细胞总RNA的提取教学课件

RT-PCR(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)细胞总RNA的提取RT-PCR(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)操作(-)细胞总RNA的提取1、取小鼠肝脏约01g(约绿豆大小),置匀浆器中,加入1mItrizol,充分匀浆2、将匀浆后样品转入Ep管,离心数秒,取250ul上清至一新Ep管中、每管样品中加入50u氯仿(萃取酚),充分振荡混匀,静置10min。4、12000rpm×10mino取上清转入新Epg管,加等体积异丙醇,混匀,室温放置10min。6、12000rpm×10min。、弃上清,加入50u170%乙醇洗涤一次,自然晾干。8、加入50uIDEPO水溶解沉淀。(二)逆转录反应(总体积20u1l)RNA(1-4ug)OligodT1ulDEC处理的dH2070℃反应5分钟,迅速置于冰上5分钟5×buffer4ul10mMdNTP4ul42℃预热5分钟逆转录酶AMRNasin42℃水浴1小时72℃水浴10分钟冰上放置备用在当前时代的迅速发展中，国内的课程改革进入了深层次实施阶段，这一阶段的心理健康教育课程开展已经融入了中小学课程体系中，发挥了相当重要的应用效果。但是，在农村小学地区的心理健康教育课程开发过程中，许多心理健康教育内容无法满足学生的实际成长需求，与农村学生的成长状况相违背。面对这样的状况，有必要在新时期的心理健康教育拓展过程中，建立完善的心理健康课程，充分迎合学生的实际发展要求，并且需要与农村地区小学的德育开展形成统一发展趋势。在实际的实践过程中，农村地区小学需要根据心理健康教育的相关标准，结合农村地区小学的实际状况，全面加强学校的特色教育建设，使得心理健康校本课程得到有效开发和应用，持续提高学生的心理健康认知。一、农村小学地区心理健康校本课程的含义心理健康校本课程开发指的是学校根据自身的发展实际所展开的各种形式的课程开发活动。这一课程开发活动的拓展，需要围绕校园实际开展，国家制定的课程标准作为教育引导，并且需要在教育引导的过程中充分发挥自身的性质，结合不同的资源加以利用。在校本课程的开发上，可以选择由学校独立创设，或者也可以与周围的企业进行合作，形成完善的校本课程。农村小学地区心理健康校本课程的开展，需要与城镇小学心理健康教育课程区别开来，不断地进行课程改进，努力迎合学生心理健康教育的成长需求。现阶段，对于农村小学地区心理健康校本课程的定义，主要是农村地区小学在开展心理健康教育的过程中，需要迎合学生的实际需求，对现有的心理健康课程进行多方面改造和开发，迎合农村学生的学习思想，为他们的成长带来不同的效益。二、农村小学地区心理健康校本课程开发的重要性分析在当前时代的发展中，农村小学地区教学依旧属于较为落后的教学区域，这一区域的教育难以全面落实，许多时候仅仅落实了一部分理论教育，缺乏对学生其他方面的教育，尤其是心理健康方面的引导教育。这样的教育状况，使得学生的成长变得较为盲目，存在多种多样的问题，难以得到有效的纠正。在新时期的教育优化过程中，农村小学地区开始加强对心理健康教育的关注度。但考虑到自身教学资源的局限性，因而无法直接开展完善的心理健康教育。在这样的状况下，有必要开发专属于自身的心理健康校本课程。对于农村小学地区而言，心理健康课程与普通的文化课有较大的区别，尤其体现在授课的形式上，具备较高的特殊性质。心理健康教育的内容往往集中在学生的心理健康上，并且它所采用的教育方式是一种引导和交流教育，与直接的文化课理论教育有较大的区别。心理健康校本课程的开发主要是根据当前的心理学教学原理，合理设计一些趣味的教学活动，迎合农村小学生的心理成长需求，带领小学生对自己生成更加全面的认知。