions

performed

in

a

typical

l

campaign

of

13

batches.

培养基灌装验证没有反应实际无菌API的生产过程。

|

常干预的模拟。国家大容量注射剂工程技术研究中心|溶液。62

|

Warning

Letter–

Placebo

mediums

should

be

evaluated

for

their

ability

to

support

growth.

Their

placebo

used

in

the

process

simulation

is

sod

dium

phosphate

in

different

forms

(solution

and

anhy

ydrous)

and

sodium

chloride

solution.

培养基灌装所用的介质，没有评估其对微生物的抑菌

影响。培养基灌装所用的材料是磷酸钠和次氯酸钠的国家大容量注射剂工程技术研究中心63

|

Warning

Letter–

Placebo

mediums

should

b

be

evaluated

for

their

inhibitory

effect

on

microor

rganisms.

Your

response

does

not

indicate

that

your

firm

uses

beta-lactamase

to

inhibit

the

effect

of

antib

biotic

residue

in

the

production

line

during

proc

cess

simulation.

没有考虑可能存在的头孢残留对培养基中微生物的影响

|国家大容量注射剂工程技术研究中心|影响。64

|

Warning

Letter–

Gases

used

during

proc

cess

simulation

should

be

evaluated

for

their

inhib

bitory

effect

on

microorganisms.

Your

response

states

that

the

nitrogen

used

in

the

pro

ocess

simulation

is

removed

by

the

test

membrane

d

during

filtration.

