基因工程原理

第六章基因工程原理第一节基因工程的概念及其主要内容第二节基因工程中的工具酶第三节基因克隆的质粒载体第四节目的基因的分离第五节基因与载体的重组与导入受体细胞第六节重组体的筛选第七节目的基因的表达第一节基因工程的概念及其主要内容一、基因工程的概念：利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离感兴趣的基因，或是用人工合成的方法获取基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反应形成重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程.基因工程(geneengineering)常和以下名称混用遗传工程(geneticengineering);基因克隆(genecloning);分子克隆(molecularcloning);基因操作(genemanipulation);重组DNA技术(recombinationDNAtechnique)克隆(clone):作名词时指含有某目的DNA片段的重组DNA分子或含有该重组分子的无性繁殖系.作动词时是指基因的分离与重组过程。二烫、皂基剑因对工程程挣的络主浇要庆内档容衬或葡（古步捧骤街）1寺、顿从楼复妖杂嫁的部生挨物巧有竹机例体馒基词因凡组竞中回，怪经什过叨酶昏切音消贪化售或蚊P涌C群R肺扩倾增斜等竿步牛骤镇，榜分训离纠出辆带亩有饶目派的南基肉因监的技D鱼N洞A类片氧段凤。2狠、详在伍体呢外棉，乖将寸带粒有两目庭的亿基扔因蜘的北外汁源安D啄N逼A奋片栗段腔连振接送到墨能座够唇自顿我侍复雪制召的决并派具予有聪选倍择路记齐号踏的弃载鹊体前分属子扰上吗，稳形还成忠重材组中D粒N该A影分诊子堆。3拉、箭将注重识组田D练N矛A励分胳子拆转期移吴到切适哀当届的育受企体争细狂胞振(获亦伞称登寄逗主炼细杠胞木)搁，姐并祸与丧之乐一皆起筒增碧殖扩。4逼、哥从靠大浇量输的淘细弓胞陆繁阵殖朝群疫体材中祸，久筛蒜选曾出睛获告得贤了沾重脚组申D拖N敞A咳分诵子象的菜受稠体萍细辆胞布克护隆哥。5逮、牺从乒这证些询筛恰选修出救来垮的童受回体矛细奔胞屋克身隆淡，倒提僻取离出删已找经耽得映到传扩弟增御的锈目默的捷基钳因歼，崖供不进唐一搭步软分掏析定研缎究脂使除用航。6栗、批将教目油的告基煌因比克牺隆淡到滔表羡达灵载贝体矛上曾，咏导献入误寄凭主结细需胞衣，乒使孕之加在怨新傍的证遗谋传宏背已景召下态实赶现导功堂能欣表喷达蒸，皮产黄生默出钉人申类引所眠需文要暑的剂物滔质球。三萝、坦基坐因峡工辩程饺技棒术辛及认其富应才用转碑基暖因则植胳物转偶基割因邀动奶物寺作横为宏生葱物登发咽生竟器基彻因们本影身子也渡是筝一稠个谢产船业R项o递c撕k起f修e黑l春l布e满r文大宁学犬将萌人触肥牵胖滤基颜因摇出巡寿售0流.卡2匪亿吩美耳元（世1凉9障9屈5荷年派3齐月巡寿）A竭m铁g裁e只n辩公钟司恒将传F铃K快B能P草神老经衣免深疫而因碑子晒配侦体虾转雾让撞达3少.滔2春9担亿恩美极元（笔1荣9仓9甜7籍年首）M误i协l拨l滑e李n型n团i甘u辽m付公执司偿以4醒.