EO工程细胞培养方法和反应器

EPO工程细胞大规模培养方法和反应器

马佳鹏刘丽佳

70期生命科学与技术基地班沈阳药科大学1红细胞生成素(erythropoietin,EPO)

红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是一种糖蛋白,它是红细胞发育成熟过程中的一种最重要的调节因子,它在治疗肾衰引起的贫血中,显示明显的疗效和很小的副作用;在纠正恶性肿瘤相关贫血、艾滋病引起的贫血和化疗引起的贫血等方面,也显示乐观的前景;还可在手术前作为自体输血,从而避免感染血源性疾病等等。因此EPO是很有前途的一种细胞因子

2rhEPO的工程细胞

rhEPO(人重组红细胞生成素)

的工程细胞通常使用CHO细胞,因为CHO细胞是重组糖蛋白生产的首选体系,而rhEPO就是一种糖蛋白.CHO细胞是体壁依赖性细胞.3培贞养惑基微确载林体生氧物末反千应恢器r海h壶E梅P榴Or腥h若E书P创O工秆程混细阵胞C栋H府O培语养必参陕数分艘泌表产佛物分批离勒纯市化4培贯养衫基天训然起培维养卸基合滋成俊培厚养侍基无晴血会清穴培损养傲基5无揭血巩清宵培川养滩基无属血旅清皱培庭养栏基得是摘在庭合宇成犁培为养讨基毅内秒加忍入菌不攻同团种盐类喉的梅补且充赏因步子厘而擦替案代P映B以S的早培盯养袍基.它舍避顾免饱了似血姐清获培扮养脑基巾污仙染惯的锻可兆能除性,并炎排统除艺了见批因次科间千的夫差蝇别方还福减侵少锋了狼纯衰化躲的驳难益度.但恼无撤血顷清劫培替养新基虏没动有被广毙泛吗的乓适泼应钩性,不其同对的尖细阵胞祖甚皂至毫不婆同钳的包细凯胞梢株誓和槐细丙胞匹系拣有察各冰自破独连立昨的温无撒血顾型堪培哪养裙基猫配穷方.6补杯充缸因讲子是猫无匠血志清和培杜养宁基骡中梢各催种他血凉清思替沉代偶成彻分叔的未总泪称宋。游补露充祝因床子掉的馋种突类煎繁殿多,主扁要恳有棉生蛮物盐大站分维子拜、飞小暮分妈子敢和糟微傲量离元恐素迅等市。扬补岗充傻因金子奋又悼可获归盯类置为必苗需续补锈充酱因医子和特哗殊萝补乓充群因艘子。必樱需坐补怀充因拥子:胰钳岛匀素逃、室转恳铁脖蛋瓣白兰和米亚突硒灰酸等钠所界有大的米细贝胞久株掩在拉无夸血勿清酬培务养置基映中阻生葡长形时相都娃需否要禽的,特夺殊蜻补写充因寇子:轮①生拆长彩因换子碗②格激洋素炭③妈贴请壁奸因椅子贯④陕其降它荒补品充纪因赛子71仰.胰纱岛辟素:细牌胞板无肥血催清铃培处养垫中,胰节岛激素姜的爬使脖用矛浓字度蓬为0城.赞1月~香1元0寒μ赵g葵·痒m枯L或-坏1。掌胰食岛脚素慕可庄以胸促巾进R叔N谋A、血蛋旁白进质瓣和折脂信肪漫酸增的敌合初成,抑暂制捉细暂胞券凋责亡,是撞重厨要梳的篮细土胞汪存锈活刃因析子,部川分袍学吗者碗认担为应在扑批大式照培筑养闸中牙胰春岛哈素凳迅寻速钳耗然尽别是量细抢胞纳比顿生独长跪速崭率荷下砍降懒的秆主慕要抓原跌因营。C稿H近O细颗胞侍能料在描仅域含出重量组纸人虑胰娇岛边素乌一础种膊蛋骂白矩成探分脊的阀无续血振清役培敌养抗基巧中损连限续羊传周代82灰.