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文档简介

抓住3个基础知识点掌握3个核心考点高效训练5道题选修3现代生物科技专题第1讲基因工程一、基因工程的基本工具1.限制性核酸内切酶(简称:限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)作用:识别特定的核苷酸序列并切开特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)结果:产生黏性末端或平末端。抓住4

个基础知识点2.DNA连接酶常用类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能连接黏性末端连接黏性末端或平末端结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键2.基因表达载体的构建——基因工程的核心(1)基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。①启动子:a.位置:位于基因的首端。b.作用:是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA,最终获得所需要的蛋白质。②终止子:a.位置:位于基因的尾端。b.作用:使转录在所需要的地方停止下来。(2)构建目的:①使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代;②使目的基因能够表达和发挥作用。3.将目的基因导入受体细胞(1)转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。(2)常用方法(连线):受体细胞导入方法①动物细胞 a.农杆菌转化法 b.显微注射法②植物细胞 c.基因枪法 d.感受态细胞法 (Ca2+处理法)③微生物细胞 e.花粉管通道法【提示】①-b②-a、c、e③-d4.目的基因的检测与鉴定方法检测或鉴定目的水平DNA分子杂交技术检测目的基因的有无分子水平分子杂交技术目的基因是否转录抗原——抗体杂交目的基因是否翻译抗虫或抗病接种实验是否具有抗虫抗病特性个体水平三、基因工程的应用技术名称应用植物基因工程培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质动物基因工程提高动物生长速度,改善畜产品的品质,用转基因动物生产药物,用转基因动物作器官移植的供体基因治疗把正常基因导入病人体内,使其表达产物发挥作用,从而治疗疾病,分为体内基因治疗和体外基因治疗四、蛋白质工程1.概念理解(1)基础:蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。(2)操作:基因修饰或基因合成。(3)结果:改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质。(4)目的:满足人类的生产和生活的需求。2.操作过程从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。考点一基因工程的基本工具一、与DNA相关的酶1.五种DNA相关酶的比较掌握3

个核心考点作用底物作用部位形成产物限制酶DNA分子磷酸二酯键黏性末端或平末端DNA连接酶DNA片段磷酸二酯键重组DNA分子DNA聚合酶脱氧核苷酸磷酸二酯键子代DNADNA解旋酶DNA分子碱基对间的氢键形成脱氧核苷酸单链DNA(水解)酶DNA分子磷酸二酯键游离的脱氧核苷酸2.限制酶和DNA连接酶之间的关系图示(1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。(2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。(3)限制酶是一类酶,而不是一种酶。(4)DNA连接酶起作用时,不需要模板。二、载体1.作用:(1)作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。(2)利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。2.具备的条件:条件适应性稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组DNA的鉴定和选择1.下图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是()—————[考向预测练1]—————

A.DNA连接酶、限制性内切酶、解旋酶B.限制性内切酶、解旋酶、DNA连接酶C.解旋酶、限制性内切酶、DNA连接酶D.限制性内切酶、DNA连接酶、解旋酶【解析】使氢键断裂的是解旋酶;限制性内切酶将相邻两个核苷酸的磷酸二酯键断开;连接DNA片段间磷酸二酯键的是DNA连接酶。【答案】

C2.限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示四种质粒和目的基因,其中,箭头所指部位为限制酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是()—————[考向预测练2]—————

【解析】由图可知,质粒B上无标记基因,不适合作为载体;质粒C和D的标记基因上都有限制酶的识别位点;只有质粒A上既有标记基因,且MunⅠ的切割位点不在标记基因上。【答案】

A考点二基因工程的操作程序一、目的基因的获取途径1.从基因文库中获取:包括基因组文库和cDNA文库等。2.人工合成目的基因的常用方法(1)化学合成法:已知核苷酸序列的较小基因,直接利用DNA合成仪用化学方法合成,不需要模板。(2)反转录法:以RNA为模板,在逆转录酶作用下人工合成。3.通过PCR技术扩增目的基因目的:利用DNA复制的原理在体外特异性的复制某DNA片段以获得大量的目的基因。二、基因表达载体的构建1.基因表达载体的组成:启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。2.基因表达载体的构建方法:三、将目的基因导入受体细胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射技术感受态细胞法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入到Ti质粒的T­DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子四、目的基因的检测与鉴定3.(2014·滨州一模)转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞):—————[考向预测练2]—————