平6感5崭亿施美牙元向感B转a律y测e暖r团公壮司圾转师让怨2谋2腰5裤种皆基厅因乐的孟开邪发己权秀（亿1草9指9藏8配年缸9酒月届）蛋寄白烂质葡工知程焦的柜概栏念在划基郊因狠工遮程惑技咳术伙对车编企码圈蛋玻白熔质劝的哨基朱因暖的默了肢解非基屯础伶上静，崖对丧蛋允白充质软的镜氨芹基诸酸粒序屠列抵、淹结站构潮和纱功券能展进叹行景分疫析团，拨进涛而航通忠过背对握蛋话白陈质伶的肥结单构类、芦氨掏基名酸暖序钻列达和汤翻幅译律后薯的验修借饰拔等稻手关段盏改换变甜甚佛至极创粘造替出肺新探的奏和循更罩有观效锅的罗蛋响白佳质磁。蛋躺白使质值工蹦程妨主徐要向内六容主丙要卵目筝标蛋葬白准质梨氨类基迅酸柔序柄列犁的记分悠析蛋蛙白粒质徒晶逢体魂结草构清分架析蛋肾白暂质充功赴能喷预赠测航和宏分所析蛋晓白纷质才组贫分包析酶屑工耗程创的届概失念是获酶在学掌与原工首程疯学证的嘴相繁互乎渗终透翠和感结胁合遥所戏发掌展介起肯来粒以隐酶组为鼠研蔽究洽对犹象肢，角改针造肆并衔应胞用狱酶哈的想特双异住催锦化夏功液能舍。翅目问标茂就流是福通稼过蠢工蝇程吗化处技稼术迈大阴规蛇模则生呆产蜂和巴转每化匠相无应偏原死料委成蝇为经有肤用姜物羡质漂的墙技故术唤。传虏统冰的果酶摩工案程史主涝要市是狗指神天曾然否酶桶制失剂们在饮工抓业滑上隶的偷大鹅规昂模偏生凉产征与蠢应蜂用敞。勒随猫着场科拐学文的恨发吵展味，喝尤琴其吩是危基足因削工蓄程怀技粉术嚼的台日仓趋陪完圾善负，比为佛酶浇工塌程蹲赋药予铜了辱新诸的纤内蒜容波，家特届别蚀是池利伐用愧D康N显A荒操哥作吧技昨术枣，贷修经饰瓣改舍造矮酶曾分扣子捞的绒结用构心或姿活教性钉位源点们、冲酶桥与遵底服物予作戏用碍位而点程，踢重违组漂酶烟的售生挑产之，丑模饺拟俭酶夫的第人技工落设侍计旋与遍合汁成取等柳成袜为冒新根的温内念容状。酶京工伍程豆的牌主胖要倡内绩容酶暗的称分保离割纯梁化酶搅与喜细旷胞垫的晚固纳定座化加技凝术仓及联反使应粱器酶某制粉剂时的炭发潜酵俘生晨产酶担分尖子捷化铃学斗修遣饰标、弹遗壳传腐突抛变疫及编结副构娃改若造酶长抑守制圆剂饼与剪激咳活简剂匹开您发涝与奥研吴究人敲工母设痒计妈与艳合控成昨模涂拟脆酶动及麦酶睬分朝子发伶酵腿工圣程逼概济念发浙酵供工盘程把属至于庸生欠物育技劳术剧的贤下重游昼技公术倘，撕是糖工袍业废化宽大盼规盯模赏培据养业细滔胞封、疯生撇产耍生跑物傲制潜品份的鲜一臣种浓技谈术赠。传奏统精的侨发梅酵债工据程音主除要泉用阀于竟微密生影物戏。丹现洽代蜘生难物瘦技党术政还节包扮括痕动欺物产、职植缴物讲细锅胞岛和宴工哲程察菌为的馋发侮酵愉培叠养辆。发探酵礼工勤程愿技眨术发傅酵投对驶象注：传犬统守微色生丑物猛发抖酵威、幼基齐因似工诊程洒菌缩慧发蜘酵熊、舅动溜物握细婶胞谈培茫养疫、没植畜物乘细拨胞吗培响养发雕酵附类衣型赞：液械体怕发蜂酵杨、勉固痒体则发降酵抖、泊固币定苏化冶培桃养烧、反流朴式滑发的酵发粮酵邪技婆术乡丰设迈备生乒物陷技莲术雅的归应暗用差领后域医苹药筝：生古物焰制胁药技；饶基轮因页治砌疗捏；锦人凭工融器乳官农幸业翻和者畜冻牧壳业转闪基却因拨植协物：贸抗统病欠虫辨害末新郑品想种狗、崖抗肢逆法新贸品歼种酸、宁高货品淋质跟新笛品胶种转多基例因短动搂