转熊铁纤蛋丛白:大范多旱数曲哺慨乳当动战物漫细央胞沾上迅存魂在榨特羽定胶的绞转平铁轿蛋党白剧受塞体,受君体渴与魄转矩铁遍蛋案白/束F团e夜3逢+复需合受物秘结弃合剖是咏细滴胞吼获扬取舒必弟需瓜的收微炸量崭元班素乓铁轧的依主谨要践来就源,此端外用转戒铁爸蛋躺白秘还玻具麦有炊生楚长沈因受子烛的喂性穷质取并咱能档与吹其盗他献微输量做元摄素扩如斯钒题等宪结吼合揪。渣转哗铁社蛋赵白柿的虫使庆用堂浓氧度扰为0燥.通5孤~际1变0超0舒μ挑g隶·除m驳L锡-韵1投,亦标有仁研在究宰报群告横指径出,无禾血守清屑培楼养沃基耽中纠必挨须楼要天有赵转决铁鸟蛋雕白散至赠少5饼μ介g敢·型m缝L咏-扩1个,胰走岛丧素牵才么能帖起算作岗用轰。佣也歇有炕资办料梳证勾实胶转欲铁锡蛋供白窑在隙无皂血耽清查培刺养掩基贯中耀的旺作坟用动可顾以恩为追某路些忌铁眼盐良所降代垦替,如着柠被檬禽酸企铁匆、俯二俊甲融胂洲酸恳铁柜、埋葡锅糖邻酸尘铁蒙等做。93膝.亚欢硒遇酸棋钠:乒H肤e字w孔l婶e荡t半t在1汽9拐9乱1年芒曾腰指嫌出骡硒慈在桨任谈何河一味种脱细扎胞,特话别亭是爬人造体蔬细排胞稍的都生侨长类过其程岂中身确厉实亏具袭有般明者显齿作御用,微拾量俱元陪素打硒绑参粉与侮谷霉胱屯甘答肽衣过加氧续化援物允酶嚷和劲过料氧呈化皂物俭歧救化茶酶乡丰的酬作粱用跌过拖程,消氧除布氧透化扯物矿酶逆和栗氧尺自木由财基跑对郊细感胞元的偷伤晃害捧。弱亚泰硒绩酸丈钠捞的扒最性适继添工加恶浓炎度述是3躺0墙~急6洗0隆n逼m铅o子l钉·病L否-骨1。1趟0生翠产r室h做E翁P炎O的鼓无剂血捡清累培求养冈基用紫于益基岔因班重富组例促领人扁红悟细伙胞师生杰成赏素(铅R盖e逼c唯o霜m仔b径i尸n五a隙n行t捡h龄u总m谣a声n坦e你r姑y献t蚁h察r房诚o在p银o骡i纷e倾t拣i晴n踩,柄r秆H抱u浊E虑P山O边)生蜂产哀且子不洲含草牛辉血漏清稿白概蛋迎白齿的纠无埋血女清狠培围养初基-蔑p坐(速S在e蹄r碍u们m帅f积r叶e启e扬m僚e堡d撇i港u垫m宴-膊p咱,础S婚F汉M夹-借p预)培茶养饼液,就师是辜在圈达哀尔锈贝或可奋改圆良秒的亿伊句格荒尔(哨D包u汽l耀b醋e拣c喉c仁o桶s仍m焦o焦d属i专f宋i栏e纹d路E愉a压g榜l达e书s巡寿m么e意d虎i妇u月m纽奉,查D宝M净E幅M微)缝∶短F标1鸭2雨(蜂1搁∶萝1背)培窃养佩基言中棒添劲加锤了S扎e、肉乙摩醇哭胺轧、窜多扩种唱维勉生酸素肥、康蛋耳白默胨帜、划胰崭岛裂素杯、吐转撞铁颤蛋灿白爸和惠一渐些己细充胞闹因参子熊等挖成缴分翼构耻成狼的事专弃用终培棕养求基1逮1使拘用宵无累血患清其培寻养兼基丘的张问席题无摩血每清栗培俱养沿基龟虽霜然无在笑各影个极方传面姐都府显青示秘出示其虫强替大袄的漠优器势办和勇发网展储前熄景,但麦采络用哑无念血双清膏培书养庄而至诱蜘发纸的去细立胞慰凋肿亡会也茧成撞为弊动醉物油细坦胞境无住血煌清厕培关养帝技诞术视中勉亟锦待松解棕决锤的特问怨题.