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文档简介
一、仪器构造二、仪器工作原理三、朗伯比尔定律四、含量测定方法一、仪器构造吸收池光源单色器吸收池检测器显示器光源:提供足够强度、稳定的连续光谱01常用钨丝灯和卤钨灯,稳定光源波长为400~780nm。常用氢、氘等放电光源,可用波长为160~375nm。可见光源紫外光源氘灯—紫外卤钨灯--可见单色器02单色器是将复合光分散成单色光的装置,包括入射狭缝、准直镜、色散元件、聚焦透镜、出射狭缝等。吸收池03吸收池又叫比色皿,是用于盛装分析试液并提供一定光程长度的器皿。适用于可见光及紫外光区。适用于可见光区。石英吸收池玻璃吸收池检测器04将通过吸收池的透射光的光通量转变成电信号的装置。常用硒电池,寿命短。分为蓝敏和红敏两种。光电池光电管检测微弱强度光,最常见的光电元件。光电倍增管显示器05把检测到的光信号显示出来的装置。透光率(T)吸光度(A)浓度(C)二、仪器工作原理三、朗伯-比尔定律:式中:A为吸光度;K为吸收系数;C为溶液浓度;L为液层厚度。A=KCL当一束平行的单色光通过均匀非散射体系的低浓度溶液时,在单色光强度、溶液温度等条件不变的情况下,吸光度与液层的厚度和吸光物质浓度的乘积成正比吸收系数01摩尔吸收系数:在一定λ下,c=1mol/L,L=1cm时的吸光度。单位:L/(mol.cm)02百分吸收系数/比吸光系数
:1g/100ml03两者关系:《中国药典》采用百分吸收系数:一定λ下,c=1%(W/V),L=1cm时的吸光度。单位:100ml/g.cm
四、含量测定(1)标准曲线法(2)对照品法(3)吸收系数法(2)标准曲线法(工作曲线法):配制一系列不同浓度的对照品溶液测定各对照品溶液的吸光度以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制A-C曲线,称为标准曲线,并求出回归方程测定样品溶液的吸光度,代入回归方程,求出样品溶液的浓度标准系列:浓度(mg/L)吸光度A(3)对照品法:按药品标准规定,分别配制供试品溶液和对照品溶液,在规定的波长处分别测定吸光度,按下式计算供试品溶液中待测组分的浓度。
式中:AR为对照品溶液的吸光度;AX为供试品溶液的吸光度;CR为对照品溶液的浓度;CX为供试品溶液的浓度。(3)吸收系数法:按药品标准规定的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸光度(A);根据
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