物：淹生健产朴有始用除蛋觉白清质纹和蝴高侦品攀质默的绝畜森产载品生是物喷反镇应攻器：膜利驱用挠动免植滩物绣细劫胞浇或晚组动织擦作套为动生闪物集反独应青器蜓，袄直框接决生夏产哗有借用作蛋悠白恋质轻污工从与奥食傻品新旗型狡食纽奉品阅；馋营喂养凉食准品愤；遭保陕健握食避品树；茫轻工工营用徐酶环圣境污音染献治嚷理乡丰；晃废洽物抄利黄用卖；怜污赌染苹物走生灵物需降兼解生烫物椒技澡术纷产竞业赔化生米物衬技遍术辫产框业：利块用迅细所胞捉和撑生笼物案分圾子罗进称行打药邀品泥、桐农纹产川品黑生名产北开胞发高和刮环仆境荷治枯理捐的敞产森业委，宪该厚产吹业挽技庸术园由糟医毛药犹生币物酬技称术芽、获农辫业华生接物社技卫术纱和栽环伟境蚂生晃物捐技封术塌共迁同跌组丝式成医蔬药骨生减物舍技殃术重纪点堪攻症克何癌垃症删、拘艾毫滋蒜病铺、赶老跌年苹痴帝呆拨症谅、决帕愁金呀森悉病侵、楼心吴脏罩病芒、疤糖仗尿什病傻等劲危榆害垮人爪类蔽的深顽祥疾农课业鞠生悔物基技恳术着欺眼删于磁提顷高嫁农垃产逢品琴的患产宜量旁和仅质泪量息。环购境竿生恢物坊技悼术重界点寄用肿于基清队除汽危大险陈废伍弃注物生齿物好制旺药眼产景业纱化村特帖点高宵技花术：表高蜻层寄次属人湿才敢，劲高摔新厌技懂术初手描段精，雾多时学闯科膝渗欢透高宝投坝入：招在多国停外耍，恶一牌个安生照物决药吊品植平涂均打要息投牛入逆1煮~差3幅亿尚美样元彼，姨并建随毫着棒开灶发醋难郑度茶的艘增倒大那,刘有羊逐婶步乏增垫高焰的吹趋聋势长生周们期：园国验际抵上依，尘一面个刚新临的临生矛物狡药籍品药需护要默6捞~届8眠年刮时窜间高世风逢险:毒一抛个踢新谨药亩品堪的袖开翠发茎，馅经泉过摸一任系役列监的排程滋序模-铃研郑发迟、沉中介试痛、伪动切物兽实魄验撒、耕I宝~皇I鞭I膛I寄期河临枪床腔实克验芽，际上党市沿和别严饰格券的嫁药乖政犹监壶督庸管河理食。余每都一岁步壮都臣可清能吨失木败竟，嚷而堤前拣功士尽蒸弃高穴回穷报:蒸开险发骨成颠功梳一途个肢新炉的摔生聪物丝式药瓜品赏,义回演报恋很煮高太。差如瓶美蛋国梨A压m信g矩e愤n也公达司恐，忘首起次皮开射发童上窗市脏的氏E权P神O求、宴G储-科S载C厘F月到纸1冷9鲜9赚7深年纹的坡销督售厕额屿分刷别霜接咳近勤和特达吧到然2饿0舍亿上美竖元基驶因艰工惧程楼试央剂超的转高圣回峰报碱委性青成柿纤蚕维牲细物胞冲生帆长园因面子蒸2调3菌1背元摸/剂u啦g红淡细组胞运生胞成溪素踢1乎0爬7援2千元是/算u绿g白揪细须胞煌介案素艘-苏2注4鸡1杂0胖元嗽/捕u籍g巨叶细控胞睁粒爽细弦胞赖集粒落清刺供激分因践子份1栏9希6柿0负元蹈/决u立g胰锣岛料素页1惹0单.皂2付元昏/叮m炒g美居国恐生遣物富技染术袜产摔业裤发生展状情坏况美涉国屋生业物辩制接药抚产说品神种鹿类治及兴数骨量（赖P咏H万R并A牢M垒）疾市病锋种勿类猾产耀品玻数肃量缓疾伍病书种抓类主产尊品砌数联量感徐染碌性投疾碌病蜡3桥9茎心夺脏修病荷2规6神甜经缘瑞系邪统停疾窄病是2画8舌呼续吸判系才统过疾晒病慰2蛮2艾闷滋咏病鹊及浩相诵关讽疾品病送1率9晴自悔主随免弯疫纷系吸统鸦疾资病训1甜9皮茅肤丹病抱1帖9能移婆植珍1寸3消俱化团系枝统自疾琴病蜡1腊1呼遗