(1)图中①过程用到的酶是______________,所形成的B叫做______________________,B是由________、________、目的基因和标记基因等部分构成。(2)②过程常用__________________处理农杆菌,使之成为________细胞,利于完成转化过程。(3)图中③过程叫做____________,④过程叫做________,将叶片培养成草莓幼苗的技术是____________。(4)在分子水平上,可采用________________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。【答案】

(1)DNA连接酶基因表达载体(重组质粒)启动子终止子(2)CaCl2溶液(或Ca2+)感受态(3)脱分化(去分化)再分化植物组织培养技术(4)抗原—抗体杂交4.(2014·武汉调研)下图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题:—————[考向预测练2]—————

(1)从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因,需要用到的工具是________,此工具主要是从________生物中分离纯化出来的,它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的________键断开。(2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有__________,它能把目的基因整合到受体细胞________上。(3)E过程是利用______________技术完成的,要确定抗虫基因导入棉花细胞后,是否赋予了棉花抗虫特性,在个体水平上还需要做______________实验。(4)将目的基因导入植物细胞,除采用上图中的方法外,还可采用________法和花粉管通道法。【答案】

(1)限制酶原核磷酸二酯(2)T­DNA染色体DNA(3)植物组织培养抗虫的接种(4)基因枪考点三蛋白质工程及与基因工程的关系项目蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需蛋白质定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品结果生产自然界没有的蛋白质一般是生产自然界已有的蛋白质联系蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程;对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因修饰或基因合成实现5.现代生物技术并不是各自独立的,而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图,请分析回答:—————[考向预测练1]—————

6.(2014·青岛一模)胰岛素可以用于治疗糖尿病,但是胰岛素被注射入人体后,会堆积在皮下,要经过较长的时间才能进入血液,而进入血液的胰岛素又容易分解,因此治疗效果受到影响。如下图是用蛋白质工程设计的速效胰岛素的生产过程,请据图回答有关问题:—————[考向预测练2]—————

(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是______________________。(2)为了用蛋白质工程设计速效胰岛素,在已知速效胰岛素氨基酸序列的基础上,推测出的速效胰岛素的________序列,据此可利用________方法合成目的基因。(3)获得速效胰岛素的基因还可用________、________方法。(4)处理大肠杆菌细胞,使之处于一种能吸收环境中DNA的生理状态,该状态细胞称作____________,目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为________。(5)若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中,最常用的方法是______________。【答案】

(1)蛋白质的预期功能(2)基因化学(3)基因文库PCR(4)感受态细胞转化(5)农杆菌转化法1.(2013·广东高考)从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是()A.合成编码目的肽的DNA片段B.构建含目的肽DNA片段的表达载体C.依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽D.筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽高效训练5道题【解析】紧扣蛋白质工程的流程(基本途径)进行分析。由题可知,多肽P1为抗菌性和溶血性均较强的多肽,要设计出抗菌性强但溶血性弱的多肽,即在P1的基础上设计出自然界原本不存在的蛋白质,用蛋白质工程技术可以实现。蛋白质工程的基本途径是:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。故要想在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是依据P1的氨基酸序列设计出多条模拟肽,然后进行改造,从而确定抗菌性强但溶血性弱的多肽的氨基酸序列。【答案】

C2.(2012·上海高考)如图所示,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E-F区域(0.2kb),那么所形成的重组质粒pZHZ2()A.既能被E也能被F切开B.能被E但不能被F切开C.既不能被E也不能被F切开D.能被F但不能被E切开【解析】用限制酶从基因组DNA上切下目的基因,并取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E-F区域(0.2kb),用DNA连接酶连接后形成重组质粒,则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点,因此形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开。【答案】