没有评估模拟过程中使用的气体（氮气）对微生物国家大容量注射剂工程技术研究中心65

|

Any

Ques

stions？

谢谢！

|Email

Address：gejunyou@126.com国家大容量注射剂工程技术研究中心安全阀基本知识如果压力容器(设备/管线等)压力超过设计压力…1.尽可能避免超压现象堵塞(BLOCKED)火灾(FIRE)热泄放(THERMALRELIEF)如何避免事故的发生?2.使用安全泄压设施爆破片安全阀如何避免事故的发生?01安全阀的作用就是过压保护!一切有过压可能的设施都需要安全阀的保护!这里的压力可以在200KG以上,也可以在1KG以下!设定压力(setpressure)安全阀起跳压力背压(backpressure)安全阀出口压力超压(overpressure)表示安全阀开启后至全开期间入口积聚的压力.几个压力概念弹簧式先导式重力板式先导+重力板典型应用电站锅炉典型应用长输管线典型应用罐区安全阀的主要类型02不同类型安全阀的优缺点结构简单,可靠性高适用范围广价格经济对介质不过分挑剔弹簧式安全阀的优点预漏--由于阀座密封力随介质压力的升高而降低,所以会有预漏现象--在未达到安全阀设定点前,就有少量介质泄出.100%SEATINGFORCE75502505075100%SETPRESSURE弹簧式安全阀的缺点过大的入口压力降会造成阀门的频跳,缩短阀门使用寿命.ChatterDiscGuideDiscHolderNozzle弹簧式安全阀的缺点弹簧式安全阀的缺点=10090807060500102030405010%OVERPRESSURE%BUILT-UPBACKPRESSURE%RATEDCAPACITY普通产品平衡背压能力差.在普通产品基础上加装波纹管,使其平衡背压的能力有所增强.能够使阀芯内件与高温/腐蚀性介质相隔离.平衡波纹管弹簧式安全阀的优点优异的阀座密封性能,阀座密封力随介质操作压力的升高而升高,可使系统在较高运行压力下高效能地工作.ResilientSeatP1P1P2先导式安全阀的优点平衡背压能力优秀有突开型/调节型两种动作特性可远传取压先导式安全阀的优点对介质比较挑剃,不适用于较脏/较粘稠的介质,此类介质会堵塞引压管及导阀内腔.成本较高.先导式安全阀的缺点重力板式产品的优点目前低压储罐呼吸阀/紧急泄放阀的主力产品.结构简单.价格经济.重力板式产品的缺点不可现场调节设定值.阀座密封性差,并有较严重的预漏.受背压影响大.需要很高的超压以达到全开.不适用于深冷/粘稠工况.几个常用规范ASMEsectionI-动力锅炉(FiredVessel)ASMEsectionVIII-非受火容器(UnfiredVessel)API2000-低压安全阀设计(LowpressurePRV)API520-火灾工况计算与选型(FireSizing)API526-阀门尺寸(ValveDimension)API527-阀座密封(SeatTightness)介质状态(气/液/气液双相).气态介质的分子量&Cp/Cv值.液态介质的比重/黏度.安全阀泄放量要求.设定压力.背压.泄放温度安全阀不以连接尺寸作为选型报价依据!如何提供高质量的询价?弹簧安全阀的结构弹簧安全阀起跳曲线弹簧安全阀结构弹簧安全阀结构导压管活塞密封活塞导向不平衡移动副(活塞)导管导阀弹性阀座P1P1P2先导式安全阀结构先导式安全阀的工作原理频跳安全阀的频跳是一种阀门高频反复开启关闭的现象。安全阀频跳时，一般来说密封面只打开其全启高度的几分只一或十几分之一，然后迅速回座并再次起跳。频跳时，阀瓣和喷嘴的密封面不断高频撞击会造成密封面的严重损伤。如果频跳现象进一步加剧还有可能造成阀体内部其他部分甚至系统的损伤。安全阀工作不正常的因素频跳后果1、导向平面由于反复高频磨擦造成表面划伤或局部材料疲劳实效。2、密封面由于高频碰撞造成损伤。3、由于高频振颤造成弹簧实效。4、由频跳所带来的阀门及管道振颤可能会破坏焊接材料和系统上其他设备。5、由于安全阀在频跳时无法达到需要的排放量，系统压力有可能继续升压并超过最大允许工作压力。安全阀工作不正常的因素A、系统压力在通过阀门与系统之间的连接管时压力下降超过3%。当阀门处于关闭状态时，阀门入口处的压力是相对稳定的。阀门入口压力与系统压力相同。当系统压力达到安全阀的起跳压力时，阀门迅速打开并开始泄压。但是由于阀门与系统之间的连接管设计不当，造成连接管内局部压力下降过快超过3%，是阀门入口处压力迅速下降到回座压力而导致阀门关闭。因此安全阀开启后没有达到完全排放，系统压力仍然很高，所以阀门会再次起跳并重复上述过程，既发生频跳。导致频跳的原因导致接管压降高于3%的原因1、阀门与系统间的连接管内径小于阀门入口管内径。2、存在严重的涡流现象。3、连接管过长而且没有作相应的补偿（使用内径较大的管道）。4、连接管过于复杂（拐弯过多甚至在该管上开口用作它途。在一般情况下安全阀入口处不允许安装其他阀门。）导致频跳的原因B、阀门的调节环位置设置不当。安全阀拥有喷嘴环和导向环。这两个环的位置直接影响安全阀的起跳和回座过程。如果喷嘴环的位置过低或导向环的位置过高，则阀门起跳后介质的作用力无法在阀瓣座和调节环所构成的空间内产生足够的托举力使阀门保持排放状态，从而导致阀门迅速回座。但是系统压力仍然保持较高水平，因此回座后阀门会很快再次起跳。导致频跳的原因C、安全阀的额定排量远远大于所需排量。

由于所选的安全阀的喉径面积远远大于所需，安全阀排放时过大的排量导致压力容器内局部压力下降过快，而系统本身的超压状态没有得到缓解，使安全阀不得不再次起跳频跳的原因阀门拒跳：当系统压力达到安全阀的起跳压力时，阀门不起跳的现象。安全阀工作不正常的因素1、阀门整定压力过高。2、阀门内落入大量杂质从而使阀办座和导套间卡死或摩擦力过大。3、弹簧之间夹入杂物使弹簧无法被正常压缩。4、阀门安装不当，使阀门垂直度超过极限范围（正负两度）从而使阀杆组件在起跳过程中受阻。5、排气管道没有被可靠支撑或由于管道受热膨胀移位从而对阀体产生扭转力，导致阀体内机构发生偏心而卡死。安全阀拒跳的原因阀门不回座或回座比过大：安全阀正常起跳后长时间无法回座，阀门保持排放状态的现象。安全阀工作不正常的因素1、阀门上下调整环的位置设置不当。2、排气管道设计不当造成排气不畅，由于排气管道过小、拐弯过多或被堵塞，使排放的蒸汽无法迅速排出而在排气管和阀体内积累，这时背压会作用在阀门内部机构上并产生抑制阀门关闭的趋势。3、阀门内落入大量杂质从而使阀瓣座和导套之间卡死后摩擦力过大。安全阀不回座或回座比过大的因素：4、弹簧之间夹入杂物从而使弹簧被正常压缩后无法恢复。5、由于对阀门排放时的排放反力计算不足，从而在排放时阀体受力扭曲损坏内部零件导致卡死。6、阀杆螺母（位于阀杆顶端）的定位销脱落。在阀门排放时由于振动使该螺母下滑使阀杆组件回落受阻。安全阀不回座或回座比过大的因素：7、由于弹簧压紧螺栓的锁紧螺母松脱，在阀门排放时由于振动时弹簧压紧螺栓松动上滑导致阀门的设定起跳值不断减小。

