2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年真题集锦附答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年真题集锦加答案（图片大小可自由调整）题型一二三四五六七总分得分第1卷一.参考题库(共30题)1.蓝白斑筛选重组子时，白色菌落不一定就是阳性克隆。2.EcoRI切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要A、用CIP处理载体DNA防止自身环化B、进行琼脂糖凝胶电泳检测C、上述说法都正确D、用65℃处理5～10min使限制性内切核酸酶失活3.用下列方法进行重组体的筛选可以说明外源基因进行了表达。A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、Western印迹D、原位菌落杂交4.第一个被分离的Ⅱ类限制性核酸内切酶是：A、EcoKB、HindⅢC、HindⅡD、EcoB5.基因治疗一般都是通过体内法这一途径进行的。6.PCR反应中引物长度一般是A、5bpB、10bpC、16bpD、20bp7.双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()A、DNA的连接反应B、DNA的降解反应C、聚合单体2‘和5’位的脱氧D、DNA的聚合反应8.人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。科学家应对多少染色体进行分析A、46条B、24条C、23条D、22条9.________技术是基于互补的DNA单链分子能够形成稳定双螺旋结构的天然特性而发展起来的。10.何谓cDNA文库？11.在长模板链的指导下，引物延伸合成长的DNA互补链时应选用A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶C、大肠杆菌DNA聚合酶ID、T7DNA聚合酶12.写出动物基因工程的常用方法？13.下列对建立cDNA文库的描述不正确的是A、从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB、用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD、新合成的双链DNA甲基化14.能通过分泌或运输方式定位于细胞周质甚至穿过外膜进入培养基中的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白15.下列哪一种限制性核酸内切酶是单功能酶A、I型B、II型C、III型D、IV型16._________是指利用基因工程原理和技术，将感兴趣的基因在植物中表达并实现稳定遗传。17.大肠杆菌聚合酶I具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种18.融合表达载体中担体蛋白比较常用的有（）A、GSTB、六聚组氨酸肽C、绿色荧光蛋白D、LacZE、亲水性多肽19.构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达?A、融合表达B、分泌表达C、独立表达D、包涵体表达20.M13噬菌体颗粒是_________状的，其基因组为单链DNA。21.Kan表示A、氨苄青霉素B、卡那霉素C、潮霉素D、四环素22.大肠杆菌DNA聚合酶有几种酶活性A、5种B、2种C、3种D、4种23.写出分子克隆的载体应具备的条件？24.蓝白斑筛选是A、表型检测法B、核酸杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法25.大肠杆菌DNA聚合酶I是一种多功能酶，具有哪些酶活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性26.不同的表达载体需要不同的受体系统进行基因表达，受体系统根据宿主细胞的性质可以分为两大类：________________和真核表达系统。27.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段。28.载体29.同尾酶即识别位点不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。30.ES细胞是_________。第1卷参考答案一.参考题库1.正确答案:正确2.正确答案:A3.正确答案:B4.正确答案:C5.正确答案:错误6.正确答案:D7.正确答案:D8.正确答案:B9.正确答案:核酸杂交10.正确答案:指某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。11.正确答案:D12.正确答案:显微注射技术构建转基因小鼠；基因打靶策略；病毒载体法；精子载体法；ZFN介导转基因；TALEN技术。13.正确答案:A14.正确答案:B15.正确答案:B16.正确答案:转基因植物17.正确答案:C18.正确答案:A,B,C,D,E19.正确答案:A20.正确答案:丝21.正确答案:B22.正确答案:C23.正确答案:自主复制，即具有复制原点；易于扩增分离纯化；有适宜的限制酶切位点；具备对重组体易于检测的选择性遗传标记；表达载体还应有表达调控元件。24.正确答案:A25.正确答案:B,C,D26.正确答案:原核表达系统27.正确答案:枯草杆菌蛋白酶28.正确答案:基因工程中，携带外源目的基因或DNA片段进入宿主细胞进行复制和表达的工具。29.正确答案:正确30.正确答案:胚胎干细胞第2卷一.参考题库(共30题)1.PCR循环时按什么方式扩增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+12.Tet是下列哪一种抗性标记的简写名称A、氨苄青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四环素3.pGEM质粒有几个启动子A、0个B、2个C、3个D、4个4.PCR反应中的复性温度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃5.多核苷酸激酶之所以能够用于DNA片段的标记，是因为它能够将单个的32P标记的单核苷酸加到每一DNA链的5’端。6.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，克隆载体的选择与改造，____________的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出转化子。7.何谓溶原性方式？8.基因治疗研究的基本程序不包括A、目的基因的选择与制备B、靶细胞的选择和培养C、基因的导入和表达D、大肠杆菌的培养9.T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E．coli中分离的，这种连接酶A、催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B、既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C、是一种单肽酶，分子质量为74kDaD、既能催化单链DNA