对于自身存在的不足之处，也可以从心理上进行相应的调整，为以后的人格塑造奠定基础。在现阶段的农村小学地区心理健康教育中，许多教师选择了直接的心理知识传授，将整个心理健康教育引导课程变成了完全的理论教学课程。一些教师则选择了过多的活动教学，转而忽略了活动的心理教育特征。之所以会出现这样的状况，主要原因还是由于心理健康教育缺乏相应的教材。因此，农村小学地区有必要加快开发一套完整的校本课程，与当前的小学心理健康教学结合起来，提高心理健康教育的科学有效性。三、农村小学地区心理健康校本课程的开发1.针对学生的心理健康成长展开需求分析农村小学地区在开发心理健康校本课程的时候，需要以满足学生心理需求作为主要的发展原则。为了达到相应的心理健康教育目标，必然需要了解农村地区小学生存在哪些心理健康成长需求。因此，在实际的校本课程开发过程中，首先需要对小学生的心理健康教育需求做出合理的分析，以准确了解学生的成长状况以及心理问题，发现他们心理成长存在的问题，然后提高校本课程开发的全面合理性。在对学生心理健康成长需求展开分析的时候，主要可以从以下两个方面内容出发：第一，查阅相关的农村小学生心理健康成长资料。在当前时代的发展中，我国已经有相当多的心理健康著作，这些作品大多数都对学生的心理健康成长需求做出了完善的分析，通过对它们的学习和借鉴，能够总结出学生心理健康成长的主要需求，了解农村小学生心理成长面临的主要问题。第二，农村小学地区的教学资源虽然较为有限，但是在调查的方法应用上，教师完全可以通过调查问卷来展开。教师可以结合农村小学地区的学生成长状况，为不同小学年级分别发送心理健康教育问题调查问卷，分析学生存在的主要心理问题，了解学生的成长需求。2.对心理健康校本课程开发的规划和组织在针对农村小学地区进行心理健康校本课程开发的时候，有必要对整体的课程内容和课程形式进行规划，分别设计整个课程的各个环节和主要内容。由于所涉及的内容相对较多，因而可以进行适当的整合，如设置明确课程教育目标、不同心理健康问题、教育方法设计等。在课程教育目标的设计上，需要结合农村小学地区学生的实际成长状况，并且要为不同年级的学生分别设计相应的课程实践方向和成长目标。通过课程目标的设定，能够为学生的学习形成明确的顺序。接着学校便可以根据自身的教学状况分别设计不同的教学单元，如心理问题诊断、心理健康意识培育、心理情绪问题控制等。同时，农村小学地区还有必要对课程?热萁?行整合组织。对于农村小学地区心理健康教育而言，课程内容属于非常关键的教学内容，也是整个心理健康教育开展的中心所在。在针对课程内容进行整合组织的时候，可以先借鉴相关的心理健康教育读物，参考这些读物的内容，获得一定的教育经验。对于与自身教育单元所吻合的内容，还需要进行适当的引进。此外，还可以鼓励学校的教师职工自己编写校本教材内容，对这些内容加以适当的筛选，选择其中能够迎合学生心理健康教育的内容，加以合理应用。3.心理健康校本课程的实践与完善在基础的心理健康校本课程教育完成以后，需要展开合理的心理健康校本课程实践。在这一时期，可以以学校的行政力量为基础，努力确保不同年级的心理健康课程都能够落实到位。在心理健康教师的选择上，可以选择一些教学经验较为丰富的教师，由他们根据校本教材展开实践教育，完成相应的教学任务。由于刚刚出炉的校本课程并不是非常完善，本身存在的缺点较多，因此有必要在以后做出合理的?{整和优化。在优化的过程中，需要更多地对自身的心理健康校本课程展开评价。一方面需要评价相应的校本教育是否合理落实，另一方面需要准确评估课程在实施过程中是否合理，如果存在一定的不足之处，需要进行科学的调整。四、农村小学地区对心理健康校本课程的应用办法1.