8、阀门安装不当，使阀门垂直度超过极限范围（正负两度）从而使阀杆组件在回落过程中受阻。

9、阀门的密封面中有杂质，造成阀门无法正常关闭。

10、锁紧螺母没有锁紧，由于管道震动下环向上运动，上平面高于密封面，阀门回座时无法密封安全阀不回座或回座比过大的因素：谢谢观看癌基因与抑癌基因oncogene&tumorsuppressorgene24135基因突变概述.癌基因和抗癌基因的概念.癌基因的分类.癌基因产物的作用.癌基因激活的机理主要内容疾病：

——是人体某一层面或各层面形态和功能（包括其物质基础——代谢）的异常，归根结底是某些特定蛋白质结构或功能的变异，而这些蛋白质又是细胞核中相应基因借助细胞受体和细胞中信号转导分子接收信号后作出应答（表达）的产物。TranscriptionTranslationReplicationDNARNAProtein中心法规Whatisgene?基因：

—是遗传信息的载体

—是一段特定的DNA序列（片段）

—是编码RNA或蛋白质的一段DNA片段

—是由编码序列和调控序列组成的一段DNA片段基因主宰生物体的命运：微效基因的变异——生物体对生存环境的敏感度变化关键关键基因的变异——生物体疾病——死亡所以才有：“人类所有疾病均可视为基因病”之说注：如果外伤如烧伤、骨折等也算疾病的话，外伤应该无法归入基因病的行列。Genopathy问：两个不相干的人，如果他们患得同一疾病，致病基因是否相同？再问：同卵双生的孪生兄弟，他们患病的机会是否一样，命运是否相同？┯┯┯┯

ＡＴＧＣ

ＴＡＣＧ

┷┷┷┷┯┯┯┯┯

ＡＴＡＧＣ

ＴＡＴＣＧ

┷┷┷┷┷┯┯┯┯

ＡＴＧＣ

ＴＡＣＧ

┷┷┷┷┯┯┯

ＡＧＣ

ＴＣＧ

┷┷┷┯┯┯┯

ＡＣＧＣ

ＴＧＣＧ

┷┷┷┷┯┯┯┯

ＡＴＧＣ

ＴＡＣＧ

┷┷┷┷增添缺失替换DNA分子(复制)中发生碱基对的______、______

和

，而引起的

的改变。替换增添缺失基因结构基因变异的概念：英语句子中的一个字母的改变，可能导致句子的意思发生怎样的变化？可能导致句子的意思不变、变化不大或完全改变THECATSATONTHEMATTHECATSITONTHEMATTHEHATSATONTHEMATTHECATONTHEMAT同理：替换、增添、缺失碱基对，可能会使性状不变、变化不大或完全改变。基因的结构改变,一定会引起性状的改变??原句：1.基因多态性与致病突变基因变异与疾病的关系2.单基因病、多基因病3.疾病易感基因

基因多态性polymorphism是指DNA序列在群体中的变异性（差异性）在人群中的发生概率>1%（SNP&CNP)<1%的变异概率叫做突变基因多态性特定的基因多态性与疾病相关时，可用致病突变加以描述SNP:散在单个碱基的不同，单个碱基的缺失、插入和置换。

CNP:DNA片段拷贝数变异，包括缺失、插入和重复等。同义突变、错义突变、无义突变、移码突变

致病突变生殖细胞基因突变将突变的遗传信息传给下一代(代代相传),即遗传性疾病。体细胞基因突变局部形成突变细胞群（肿瘤）。受精卵分裂基因突变的原因物理因素化学因素生物因素基因突变的原因（诱发因素）紫外线、辐射等碱基类似物5BU/叠氮胸苷等病毒和某些细菌等自发突变DNA复制过程中碱基配对出现误差。UV使相邻的胸腺嘧啶产生胸腺嘧啶二聚体,DNA复制时二聚体对应链空缺，碱基随机添补发生突变。胸腺嘧啶二聚体胸腺嘧啶胸腺嘧啶紫外线诱变物理诱变(physicalinduction)