在序培共养胡基雅中讨加蹲入稼某改些鬼化扰合车物,如袜金竞精括三究羧餐酸(荒A诸u战r星i鄙n牌t大r背i钳c绩a会r菜b愁o压x庙y旱l游i谱c豆a附c扁i压d亚,累A泊T刮A今)、逃锌裁离撕子负、慈抗形氧蹦化扔剂赛和第细种胞料因兼子昼等,在歉一拦定筒程闯度受上困可舞阻点止咽因拣采臭用剃无岭血犬清嫩培搬养基衡而宾导湿致圈的铜细汇胞版凋屑亡.1瞒2无顿血冷清抄培同养太基控展置望培久养走基聚中心所吗添第加它的拖蛋摄白剂成婆分坛主弟要途还浴是策来毫源泡于宾动他物锤或援人,仍送然励存朱在猾病村毒盾污君染目的杆危技险,只专有峰完沾全磁采嚼用怒非种动塌物鞭来艳源有的裕材毕料,才匠是看相绿对序安度全序的,而植篇物捧提阅取粱物将原是抚理战想肺的恋选统择.可鸟以柱这届样且预层测,未蜻来肉开那发报的间新昆一唤代臂无挤血船清这培由养似基,将返是如一最种翠既惜无姐血惩清压、住无堡蛋版白,又沫可后以混高琴温绩消顶毒,且显适壁合祸于警多扁种衡不图同痛细童胞梯生慌长会的罪全匠能秩型包培毛养暮基1扬3微扛载蜡体微睡载妹体舌培乘养怎是择细蝴胞挡在骗由仪葡免聚贞糖洗制宵成卡的扯小继球畅表悼面漆成慌单济层摧生仗长,通丘过伶轻怖轻顶搅启拌政使明细帽胞产维灾持惕悬欣浮烦状杰态停。灰这议种嗓培线养狠较揭传半统瓶的涉单线层傲细望胞策培暮养,面由积转大鲜大柴增攻加,将约这肠种颈微指载候体讲在僻流盾化途床吗式雨、林固效定活床利式魂反贱应争器链中吊进洲行仁培机养,则光可俭获释得披比强原袖来恐多2埋0泡~衬5岗0倍贩的辜高谊密付度请细递胞.1屠4常集用余的铺微搜载次体1象5C浴y家t轧o债d颠e前x微愈载剪体浴上尿细池胞澡生迫长北情惕况1茧61刻71饺81钉92托02携1C您y巨t失o界p端o资r遍e的喜性妖质2肌2动栽物螺细央胞刘生妨物避反回应怖器2歪3常楼见疯动猫物植细扭胞狡生显物钓反阵应烦器曾类栗型气禁升箭式(懒a差i敬r侦l精i严f脆t便)生谱物汇反件应拨器中孟空忌纤挎维刺管(酷h碎o咽l译l座o杨w当-芽f片i录b倦e乏r唉)生炸物喂反咐应堪器流堡化补床(通f斧l局u枣i排d克i批z汽-嚷b密e蔽d猾)生优物授反权应春器(叛F抹B竖R户)搅叔拌摊罐(丙s逼t备i览r刑-邻t纵a补n疫k和)生惹物考反单应丽器(裹S灰T神R削)固够定予床(帆f嫁i办x狠e唱d带-瓜b幼e箭d叫)生膜物扯反德应来器填封充骆床(傍p唇a养c骗k唱e露d制-出b绢e链d锹)生夸物践反椅应毁器2曲4填病充坟床篇生竟物素反纺应么器动后物戒细葱胞糕大奋规第模凳培某养太需臂要供合赌适义的困生谜物吹反断应团器.目坟前正国划内剥用报的爽比浇较飞多著的砖适仍合C医H戒O细床胞助生君长比并卧能砌高继效舞表董达迅产鸣物宅的畏反他应抬器骂是水填剩充清床都式麦生买物序反偷应争器,其消中军比并较钳有林名亭的茧是午美慌国N盆B枕S公侨司丝式生抚产联的C屯e奇l泽l急i颂g牙e置n系辅列.2衫5C具e缺l岗l级i东g冶e盲n宰p订l芳u借sC嫩e猾l脸l哥i蚀g吹e亡n且3蜘1隶02秩6C拨e离l宁l躲g纽奉e阀n系歌列乱生杠物限反妖应棒器漠的树特封点适就合只贴秆壁回培启养趟细铺胞写和晶悬潜浮吩细井胞,适炒合奇各端种饿动钳物怨细狼胞,昆寸虫碰细尝胞峡和修植途物蜘细愧胞山等灌松流沃式刊的叨培眉养他过壁程低歪（蒙无意）闹剪逼切承力张搅乘拌,无窗气扑泡公通猪气负；特估殊猪的沙贴背壁辟载鞋体,比察表色面脉积丝式大,静叫止也培恩养通众过律持峰续缝检萄测厨摄辽氧嘱率殖实丙时蝇检猛测盒细披胞饿浓县度符垃合帐现杀行奸药驻品妄生占产伤质沙量遣管井理旦规归范(毒c纵G羞M肢P捆)2加7灌器注陡培窄养灌壁注传属轰于两连宿续园培贴养,细拒胞姥保慢留轨在丛反叉应猾器蹦系值统理中,收亩获杏培宁养诸液木的妈同阿时软不验断章加御入躬新拳鲜雕培肥养菠基.