通过多样化的教育方法展开校本课程在农村小学地区心理健康校本课程的开展过程中，需要以活动作为基础的载体，将所有的心理健康教育内容作为活动引导来进行。通过活动开展实现对校本课程的合理应用，不仅可以提高学生参与的积极性，还能够满足学生的心理健康成长需求，无形之中迎合了农村学生活泼好动的性格，所有的心理健康教育也便于得到学生的认可。现阶段，我国的心理健康教育方法较多，但考虑到农村小学地区心理健康校本课程应用的特殊性，教师需要尽可能选择一些贴近农村学生生活实际的方法，如角色扮演法、互动交流法等。这些教育方法的明确开展能够使得整个校本课程应用变得准确有效，相应的课程应用效果也会得到全面的提高。2.关注农村小学地区学生的主体性从当前的农村小学地区发展而言，小学生主体性的发展对于整个心理健康教育有着非常重要的引导功能。通常而言，教育应当是教师和学生所共同构成的活动形式，因而在教学中需要以教师为核心，加强对学生的关注度。农村小学教师在这个时候，需要更多地从学生的角度思考心理健康教育问题，努力发挥学生的主观能动性，综合培育学生的心理健康教育认知，多方面推动学生素质得到科学的提升，在心理健康教育的实践过程中，为了全面提高小学生的心理素质，教师需要加强对学生的科学引导，带领学生积极参与到不同的活动实践中。在心理健康校本课程应用的过程中，可以引导每一位学生参与到教育活动中，教师需要带领学生进行积极的心理健康讨论，将他们内心的看法合理地表述出来，如果学生心理健康成长存在一定的问题，教师也可以在这样的状况下迅速发现，并提供相应的帮助。3.加强农村教师与学生之间的心理健康交流在新时期的农村小学地区心理健康教育校本课程开发应用中，教师需要改变传统的教学主体观念，与学生保持平等的学习思想，并在日常的教育过程中加强与学生的沟通交流，充分了解学生在心理健康教育上存在的问题。农村小学地区的学生往往较为开朗，愿意将自己的心理思想变化充分地表达出来，一旦感受到教师对他们的关注，就会对教师的心理健康教育内容形成较高的重视度。而如果学生对于教师并没有过多的接触，缺乏相应的认同感，心理健康教育就很难切实开展。为此，教师需要更多地与农村学生进行心理健康交流，发现他们心里隐藏的小秘密，并表示尊重、理解学生的心理变化，给予正确的引导，使得师生关系逐渐变得较为融洽，相应的心理健康教育也会得到明显的提高。总而言之，农村小学生的心理健康问题在当前社会的发展中，受到了广泛的重视，农村小学有必要努力开展自身的心理健康校本课程，并通过不同的方法展开合理的应用，推动农村小学生的健康发展。俗话说：细节决定成败。因此在我们的数学课上，教学细节显得尤为重要，关注教学细节是我们构建数学高效课堂的重要因素之一。要想取得课堂教学效果的高质，我认为还是应该在教学细节上下功夫，关注教学细节往往能取得事半功倍的效果，下面我就结合自身的实际，谈谈如何关注教学细节，构建高效的数学课堂。一、关注学生的思维差异，欣赏学生的个性思考苏霍姆林斯基说过：“在人的心灵深处，都有一种根深蒂固的需要，这就是希望自己是一个发现者、研究者、探索者。”对每个初中学生来说，在思考老师的提问时，都有自己的知识储备与生活经验，另外每一位同学也都有不同的思维方式和解决问题的策略，这种个体的差异，有时能给问题的解决提供多种方法和途径，课堂上我们应当给予关注，这样才能最大限度的激发学生的潜能。二、关注学生的兴趣、生活和认知水平，营造和谐课堂的情感氛围“亲其师，信其道”，那我们作为老师怎样才能让你的学生亲近你呢？我认为你要关注他们的兴趣爱好，关心他们的生活，了解他们的认知水平，做他们心灵上的朋友。记得有一次我们班上有位同学得了重感冒，当我课上提问时，他的眼神告诉我，他会回答这个问题，我看着他虚弱的身体，鼓励着说：“来，没关系你就坐在位置上轻声的回答，如果其他同学听不到，我帮你复述。”