5溴尿嘧啶(5BU)与T类似，多为酮式构型。间期细胞用酮式5BU处理，5BU能插入DNA取代T与A配对；插入DNA后异构成烯醇式5BU与G配对。两次DNA复制后,使A/T转换成G/C，发生碱基转换,产生基因突变。化学诱变(chemicalinduction)碱基类似物(baseanalogues)诱变AT5-BUA5-BUAAT5-BU5-BU(烯醇式)

(酮式)GGC1.生物变异的根本来源，为生物进化提供了最初的原始材料,能使生物的性状出现差别，以适应不同的外界环境，是生物进化的重要因素之一。2.致病突变是导致人类遗传病的病变基础。基因突变的意义概述：肿瘤细胞恶性增殖特性（一）肿瘤细胞失去了生长调节的反馈抑制正常细胞受损,一旦恢复原状，细胞就会停止增殖，但是肿瘤细胞不受这一反馈机制抑制。（二）肿瘤细胞失去了细胞分裂的接触抑制。正常细胞体外培养，相邻细胞相接触，长在一起，细胞就会停止增殖，而肿瘤细胞生长满培养皿后，细胞可以重叠起生长。（三）肿瘤细胞表现出比正常细胞更低的营养要求。（四）肿瘤细胞生长有一种自分泌作用，自己分泌生长需要的生长因子和调控信号,促进自身的恶性增殖。Whatisoncogene?癌基因——是基因组内正常存在的基因，其编码产物通常作为正调控信号，促进细胞的增殖和生长。癌基因的突变或表达异常是细胞恶性转化（癌变）的重要原因。——凡是能编码生长因子、生长因子受体、细胞内信号转导分子以及与生长有关的转录调节因子等的基因。如何发现癌基因的呢?11910年，洛克菲勒研究院一个年轻的研究员Rous发现，鸡肉瘤细胞裂解物在通过除菌滤器以后，注射到正常鸡体内，可以引起肉瘤，首次提出鸡肉瘤可能是由病毒引起的。0.2m孔径细菌过不去但病毒可以通过从病毒癌基因到细胞原癌基因的研究历程：Roussarcomavirus,RSVthefirstcancer-causingretrovirus1958年，Stewart和Eddy分离出一种病毒，注射到小鼠体内可以引起肝脏、肾脏、乳腺、胸腺、肾上腺等多种组织器官的肿瘤，因而把这种病毒称为多瘤病毒。50年代末、60年代初，癌病毒研究成了一个极具想像力的研究领域，主流科学家开始进入癌病毒研究领域polyomavirus这期间，Temin发现RSV有不同亚型，且引起细胞恶变程度不同，推测RNA病毒将其遗传信息传递给了正常细胞的DNA。这与Crick提出的中心法则是相违背的让事实屈从于理论还是坚持基于实验的结果？VSTemin发现逆转录酶，1975年获诺贝尔奖TeminCrickTemin的实验设计：实验设计简单而巧妙：将合成DNA所需的“原料”，即A、T、C、G四种脱氧核苷酸，与破坏了外壳的RSV一起在体外40℃的条件下温育一段时间结果在试管里获得了一种新合成的大分子，它不能被RNA酶破坏，但却可以被DNA酶所分解，证明这种新合成的大分子是DNA用RNA酶预先破坏RSV的RNA，再重复上述的试验，则不能获得这种大分子，说明这个DNA大分子是以RSV的RNA为模板合成的1969年，一个日本学者里子水谷来到Temin的实验室，这是一个非常擅长实验的年轻科学家。按Temin的设想，他们开始寻找RSV中存在“逆转录酶”的证据DNA