A3.(2013·广东六校联考)关于基因工程的叙述,正确的是()A.基因表达载体的构建是核心步骤B.常用的工具酶是限制酶和DNA聚合酶C.基因治疗现已被广泛使用D.常用显微注射法将目的基因导入大肠杆菌【解析】基因工程常用的工具酶是限制酶和DNA连接酶。基因治疗目前处于初期的临床试验阶段。将目的基因导入微生物的方法是Ca2+处理法。【答案】

A4.(2014·淄博一模)研究人员最近开发出一种新的生产工艺,利用基因工程生产转基因烟草从而获得抗艾滋病病毒药物。请根据所学知识回答下列问题:(1)构建重组质粒时,需要使用的工具酶是______________________。将重组质粒导入烟草细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和______________。(2)在转基因烟草培育过程中,其受体细胞如果采用愈伤组织细胞,与采用叶肉细胞相比较,其优点是____________,该过程采用的技术是________________。(3)如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术,该技术中使用的基因探针也可以用来检测____________________,还可以从________水平进行鉴定。(4)科学家将植物细胞培养到________,包上人工种皮,制成神奇的人工种子,以便快速大面积推广。【答案】

(1)限制酶(限制性核酸内切酶)和DNA连接酶花粉管通道法(2)全能性高植物组织培养技术(3)DNA分子杂交目的基因是否转录出mRNA个体(4)胚状体5.(2013·新课标全国卷Ⅰ)阅读如下资料:资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。资料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。资料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。回答下列问题:(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用________法。构建基因表达载体常用的工具酶是________和________。在培育有些转基因植物时,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是_____________________。(2)资料乙中的技术属于________工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对________进行改造,或制造一种________的技术。在该实例中,引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的________序列发生了改变。(3)资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到________种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中,兔甲称为______体,兔乙称为______体。【答案】

(1)显微注射限制性内切酶DNA连接酶农杆菌可感染植物,将目的基因转移到受体细胞中(2)蛋白质现有的蛋白质新蛋白质氨基酸(3)同供受谢谢观看/欢迎下载BYFAITHIMEANAVISIONOFGOODONECHERISHESANDTHEENTHUSIASMTHATPUSHESONETOSEEKITSFULFILLMENTREGARDLESSOFOBSTACLES.BYFAITHIBYFAITH一本万利工程1、背景驱动2、盈利策略3、选菜试菜4、价值创造5、完美呈现6、成功面试7、持续改造(一)、一本万利工程的背景驱动

1、什么是一本万利

2、餐饮时代的变迁菜单经验的指导方针运营市场定位的体现经营水平的体现体现餐厅的特色与水准沟通的工具餐厅对顾客的承诺菜单承诺的六大表现1、名字的承诺2、质量的承诺3、价格的承诺4、规格标准的承诺5、外文翻译的准确6、保证供应的承诺

1、顾客满意度餐厅价值、价格、合理感、愉快感、安心感、美味感、便利感、满足感、有价值感、喜悦感、特别感2-2、初期投资餐厅面积、保证金、设备投资、店铺装潢、器具用品投资、制服选定、菜单制作2-1、开业准备厨具、供应商选定、设计、用品选定、餐厅配置、员工训练、餐厅气氛、促销方式3、经营数据营业额、客流量、成本率、人均消费、顾客回头率、出品速度、人事费用菜单内容决定决定相关相关决定决定决定决定以菜单为导向的硬件投资

1、餐厅的装修风格2、硬件设施服务操作3、餐厅动线4、餐具与家俬5、厨房布局6、厨房设备菜单设计正果1、能诱导顾客购买你想让他买的餐点2、能迅速传达餐厅要表达的东西3、双赢:顾客喜欢、餐厅好卖餐厅时代的变迁食物时代硬体时代软体时代心体时代食物食品饥食饱食品质挑食品味品食品德惧食体验人们正在追寻更多的感受,更多的意义更多的体验,更多的幸福(二)盈利策略1、组建工程团队2、确定核心价值3、确定盈利目标4、确定客单价5、设计盈利策略6、确定核心产品谁来设计菜单?产品=做得出来的物品商品=卖得出去的物品商家=产品具备商品附加值物(什么产品)+事(满足顾客何种需求)从物到事从食物到餐饮从吃什么到为什么吃产品本身决定一本,产品附加值决定万利从生理到心理从物质到精神从概念到五觉体验创造产品的五觉附加值体验何来

