血细胞分析仪-血细胞分析仪校准、性能评价及比对（临床检验课件）

建立基准一室内质控与室间质控二血液分析仪校准（一）建立仪器检测参数基准值

基准值是评判血液分析仪检测性能的参考水平。当安装新购仪器或仪器调整、维修后，可因基准值的变化影响血液分析仪的精密度和准确度，需要建立或确认参数的基准值。

2．校准品的来源和性能要求校准品是用于校准血液分析仪的物质，应具有稳定且可溯源的特点，以保证检测结果的正确性。通常使用与仪器配套的商品化校准品。对于校准品定值的来源，应由新鲜全血经参考测量系统传递赋值，不应由前批号的校准品或其他厂商的校准品传递，血液分析仪相关检测参数的参考方法见表3-13。

我国食品药品监督管理局于2008年发布、2010年实施的YYT0701-2008号文件，规定“血液分析仪用校准物（品）”的主要指标见表3-14-1，其主要特征见表3-14。

3．不精密度检测

4．校准操作要求如果C/R＞1.0，则当前校准因子必须成比例向下调节；如果C/R＜1.0，则当前校准因子必须成比例向上调节。将校准品定值的可信限与分析仪测得每项参数的可信限结合，可得到校准值的95%可信限。

5．验证特殊检测项目如白细胞分类计数和网织红细胞计数，见表3-13。（二）室内质量控制目的和方法

质控目标就是要监测仪器检测的准确性或精密度（或两者）是否失控

1．用稳定化全血质控品进行质控（1）质控品测定频率（2）结果解释

2．用病人全血标本进行质控（1）配对比较法（2）加权浮动均值法（3）监测参考区间法（4）监测白细胞分类计数法

3．室间质量评估是评价实验室检测准确性的独立方法总体性能评价一白细胞分类计数性能评价二性能评价

性能评价是评价血液分析仪的主体内容，包括厂商确认和用户验证。2010年CLSI规定的用户验证指标如下。

1．空白检测限空白检测限（LoB）又称为本底，是指空白试剂和电子噪音的作用，是导致仪器检测结果假性增高的原因。LoB与准确的定量检测低限是不同的。

2．携带污染是指所检测的前一个标本对下一个标本检测结果的影响。通常用携带污染率（%）表示。用于评价携带污染的高值、低值标本通常取自临床，具体标本浓度分布范围见表3-17。

3．精密度（重复性）精密度评价包括批内、批间精密度和总精密度评价。理论上，批内或批间精密度研究范围应覆盖整个生理和病理范围，不同批次的标本应包括高、中、低值。在同一批内，所有标本应有相似结果。

4．检测下限与定量检测下限

（1）检测下限（LLoD）：是指一定概率下标本可被检出的最低浓度。在血液分析仪上，是指可与本底区分开的最低血细胞浓度值。CLSIEP17文件规定：LLoD＝LoB的均值+LoB标准差（SD）的1个常数倍数（正态资料常数＝1.645）。（2）定量检测下限（LLoQ）：是指标本中能被准确定量的最低浓度值，且定量结果在可接受的精密度和准确度范围内。

5．分析测量区间（AMI）分析测量区间（AMI）也可用分析测量范围（AMR）表示。观察仪器在覆盖浓度范围内检测结果的一致性，以得到仪器的最佳测试范围，该范围越宽越好。AMI是厂商遵照FDA要求测试并载入仪器手册的一项技术指标，用户无需调整，CLIA’88对此也不做要求。

6．可比性是反映仪器检测结果与使用常规程序检测结果达到一致性的能力。所用仪器分为：待测（新系统）血液分析仪（TAA）和比对（原系统）血液分析仪（CAA）。用于评价可比性和准确性的相关参数及参考方法见表3-13。一般情况下，TAA与CAA比对、TAA与参考（最佳）方法比对，其检测结果的差值应控制在表3-18的范围。当白细胞分类计数结果出现表3-19的变化时，则需要以显微镜法与TAA检测结果进行比对。

7．不同检测模式的比较对血液分析仪的两种模式（全血模式和稀释血模式）进行评估。

8．对异常标本和干扰物的评价尽可能多检测能代表所有临床检验的预期范围的标本。可对异常标本或已知干扰物质的标本用仪器进行专门研究（表3-6）。

9．临床可报告区间临床可报告区间（CRI）是为直接获取某种方法的分析测量区间，通过采用稀释、浓缩等方法处理标本后，检测到的可作为结果向临床报告的量值范围。

10．参考区间血液分析仪检验指标参考区间（RI）的制定，不同于化学/免疫学等具有方法依赖性的指标，制造商可提供相应信息，但用户必须对其在受检者人群中的适用性进行评价，包括年龄（特别是新生儿）、性别、种族等因素对血液分析仪检测结果的影响，并考虑个体内及个体间的差异。

（三）白细胞分类计数性能评价

2010年，CLSI发布CLSI-H20A2“白细胞分类计数（百分率）参考方法和仪器评价方法”文件，建议用已知不精密度和偏倚的白细胞