RNA

ProteinTranscriptionTranslationReplicationReplicationRe-Transcription修正中心法规据说，1975年Temin因发现逆转录酶而获诺贝尔奖时，Bishop懊恼不已，因为早在1969年他就认为Temin的RNADNA的“前病毒理论”有可能是正确的，并且也进行了一些实验，但不久由于资深同事的规劝而放弃了这方面的努力。但Bishop马上意识到：逆转录酶的发现为逆转录病毒致癌的研究提供了一条新途径。一个RSV，三个诺贝尔奖！！！1989年，UCSF的Bishop和Varmus根据逆转录病毒的复制机制发现了细胞癌基因，并获诺贝尔奖。Cellularoncogene启示：Perutz说:“科学创造如同艺术创造一样，都不可能通过精心组织而产生”Bishop说:“许多人引以为豪的是一天工作16小时，工作安排要以分秒计……可是工作狂是思考的大敌，而思考则是科学发现的关键”Perutzsharedthe1962NobelPrizeforChemistrywithJohnKendrew,fortheirstudiesofthestructuresofhemoglobinandglobularproteins科学的本质和艺术一样，都需要直觉和想像力请给自己一些思考的时间吧！癌基因的分类目前对癌基因尚无统一分类的方法，一般有下面3种分类方法：一、按结构特点分（6）类（一）src癌基因家族（二）ras癌基因家族（三）sis癌基因家族（四）myc癌基因家族（五）myb癌基因家族（六）其它：如fos，erb－A等。三、按细胞增殖调控蛋白特性分成（4）类（一）生长因子（二）受体类（三）细胞内信号转换器（四）细胞核因子二、按产物功能分（8）类（一）生长因子类（二）酪氨酸蛋白激酶（三）膜相关G蛋白（四）受体，无蛋白激酶活性（五）胞质丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（六）胞质调控因子（七）核反式调控因子（八）其它:db1、bcl－2癌基因产物参与信号转导

胞外信号作用于膜表面受体→胞内信使物质的生成便意味着胞外信号跨膜传递的完成。胞内信使至少有：cAMP（环磷酸腺苷）IP3（三磷酸肌醇）PG（前列腺素）cGMP（环磷酸鸟苷）DG（二酰基甘油）Ca2＋（钙离子）CAM（钙调素）主要机制是通过蛋白激酶活化引起底物蛋白一连串磷酸化的生物信号反应过程,跨膜机制涉及到：（一）质膜上cAMP信使系统（二）质膜上肌醇脂质系统这两个系统都是由受体鸟苷酸调节蛋白（GTP-regulatoryprotein，G蛋白）和效应酶（腺苷酸环化酶磷脂酶等）组成，有相似的信号转导过程：即受体活化后引起GTP与不同G蛋白结合活化和抑制效应酶从而影响胞内信使产生而发生不同的调控效应。（三）受体操纵的离子通道系统（四）受体酪氨酸蛋白激酶的转导

（一）获得性基因病

(acquiredgeneticdisease)例如：病毒感染激活原癌基因癌基因活化的机制

（二）染色体易位和重排使无活性的原癌基因转位至强启动子或增强子附近而被活化。与基因脆性位点相关。（三）基因扩增（四）点突变三、癌基因的产物与功能（一）癌基因产物作用的一般特点1.目前发现c-onc均为结构基因.2.癌基因产物可分布在膜质核也可分泌至胞外.（二）癌基因产物分类1.细胞外生长因子：TGF-b2.跨膜生长因子受体:MAPK3.细胞内信号转导分子:Gprotein/Ras4.核内转录因子

（三）癌基因产物的协同作用实验证明，用ras或myc分别转染细胞，可使细胞长期增殖，但不能转化成癌细胞，在裸鼠体内也不能形成肿瘤。但用ras+myc同时转染细胞，则使细胞转化成癌细胞。说明：致癌至少需要2种或以上的onc协同作用，2种onc在2条通路上发挥作用，由于细胞增殖调控是多因子，多阶段影响的结果。而影响增殖分化的onc达几十种之多，所以大多数人认为：癌发生是多阶段多步骤的。Whatistumorsuppressorgene?肿瘤抑制基因（抗癌基因、抑癌基因）——是调节细胞正常生长和增殖的基因。当这些基因不能表达，或其产物失去活性时，细胞就会异常生长和增殖，最终导致细胞癌变。反之，若导入或激活它则可抑制细胞的恶性表型。——癌基因与抑癌基因相互制约，维持细胞增殖正负调节信号的相对稳定。影响1岁的儿童“二次打击”学说两个等位基因同时突变视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma）RB基因变异(13号染色体)

(1)脱磷酸化Rb蛋白（活性）与转录因子E2F结合，抑制基因的转录活性(2)磷酸化Rb蛋白（失活）与E2F解离，释放E2F(3)E2F启动基因转录(4)细胞进入增生阶段(G1S)因此，Rb蛋白在控制细胞生长方面发挥重要作用一旦Rb基因突变可使细胞进入过度增生状态RB基因的功能等位基因(allele)例如：花颜色基因位于一对同源染色体的同一位置上、控制相对性状的两个的基因叫等位基因(allele)一对相同的等位基因称纯合等位基因