这位同学平时成绩不算很好，后来他在作文中提到，老师的关心让他很感动，决定以后一定要努力学习。还有一次在我们的习题课上，遇到了这样一道题：“在一个足球上，由许多正五边形和正六边形镶嵌而成，问正五边形和正六边形的个数之比是多少？”这时我想起了我们班上有一位足球小子，平时最爱踢足球，虽然平时遇到数学问题时，他总是很头疼的，但是见到这道题时，我看得出来他很感兴趣，所以我提议让他来试试，结果他回答的非常好，我也大大的鼓励了他，事后我问他：“你现在对学好数学有没有信心了呢？”他说：“我在做这道题的时候，好好拿足球研究了一番，要不然那天我也不一定能回答出来，谢谢老师给我这个机会。”我说：“对啊，不管什么数学问题，我们只要好好去研究，一定会把数学学好的，老师相信你。”学生的情感因素被激发了，学生的兴趣爱好被认可了，学生就没有理由不亲近你了，当然当学生遇到学习困难的时候，我们还要结合他们的认知水平，把问题进行化解，要让大部分同学都吃的好，还有一部分同学跳一跳也能吃的到。让学生在学习过程中尽可能多的尝到甜头，享受学习带来的快乐。这也要求我们的老师，在教学中不应该充当学习的“裁定者”，而应该是学生学习中的平等的“参与者”，要用各种各样的方式方法，营造一种平等和谐的课堂氛围，给学生以心理上的安慰，精神上的鼓舞。老师在课堂上还要特别注意自己的语言、动作、眼神、语气，不能伤害到学生的心灵，不管是有意还是无意，特别是对待学习有困难的学生，要充分肯定他们的点滴进步，对他们犯的错误也要耐心的引导。三、关注课堂的动态生成，激发数学课堂的生命力新课程改革要求我们的课堂，不是一成不变的预设的课堂，而是动态生成的多元化的课堂。因此，要求我们老师能在课堂上，不断的捕捉、判别、筛选在教学过程中涌现出来的各种不同的信息，并能利用这些信息，帮助我们对所学知识、方法、经验的动态生成。例如：我在讲三角形的角平分线时，有这样一道题：问三角形两内角平分线的夹角与另外一个内角的关系是什么？通过学生的探究不难得出结论，但是，这时另外有个同学提出了一个问题：“如果把两个内角平分线改成这两个外角平分线呢？”这时外角平分线夹角和第三个内角之间的关系是什么？这个不是我们课堂上预设的问题，但是这个动态的问题生成的很好，极大的激发了学生的学习兴趣，后来又有个同学改了一下条件：如果是一个内角平分线和另外一个内角的外角平分线的夹角与第三个内角的关系呢？这时学生们把课堂的动态生成发挥到了极致，学生的思维又一次得到了提升，使学生观察问题、分析问题、解决问题的能力进一步加强了，这才是真正的动态生成的数学课堂，把学习的主动权交给了学生，也激发了数学课堂的生命力。总之，课堂上我们要关注的细节还有很多，我们不必，也不可能全部去关注，只要我们老师能做个有心人，能处处以学生的发展为出发点，尽可能多的关注一些教学上的细节，激发学生学习数学的热情，就能成就高效和谐的初中数学课堂。操作(-)细胞总RNA的提取1、取小鼠肝脏约01g(约绿豆大小),置匀浆器中,加入1mItrizol,充分匀浆2、将匀浆后样品转入Ep管,离心数秒,取250ul上清至一新Ep管中、每管样品中加入50u氯仿(萃取酚),充分振荡混匀,静置10min。4、12000rpm×10mino取上清转入新Epg管,加等体积异丙醇,混匀,室温放置10min。6、12000rpm×10min。、弃上清,加入50u170%乙醇洗涤一次,自然晾干。8、加入50uIDEPO水溶解沉淀。(二)逆转录反应(总体积20u1l)RNA(1-4ug)OligodT1ulDEC处理的dH2070℃反应5分钟,迅速置于冰上5分钟5×buffer4ul10mMdNTP4ul42℃预热5分钟逆转录酶AMRNasin42℃