2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试参考题库答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试参考题库含答案（图片大小可自由调整）题型一二三四五六七总分得分第1卷一.参考题库(共30题)1.__________通常是指通过基因工程、抗体工程、细胞工程技术等制备生物药品用于疾病诊断、预防和治疗的行业。2.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性:5-3合成酶的活性和3-5________。3.两个基因融合所编码的新蛋白称为_________。4.______________也叫做依赖于RNA的DNA聚合酶或RNA指导的DNA聚合酶。5.反向PCR是以mRNA为模板进行的一类特殊PCR。6.逆转录PCR主要有两个应用，一是从mRNA出发获取目的基因，二是_____________。7.基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA文库中则不含_________。8.下列含有内含子的生物是A、青霉B、放线菌C、蓝藻D、大肠杆菌9.外源DNA离开染色体是不能复制的，将外源DNA与____________连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。10.请写出天然DNA提取的三个主要步骤。11.按照人们的意愿，改变基因中碱基的组成，以达到基因突变的技术称为________。12.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个13.克隆即无性繁殖的意思，通过克隆可以在无性的条件下获得遗传结构和表型完全相同的一群个体。14.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是A、用RNA探针检测RNA片段B、用DNA探针检测RNA片段C、用DNA探针检测蛋白质片段D、用RNA探针检测DNA片段15.X-gal显色反应的基本原理是使载体上与受体互补的α肽失活。16.何谓星活性？17.II型限制性核酸内切酶在发挥作用时需要ATP和Mg2+。18.蓝白斑筛选重组子时，白色菌落不一定就是阳性克隆。19.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？20.向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，达到治疗的目的。这个过程叫做A、基因治疗B、基因置换C、基因修正D、基因激活21.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。22.II型限制性核酸内切酶的识别位点是回文对称结构。23.用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。24.T4DNA聚合酶具有几种酶活性A、2种B、3种C、4种D、1种25.原位杂交是指A、菌落杂交B、液相杂交C、直接对染色体或组织杂交D、转膜杂交26.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，克隆载体的选择与改造，____________的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出转化子。27.用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶28.基因重组的步骤包括A、用PCR技术扩赠出大量的重组DNA分子B、用连接酶将外源DNA和载体连接C、通过转化将重组DNA导入宿主细胞D、用载体上的相应抗性筛选含有重组DNA的克隆E、将重组DNA导入人体，用于疾病治疗29.考斯质粒（cosmid）是一种A、天然质粒载体B、由l-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C、能裂解受体细胞的烈性载体D、能在受体细胞内复制并包装的载体30.__________________是指那些既能在真核细胞中繁殖又能在原核细胞中繁殖的载体。第1卷参考答案一.参考题库1.正确答案:生物制药2.正确答案:外切核酸酶的活性3.正确答案:融合蛋白4.正确答案:逆转录酶5.正确答案:错误6.正确答案:研究基因的表达情况7.正确答案:内含子8.正确答案:A9.正确答案:克隆载体10.正确答案:（1）准备生物材料；（2）裂解细胞；（3）分离和抽提DNA。11.正确答案:定点突变12.正确答案:A13.正确答案:错误14.正确答案:B15.正确答案:正确16.正确答案:在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做星活性。17.正确答案:错误18.正确答案:正确19.正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。20.正确答案:A21.正确答案:20世纪70年代22.正确答案:正确23.正确答案:错误24.正确答案:A25.正确答案:A26.正确答案:目的基因与克隆载体27.正确答案:D28.正确答案:A,B,C,D29.正确答案:D30.正确答案:穿梭载体第2卷一.参考题库(共30题)1.受体细胞的感受态是___________。2.下列符合PCR反应的引物设计要求的是A、引物长度一般要求有16-30bpB、G+C含量一般为40%-60%C、四种碱基随机分布D、两引物之间不应互补E、引物自身不应存在互补序列而引起自身折叠3.下列哪项是表达载体特有的而克隆载体没有的元件A、复制点B、筛选标记C、多克隆位点D、启动子4.同位素标记探针是指在探针上连接下列哪一种物质A、32PB、生物素C、荧光素D、酶5.通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。6.基因工程的基本流程是A、目的基因的分离、获取与制备B、目的基因与载体连接构建成为重组载体分子C、重组DNA分子导入到受体细胞D、外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选E、外源目的基因的表达7.用_________表达乳铁蛋白可谓是乳腺生物反应器的典型代表。8.动脉硬化属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、恶性肿瘤C、血友病D、艾滋病9.不是克隆质粒的是A、pSC101质粒B、pBR322质粒C、M13噬菌体颗粒D、pUCl810.大肠杆菌DNA聚合酶I是一种多功能酶，具有哪些酶活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性11.甲醇酵母表达系统具有的抗药性基因是A、氨苄青霉素和卡那霉素B、四环素和氨苄青霉素C、氨苄青霉素和庆大霉素D、四环素和庆大霉素12.Bal31核酸酶是Ca2+依赖性的，在反应混合物中加入EDTA便可抑制它的活性。13.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白14.融合蛋白实际上就是杂合蛋白，含有两个或多个蛋白质的氨基酸序列。15.Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的DNA是以一种_______________形式存在。16.外源基因经pET载体的表达，其表达量往往超过总蛋白的A、40%B、20%C、30%D、50%17.启动子从转录模式上可分为哪两种？表达系统常选用哪一种？其机理是什么？18.下列不是Southern印迹步骤的是（）A、DNA与载体的连接B、用凝胶电泳分离DNA片段C、DNA片段转移至硝酸纤维素膜上D、用限制酶消化DNA19.BAC载体的最大容载能力是_______。20._________是革兰氏阳性细菌，在芽孢形成过程中能产生大量的伴孢晶体。21.同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因DNA与载体DNA时，酶切片段不能互相连接的是A、载体DNA与载体DNA之间B、目的基因与载体DNA之间C、目的基因与mRNA之间D、目的基因与目的基因之间22.基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A、细胞B、组织C、分子D、原子23.Northern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体24.双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()A、DNA的连接反应B、DNA的降解反应C、聚合单体2‘和5’位的脱氧D、DNA的聚合反应25.波莉绵羊的诞生是通过体细胞核移植法制备的。26.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种27.PCR特异性与模板特异性成反比。28.说明SangerDNA测序法的原理。29._________是一种借助显微镜将外源DNA直接注入受体细胞的方法。30.在基因工程中，可用碱性磷酸酶A、防止DNA的自身环化B、同多核苷酸激酶一起进行DNA的5’端标记C、制备突出的3’端D、催化DNA连接E、上述说法都正确第2卷参考答案一.参考题库1.正确答案:接受外源DNA的生理状态2.正确答案:A,B,C,D,E3.正确答案:D4.正确答案:A5.正确答案:-70℃6.正确答案:A,B,C,D,E7.正确答案:转基因牛8.正确答案:A9.正确答案:C10.正确答案:B,C,D11.正确答案:A12.正确答案:错误13.正确答案:B14.正确答案:正确15.正确答案:DNA双螺旋结构16.正确答案:D17.正确答案:启动子从转录模式上分为：组成型启动子和诱导型启动子，表达系统常选用诱导型启动子，机理：指在某些特定的物理或化学信号的刺激下，该种类型的启动子可以大幅度的提高基因的转录水平。18.正确答案:A19.正确答案:300kb20.正确答案:Bt21.正确答案:C22.正确答案:C23.正确答案:B24.正确答案:D25.正确答案:正确26.正确答案:B27.正确答案:错误28.正确答案:(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程)；(2)可延伸的引物必须能提供游离的3'羟基末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3'羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应，则会获得4组长度不同的DNA片段。通过比较所有DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。29.正确答案:显微注射法30.正确答案:A,B第3卷一.参考题库(共30题)1.质粒具备的特征不包括A、赋予宿主细胞某种可检测的特性B、独立复制的能力C、可复制自身DNA以及插入的外源DNAD、甲基化防止宿主的限制性内切核酸酶对其降解

2.下列哪一种测序方法不需要跑胶A、化学降解法B、自动测序法C、胶磷酸测序法D、双脱氧末端终止法3.1970年，第一次重组DNA分子转化成功的基因克隆实验，标志着基因工程诞生了。4.Cohen等在_________年构建了第一个有功能的重组DNA分子。5.基因敲除的应用有哪些前景和展望A、基因功能研究B、建立人类疾病模型C、疾病的基因治疗培育新的生物品种6.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？为什么？7.酵母双杂交法是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用8.在众多的植物转基因方法中，_________的方法应用最多。9.基因操作的核心部分是_________。10.用Sanger双脱氧法进行DNA测序时，凝胶上读出的序列是A、模板链的互补链B、mRNA的C、cDNA的D、模板链的11.II类限制酶反应中必须添加的阳离子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+12.下列属于基因克隆载体所必须具有的条件是①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞内复制④具有多种限制性内切酶A、①②B、③④C、①③D、②④13.Cre-loxP系统中两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反，Cre重组酶诱导loxP间的序列翻转14.重组DNA的含义是什么？15.Klenow酶在有_________情况下，呈现DNA聚合酶活性，16.限制酶主要是从_________中分离纯化出来的。17.PCR反应中的复性温度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃18.染色质免疫沉淀技术是研究生命体组织或细胞内蛋白质与DNA相互作用的一种技术方法19.westernblot是属于下列哪一种检测方法A、表型检测法B、蛋白质杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法20.基因打靶包括基因敲除和_________。21.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指A、构建重组DNA分子B、无性繁殖DNAC、有性繁殖DNAD、建立单克隆抗体22.真核生物基因组上有些DNA序列能将基因及基因簇隔开，阻止邻近基因之间的相互作用，这些功能序列被称为_________。23.cDNA克隆与基因组克隆有何不同？24.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。25.基因工程所用的克隆载体不需要具备下列哪一个元件A、复制原点B、SD序列C、较高的拷贝数D、选择标记26.EcoRI的识别序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-327.你在做Southern印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案，下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶，使DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白