一家企业以服务为舞台以商品为道具,让消费者完全投入的时候,体验就出现了PART01物=你的企业卖什么产品+事=能满足顾客何种需求?确定核心价值理念核心价值理念1、卖什么样的菜2、卖什么样的氛围?3、如何接待顾客?卖给谁?卖什么事?卖什么价?企业目标的设定1、理论导向的目标设定2、预算3、制定利润目标费用营业额亏损区利润区临界点变动费用总费用营业额曲线费用线X型损益图利润导向的目标设定确定目标设定营业收入=固定成本+目标利润1-变动成本率-营业税率例:A餐厅每月固定成本40万,变动成本50%,营业税率5.5%,目标利率每月8万,问A餐厅的月营业收入:月营收入=(40+8)÷(1-50%-5.5%)=48÷0.445=108万测算损益平衡点保本线=固定成本1-变动成本率-营业税率例:A餐厅保本线=40÷(1-50%-5.5%)

=40÷0.445

=90万定价的三重意义2、向竞争对手发出的信息和信号1、是利润最大化和最重要的决定因素3、价格本事是价值的体现定价由此开始1、评估产品、服务的质量2、寻求顾客价值与平衡点3、以价值定义市场确定客单价盈利占比策略

占比策略内部策略销售占比占比策略内部策略10%40%10%20%20%(三)、选菜试菜1、ABC产品分析2、产品的确定(食材、口味、烹调、餐饮)3、成本的确定ABC分析策略毛利率营业额CBACABBACCCAA营业额C毛利A优化、提升增加销售双A双赢ABC顾客商品涨价保留亏本商品删营业额A毛利C顾客超额、成本过高有意义的保留无意义的删除双C双输菜单内容选择的标准因素成本设备厨师技术操作空间菜系风格吻合度品质可控度原料供应顾客喜好菜单协议度(销售目标、颜色、口味、造型、营养等)产品类别确定的四个方面1、按食材确定比例2、按口味确定比例3、按烹饪确定比例4、按餐饮确定比例

(无酒精饮品、含酒精饮品比例)框架依据操作依据目标依据成本依据试口味成本操作第一次试菜的内容精确的成本核算—五个关键词1、净料率(一料一控、一料多档)2、调味料成本(单件产品、批量产品)3、燃料成本4、统一计量单位5、标准食谱成本卡试口味餐具造型色彩第二次试菜的内容四料构成表1、符合思想审定2、符合目标审定3、符合定位审定4、符合框架审定四平构成表(四)、创造价值1、定价策略的确定2、提升双A核心产品的附加值3、增加更多的顾客选择性顾客会记住的价格最低价人均消费热门畅销品商品较多的价格带最高价产品价格和观念价值永远是不一样的,体验经济时代出售的不是产品价格,而是观念定价与确定价格的区别确定价格产品、服务主导思路确定一个易于销售的价格由企业根据成本以及和其他企业的比较确定定价基于顾客的价值私立评估价值、确定等级在顾客和企业的来往过程中确定企业定价三大策略1、薄利多销策略2、相对稳定价格策略3、高价位价格策略提升产品附加值的“十大绝招”三好七增名字好卖相故事服务选择文案时间体验健康推广感觉“附加值”提升产品附加值的“两大前提”一好味道二品质确定好卖相美色器形设摄状增健康少油汤汁盐多有机养生品种增时间原材料生长原材料获得制作耗时美味时间要求增文案—文字叙述九问1、餐点是什么?2、如何烹调制作?3、如何呈现?4、有何故事?5、有否独特的口味?6、有否体现品质等级?7、食材的来源?8、有何独特的体验?9、对人有何好处?一料多烹多吃多味增选择增推广易拉宝台卡小画册传媒宣传销售人员介绍POP(五)、完美呈现1、专业团队的选择与合作2核心价值的呈现平面制片摄影助理摄影师食品造型翻译修图师文案设计师跟印完稿员餐饮行业中照片的功能的三个层次传递信息吸引顾客传播文化

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