灌化注劣培火养竟的主愧要忠优锻点是火连摆续换灌鼻注虎的听培骑养锹基卷可姜以废提馅供亚充桃分冶的姜营倒养挺成宰分,并储带芝走务代篇谢低产哲物.同东时,细守胞浅保摔留合在搞反腐应嘉器璃中,可喇以得达股到方很躲高昌的拣细聋胞盏密臂度.同贤其府他俩方房诚法邪相军比,灌年注毙培督养垦的学产俊率老可膀以泛提宾高朗一眯个疼数目量馆级,并棒可倘以赶大来大筹降每低梨劳蔬动像力痒的僻消即耗.2摸82势9C群e还l阴l胀i般g及e母n系清列昏生芦物奔反袋应兽器略的兰特杆点适址合哥贴藏壁敞培息养族细缝胞工和篮悬汉浮立细狼胞,适已合谜各减种增动四物败细顶胞,昆慈虫弄细贯胞遭和伴植亿物灿细对胞绢等灌居流衣式界的槐培茂养宰过为程低亮（泼无悦）散剪板切君力壤搅侨拌,无条气貌泡防通停气爽；特膝殊灵的乘贴赏壁榴载宵体,比届表粘面啦积毯大,静薯止究培驱养通斜过诵持乏续呆检雁测暗摄输氧丘率议实姐时趴检趣测钱细泼胞劳浓织度符赌合从现页行伙药丙品破生且产贷质态量盛管枝理枪规放范(捕c雷G咐M丸P壤)3虽0搅腐拌战叶幕轮霉种告类3敲1C零e签l质l穗i饰g库e陪n系驻列怪生勾物能反默应农器汗的料特际点适奇合岛贴武壁冒培踩养嘴细千胞嚼和系悬咱浮穷细伶胞,适距合炕各宰种敏动苍物弱细识胞,昆傍虫劝细剪胞竿和闷植显物米细称胞课等灌艇流麦式且的艇培组养说过共程低源（滤无毁）负剪狐切头力币搅录拌,无屯气聚泡怖通线气规；特观殊剧的猪贴熟壁夕载狠体,比着表填面请积净大,静劣止杏培抢养通村过射持怀续岗检那测裹摄跨氧陈率秧实鼻时蓬检瞒测擦细鸦胞藏浓宇度符巧合雅现启行逝药祖品浅生滋产忘质况量李管铸理津规迎范(巾c遗G索M芳P恒)3魄2C童e牙l挤l卵i处g饮e嫂n系望列富使蜓用惕的杂载系体—豆F带i怕b迫r超a埋-想C孔e呆l要(聚己酯坚片)3龟3F锄i昼b紧r翁a胀C镇e茫l的反技雄术弄指霸标3胃4F抓i歉b芽r哈a匹C医e铸l的显电腐镜坑照誓片无侍细前胞森生码长楼的F葡i耍b仔r周a隆C找e撞lH样E业K塔2赞9陷3细盼胞糊在F押i路b痒r涂a箭C闲e漂l上短生特长4天辨的悔情喷况H怖E埋K树2骂9朱3细带胞跨在F童i俯b脸r番a浇C顿e税l上抵生喘长7天姐的涝情浇况3轰5F妄i讯b务r蚊a射C端e近l适伪用捏的织细戒胞灶种耍类3掏6篮验式即纤喝维紫填响充垄床3谊7C毒e价l拘l殿i帖g液e巨n系浊列东生冒物巨反攻应谨器走工述作暗原摧理(卷P抽1驰1腥3号)3岁8用骡无稼血朗清愤培茎养郊基指在票填筑充索床个生拼物暑反凤应等器黄生烛产r量H疫u驼E补P宝O文但摘在笛填云充展床秋生鲁物粘反太应亦器种用卸含5谦%欧F壮B归S的D退M粮E晒M培:缘瑞F飞1揉2培市养盐基扎培意养庄产抢重丛组巧人嘱促杆红害细戏胞舱生团成咽素(覆r送H士u弦E竖P隆O飘)的菠细遇胞C计H揭O折8序~装1撒0卸d后,使谢用江自牺制声的陷无绪血壶清符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