连接又能催化双链DNA

连接

10.试述基因组文库的构建流程。11.蛋白质的融合表达式指外源基因与载体已有的担体蛋白的编码基因拼接在一起，并作为一个新的____________进行表达。12.何谓转基因植物？13.Ti质粒14.启动子15.BAC表示的是（）A、人工Y染色B、细菌人工染色体C、粘粒D、酵母人工染色体16._________的使用，使基因操作技术有了突破性的飞跃，成为2011年的Nature年度技术。17.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以两个方向插入到EcoRI末端的载体中。18.酵母表达系统是最常用的真核表达系统。19._________利用激光微束脉冲引起细胞膜可逆性穿孔，从而将外源DNA导入受体细胞。20.融合蛋白实际上就是杂合蛋白，含有两个或多个蛋白质的氨基酸序列。21._________让外源DNA沿着花粉管经过珠心进入尚未形成正常细胞壁的卵子、合子或早期胚胎细胞中，从而实现基因的转移。。22.基因工程以_________为基本材料。23.评估基因文库完备性的数学公式是A、N=lg（P+1）/lg（f+1）B、N=ln（1-P）/ln（1-f）C、N=lg（1-P）/ln（1-f）D、N=lg（1-f）/ln（1-P）24.两个基因融合所编码的新蛋白称为_________。25.植物基因转化受体系统应具备的条件？26.带有多个不同类型的复制起始区的质粒是A、表达质粒B、整合质粒C、多拷贝质粒D、穿梭质粒27.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是____。28.以病毒为载体产生转基因的动物是_________。29.使外源基因在人体表达从而克服某一缺陷或疾病的技术称为A、基因治疗B、基因工程C、基因药物D、免疫治疗30.最早被研制成功的两个基因工程激素药物是______________和生长激素。第2卷参考答案一.参考题库1.正确答案:B2.正确答案:D3.正确答案:B4.正确答案:B5.正确答案:错误6.正确答案:目的基因与克隆载体7.正确答案:进入细菌的λDNA可整合入细菌的染色质DNA中，随细菌染色体DNA复制，传给细菌后代。8.正确答案:D9.正确答案:B10.正确答案:生物供体DNA片段的制备；载体的选择与制备；DNA片段与载体的连接；重组体转化宿主细胞；基因文库质量的评价。11.正确答案:开放阅读框12.正确答案:指利用基因工程原理和技术，将感兴趣的基因在植物中表达并实现稳定遗传。13.正确答案:是根癌农杆菌染色体外的遗传物质，为共价闭合双链环状DNA分子。14.正确答案:是一段提供RNA聚合酶是被和结合的DNA序列，位于基因的上游，长度因生物种类而异。15.正确答案:B16.正确答案:ZFN技术17.正确答案:正确18.正确答案:正确19.正确答案:微激光束法20.正确答案:正确21.正确答案:花粉管导入法22.正确答案:DNA23.正确答案:B24.正确答案:融合蛋白25.正确答案:（1）高效稳定的再生能力；（2）较高的遗传稳定性；（3）具有稳定的外植体来源；（4）对选择性抗菌素敏感；（5）对农杆菌侵染有敏感性。26.正确答案:D27.正确答案:EcoRl28.正确答案:病毒载体法29.正确答案:A30.正确答案:胰岛素第3卷一.参考题库(共30题)1.逆转录合成第一条链时一般采用下列哪一种酶A、鼠源反转录酶B、鸡源反转录酶C、兔源反转录酶D、禽源反转录酶2.试述免疫共沉淀技术的原理？3.核酸杂交的原理是根据RNA分子间互补。4._________---阿尔茨海默病神经系统疾病模型。5.影响连接反应的因素有A、DNA末端的形式B、DNA分子浓度的影响C、连接反应温度与时间的影响D、连接缓冲液的影响E、酶浓度的影响6.重组体的筛选方法有A、抗性药物标记选择法B、分子杂交法C、蓝白斑法D、免疫印迹法E、插入失活法7.试述基因敲除技术的原理？8.获得DNA重组体后，还需进一步鉴定，可采用的方法有A、DNA序列测定B、PCR鉴定C、酶切鉴定D、表达产物的鉴定E、进行定点突变9.下列哪一种结构形态的外源蛋白表达量高A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白10.在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他的限制酶就不能切割了。11.印迹是如何形成的？12.基因组文库的构建一般包括下列基本步骤A、细胞染色体大分子DNA的提取和大片段DNA的制备B、载体DNA的准备C、载体与外源大片段DNA的连接D、体外包装机基因组DNA文库的扩增E、重组DNA的筛选和鉴定13.基因重组的载体必须具备下列哪些特点：A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制B、插入外源DNA后也不影响自身的复制C、易于进入受体细胞D、通过自身的酶系在受体细胞中复制E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定14.M1载体在多克隆位点的两侧引入了T7和T3两个噬菌体的启动子，这样增加了该载体的功能，下述四种功能中哪一种是不正确的?A、可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析B、利用这两个启动子的通用引物进行PCR扩增C、利用通用引物进行序列分析D、利用这两个启动子进行定点突变15.PCR反应中DNA模板量一般为A、100-10000拷贝B、100-100000拷贝C、1000-10000拷贝D、10-100拷贝16.一个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。17.利用DNA自动测序时通常进行标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP18.细菌抗药性基因一般存在于A、核酸DNAB、质粒C、RNAD、小的直线型DNA19.基因工程的两个基本特点是：分子水平上的操作和_________。20.DNA经限制性内切酶切割后可产生两种末端：___________和平头末端。21.miRNA的检测方法A、Northern印迹杂交B、基因芯片C、qRT-PCR技D、原位杂交22.II型限制性核酸内切酶的酶蛋白分子是由单一亚基构成。23.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个24.Klenow酶在有_________情况下，呈现DNA聚合酶活性，25.1986年第一例植物基因工程产品----_________问世。26.下列属于基因克隆载体所必须具有的条件是①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞内复制④具有多种限制性内切酶A、①②B、③④C、①③D、②④27.关于cDNA的最正确的说法是A、同mRNA互补的单链DNAB、同mRNA互补的双链DNAC、以mRNA为模板合成的双链DNAD、以上都正确

28.下列属于基因工程步骤的是（）A、提取目的基因B、目的基因与运载体结合C、目的基因导入受体细胞D、目的基因的表达29.大肠杆菌DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，A、将双链DNA分子中的5’磷酸基团同3’羟基基团末端重新形成磷酸二酯键B、作用时不消耗能量C、需要Mn2+等