一对不同的等位基因称杂合等位基因

显性基因隐性基因完全显性不完全显性共显性问：女性的两条X染色体基因应如何表达？拓展知识：X染色体基因中，有65%完全处于“休眠”状态，20%仅在部分女性身上“休眠”，15%则完全逃离“休眠”状态一旦其中一条X染色体被损坏，还可以由另一条X染色体来纠正男性却只有一条X染色体，一旦它遭到破坏，男性就会患上血友病、色盲以及肌肉萎缩症等各种遗传病以前人们一直认为，在女性的两条X染色体中，有一条染色体是完全不起作用或是处于“休眠”状态的在Y染色体中，目前仍在“工作”的基因只剩下不到100个X染色体中“工作”的基因>1000个有一个这样的故事：20年前一次意外事故，三个工人遭受钴60（Co60)放射性核素的照射结果：一名工人不久死亡一名工人几年后死于白血病最后一名工人20年后患糖尿病就诊你知道医生在为病人检查时发现了什么吗？锁骨骨折肋骨串珠样X光片发现广泛性骨质缺损骨髓检查——浆细胞比例为30%左右（正常为0.6-1.3%）(多发性骨髓瘤）因此，多基因病涉及遗传因素和环境因素物理因素化学因素生物因素自发因素2.多基因病(polygenicdisease)：性状或疾病的遗传方式取决于两个以上微效基因的累加作用，同时还受环境因素的影响，因此这类性状也称为复杂性状或复杂疾病（complexdisease）也叫：“复杂性状疾病”近视(myopia)高血压(hypertension)糖尿病(diabetes)精神分裂症(schizophrenia)哮喘(asthma)肿瘤或癌

(tumororcancer)多基因病的遗传要点数量性状的遗传基础是两对以上基因。这些基因之间没有显,隐性的区别,而是共显性。每个基因对表型的影响很小,称为微效基因。微效基因具有累加效应,即一个基因对表型作用很小,但若干个基因共同作用,可对表型产生明显影响。不仅遗传因素起作用,环境因素具有明显作用。例如：结肠癌（Coloncancer)相关基因：NGX6，SOX7，ITGB1，HSPA9B，MAPK8，PAG，

RANGAP1，SRC和CDC2等。相关信号通路：ras/MEK/ERK，JNK，Rb/E2F，PI3K/AKT及受体相互作用相关通路，免疫反应相关通路以及细胞黏附相关通路等。①早期原发癌生长②肿瘤血管形成③肿瘤细胞脱落并侵入基质④进入脉管系统⑤癌栓形成⑥继发组织器官定位生长⑦转移癌继续扩散例如：糖尿病(diabetes)依赖胰岛素型糖尿病在位于第6号染色体上可能包含至少一个对I型糖尿病敏感的基因在人类基因组中，大约10个位点现在被发现似乎对I型糖尿病敏感其中：1)11号染色体位点IDDM2上的基因

2)葡萄糖激酶基因高血压(hypertension)目前最受关注的是ATP2B1基因编码一种膜蛋白，具有钙泵特性能将高浓度细胞内钙泵出细胞外。精神神经性疾病精神分裂症基因表达改变/诱导增强家族史家暴基因本质：基因组变异惊吓—？—基因突变——精神病多基因病的遗传：易患性(liability)易感性(susceptibility)发病阈值(threshold)易患性(liability)——在多基因病发生中，遗传因素和环境因素共同作用决定一个个体患某种遗传病的可能性。possibility遗传因素(hereditaryfactors)环境因素(environmentalfactor)易感性(susceptibility)——特指由遗传因素决定的患病风险，仅代表个体所含有的遗传因素，易感性完全由基因决定。——在一定的环境条件下，易感性高低可代表易患性高低。riskwithdisease发病阈值(threshold)——当一个个体易患性高到一定限度就可能发病——这种由易患性所导致的多基因病发病最低限度称为发病阈值minimum例如：三核苷酸拷贝数变异CGG(精氨酸)重复：——重复5-54次，正常——重复6-230次，携带者（敏感体质）——重复230-4000次，发病

如：脆性X染色体综合征智力低下患者细胞在缺乏胸腺嘧啶或叶酸的环境中培养时往往出现