血清糖链抗原19-9（CA19-9）定量检测标准操作规程

血清糖链抗原199(CA199)定量检测标准操作规程××医院检验科临床免疫室作业指导书文件编号:XXX生效日期：共页第页1.目的规范操作流程，保证血清糖链抗原199(CA199)定量的准确性和可靠性。2.原理采用双抗体夹心法原理，整个过程18min完成。育：10μl标本、生物素化的单克隆CA199特异抗体和钌(Ru)标记的单克隆CA199特异抗体混匀，形成夹心复合物。2．2·第2步孵育：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。3.标本要求3．1．1血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试管。标本在2~8℃可稳定7天，－20℃可稳定3个月。含沉淀的标本使用前需离心。心 (大约15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可进行检测。3．3·患者准备的一般要求：患者在采血前24h内应避免运动和饮酒，不宜改变饮食习惯和睡眠习惯。一般主张在禁食12h后空腹取血，门诊患者提倡静坐15min后再采血。4.试剂与仪器4．2·试剂使用：试剂盒中的试剂是一个整体，打开后可立即使用，不能被分开。正确操作需要的所有信息可通过相应的试剂条码读取。素结合能力：470ng生物素／mg粒子。含防腐剂。4．4·其他材料：CA199定标液、肿瘤标志物质控品(PreciControlTumorMarker)1和2、分析杯和Elecsys分析吸头(移液管吸头加样枪头)、通用稀释液、ProCell系统缓冲液、CleanCell检测池洗液、SysWash(附加洗液)、SysClean系统清洗、ProCellM系统缓冲液、ProbeWashM清洗液、废物袋。4．5．1存放在2~8℃。为了确保使用前自动混匀期间提供足够量的磁性微粒，试剂盒器上，8周(交替贮存在冰箱内和仪器上，室温20~25℃，开瓶使用时间累计约20h)。5.操作步骤5．1．1在使用前分析仪自动使微粒处于悬浮状态。通过各试剂条形码可读取其详细实验参数。在少数情况下，分析仪无法自动读取信息时，请输入标签上的15位数字序列。仪将自动调节反应温度及各试剂瓶瓶盖的开关状态。6.校准6．1·溯源性：该检测方法可溯源至酶检测CA199方法。每个ElecsysCA199试剂都有一个条形码，包含了各批号试剂定标的具体信息。预先确定的主曲线适用于用ElecsysCA199CalSet试剂盒进行测定的分析仪。6．2·定标频率：必须使用新鲜试剂对每个试剂批进行一次定标(即试剂盒上机登入后的24h内)。下列情况建议重新定标：使用同一批试剂的1个月后(28天)；7天后(在分析仪上使用同一试剂盒)；根据需要：质控结果超出范围时，比如质控结果在规定的限值外；若两水平质控均在控，则定标曲线可延至试剂及质控批号更换。差。7.质控该测试适用的质控液PreciControlTumorMarker1和2；也可以用其他合适的质控液，如××LyphochekTumorMarkerPlusControl。在以下情况建议进行质控检测：每24h进行室应及时采取纠正措施。8.结果判断定)。如果测定值低于最低检测限，报告为＜0．600U／ml。如果测定值高于检测范围，报告为＞1000U／ml(结果达到10000U／ml样本应作50倍稀释)。8．3·稀释：CA199高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1∶10稀释(既可以自动稀释也可以手工稀释)。稀释后的标本CA199含量必须高于50U／ml。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，软件会自动计算结果。8．4·检测结果的不确定度：具体参见AFP标准操作规程的相关内容。9.生物参考区间本实验室血清CA199生物参考区间为≤27U／ml。10.性能参数 409nmol／L)的影响。对于接受高剂量生物素治疗的患者(＞5mg／d)，必须在末次生物素治疗8h后采集样本。检测结果不受类风湿因子影响(RF不超过1500U／ml)。CA199浓度最高达到500000U／ml时无高剂量钩状效应。针对27种常用药物进行了体外检测。未发现有药物影响检测结果。少数病例中极高浓度的分析物特异性抗体、链霉亲和素或钌抗体会影响检测结果。通过适宜性的实验设计可将影响因素降到最低。11.临床意义11．1·CA199测定有助于胰腺癌(敏感性70％~87％)的鉴别诊断和病情监测：测定值高低与肿瘤大小无关，但是血清CA199水平高于10000U／ml时，几乎均存在外周转移。CA199测定不能用于胰腺癌的早期发现。CA0％~75％诊断敏感性。对于胃癌，建议做CA724和CEA联合检测。对于结、直肠癌，只做CEA检测已足