做传纵疾夸病宣1木1血桑液悦疾挤病银9誉糖糟尿妇病撇及腊并敌发旅症才7不乌育历症岁5间眼淋病查3生专长系发肺育师不欢良蔽症郊3符骨法质熟疏该松壁2妊剂娠支预姐防临2唱肿狭瘤期疾充病辉1隙7加5基用因缘瑞治止疗勺人寨数蹦情将况生奖物评技成术折产弟业铅化边—阴农懂业赠领柜域已霜有敢3谜5获个袖科宾1闯2饼0戏多踢种席植婆物郑获痛得暑转祖基概因洁植出物择，居一捏些药重窜要俯的次农急作卷物贯获偶得表商风品或化山的朴转政基坝因庙品调种备。种扎植覆面偶积鲁迅崇猛邪发迟展帮。采细用丧的来基凡因籍正碧在述从芝抗坚除易草忆剂关、省抗俱菌毙素勒、栽抗糟病均虫瓦害见基堵因界到折抗土逆清境醒、煌高柱品崇质搅方沿向菊发煮展烈。由领单望个础质宁量弓性恼状名基筝因喜向添多渔基努因姿数振量遍性悲状栏转锄变栏。植棵物游反卖应慰器再生灯产回稀悼有骡蛋傅白辅。世闻界举转等基断因送作溜物清大胳田皆释场放逆情爬况(裤1屿9姻8气7贤.爹1扰-有1业9庄9部8奔.梦4御)转基因作物特性批准项数所占比例抗除草剂129729.6%抗虫104623.8%提高产品质量88620.2%抗病毒4369.9%改善农学性状2114.8%抗真菌病2084.7%其他3036.9%总计4387100%转侄基躬因赞作醒物雨种连植知面迹积生土物棕技图术梳与杰传进统付中橡药中母药奸现既代察化—使—渡核租心况是与建瓦立疗与班现欧代寒基投因芦学裕说谈相篇应杆的尝现袋代擦中播药翻理愁论现伴代径中驱药候理兽论它的钞建听立—附—猫确泥立挤中缝药狠与孕基杏因骨表仆达暗的赶关识系中烘药塑药冲靶（岛基塞因尊）份或已作赞用减位我点钥基冲因蚀的建寻锯找中哑药宪化齿学勉组：威中狸药识有肯效稳成剖分唉包雅括诸较摧单使一放的架成势分份和狐多昂种董成愚分中叉药肾临旗床姑药易效的座科远学再评予价布与剃分侦析票方逗法生始物距技搭术龄的刚应比用中肿药饿基迫因拍组—辅—贤利努用悟现把代谁生累物拢技币术串研撕究扑分吼析厉中星药妙对娱人喊体忧（雹细秋胞斤）卡基狗因险表羽达肌（到蛋马白岂质霞）碰的肾影降响践。技犹术副平职台：逼大帽规粒模此基完因集表悄达郑分钟析库（蝇基荣因芒芯贤片室、鄙S迹A岂G继E阵、耗蛋联白拔质性组稿等翅技震术锋）亲以扛及术相炮关隙信贡息究数静据叫库页的倾建寇立中弃药刷化谎学瞒组—垦—亚利惰用蚂现敌代似仪塞器韵分六析共技佛术厚分陪析疤有遇效辫成皮分闲及踢其峰药妄物落代扶谢水、线动称力长学宪。技贩术炉平穿台：熟色排谱独及垄色除谱墙-客质旗谱供，谈色精谱肢-负波迁谱托，升波滥谱牙-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聚合酶活性

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5’3’变性

3’5’

5’3’引物

3’5’复性

5’3’5’3’

3’5’引物3’5’5’3’延伸

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3’5’

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