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文档简介

/实验一观察DNA、RNA在细胞中的分布〔必修一P26一.实验目的:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法二.实验原理:1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同.甲基绿使DNA呈现绿色.吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色.可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。2.盐酸能够改变细胞膜的通透性.加速染色剂进入细胞.同时使染色休中的DNA和蛋白质分离.有利于DNA与染色剂结合。三.方法步骤:操作步骤注意问题解释取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净.滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染.漱口避免取材失败固定装片〔细胞已死亡水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中.用300C水浴保温5min改变细胞膜的通透性.加速染色剂进入细胞.促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸染色滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min

两种溶液混合.现配现用观察先低倍镜观察.选择染色均匀、色泽浅的区域.移至视野中央.调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质〔必修一P18一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物.产生特定的颜色反应。1.可溶性还原糖〔如葡萄糖、果糖、麦芽糖与斐林试剂发生作用.可生成砖红色的Cu2O沉淀。如:加热葡萄糖+Cu<OH>2葡萄糖酸+Cu2O↓〔砖红色+H2O.即Cu<OH>2被还原成Cu2O.葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色〔或被苏丹Ⅳ染液染成红色。淀粉遇碘变蓝色。3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用.产生紫色反应。〔蛋白质分子中含有很多肽键.在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用.产生紫色反应。三.实验材料1.做可溶性还原性糖鉴定实验.应选含糖高.颜色为白色的植物组织.如苹果、梨。〔因为组织的颜色较浅.易于观察。2.做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子.以花生种子为最好.实验前一般要浸泡3~4小时〔也可用蓖麻种子。3.做蛋白质的鉴定实验.可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、实验试剂斐林试剂〔包括甲液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂〔包括A液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液、体积分数为50%的酒精溶液.碘液、蒸馏水。五、方法步骤:〔一可溶性糖的鉴定操作方法注意问题解释1.制备组织样液。〔去皮、切块、研磨、过滤苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高.组织液很易被氧化成褐色.将产生的颜色掩盖。2.取1支试管.向试管内注入2mL组织样液。

3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂.振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存.使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;

切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定.甲、乙液混合保存时.生成的Cu<OH>2在70~900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应.无Cu<OH>2生成。4.试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中.加热约2分钟.观察到溶液颜色:浅蓝色→棕色最好用试管夹夹住试管上部.使试管底部不触及烧杯底部.试管口不朝向实验者。防止试管内的溶液冲出试管.造成烫伤;

模拟尿糖的检测1、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、检测方法:斐林试剂〔水浴加热或班氏试剂或尿糖试纸3、结果:〔用斐林试剂检测试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液.未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。4、分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖.与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀.而正常人尿液中无还原糖.所以没有发生反应。〔二脂肪的鉴定操作方法注意问题解释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片.将薄片放在载玻片的水滴中.用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡3~4小时.新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短.不易切片.浸泡时间过长.组织较软.切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些.便于观察。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液.染色1分钟。染色时间不宜过长。

用吸水纸吸去薄片周围染液.用50%酒精洗去浮色.吸去酒精。

酒精用于洗去浮色.不洗去浮色.会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时.酒精是脂溶性溶剂.可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精.滴上1~2滴蒸馏水.盖上盖玻片。

滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处.可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长.油滴会溶解在乙醇中。三、蛋白质的鉴定操作方法注意问题解释制备组织样液。〔浸泡、去皮研磨、过滤。

黄豆浸泡1至2天.容易研磨成浆.也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约2ml于试管中.加入双缩脲试剂A.摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴.摇匀.溶液变紫色。A液和B液也要分开配制.储存。鉴定时先加A液后加B液。

CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液.为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入.会导致Cu2+变成Cu<OH>2沉淀.而失效。否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够.在实验中蛋清粘在试管壁.与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上.使反应不容易彻底.并且试管也不易洗干净。附:淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液.向试管内滴加2滴碘液.观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察考点提示:〔1常见还原性糖与非还原性糖有哪些?〔2还原性糖植物组织取材条件?〔3研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?〔4斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用?〔5还原性糖中加入斐林试剂后.溶液颜色变化的顺序为:〔6花生种子切片为何要薄?〔7转动细准焦螺旋时.若花生切片的细胞总有一部分清晰.另一部分模糊.其原因一般是什么?〔8脂肪鉴定中乙醇作用?〔9双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?〔1葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。〔2含糖量较高、颜色为白色或近于白色.如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。〔3加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少.使鉴定时溶液颜色变化不明显。〔4混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。〔5浅蓝色棕色砖红色〔6只有很薄的切片.才能透光.而用于显微镜的观察。〔7切片的厚薄不均匀。〔8洗去浮色。〔9不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体〔必修一P47一.实验目的:使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。二.实验原理:叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的.呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据:线粒体的形态多样.有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料.可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。三.实验材料:观察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄而小.叶绿体清楚.可取整个小叶直接制片.所以作为实验的首选材料。若用菠菜叶作实验材料.要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。四.方法步骤:步骤注意问题分析1.制片。用镊子取一片黑藻的小叶.放入载玻片的水滴中.盖上盖玻片。制片和镜检时.临时装片中的叶片不能放干了.要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩.将影响对叶绿体形态和分布的观察。2.低倍镜下找到叶片细胞

3.高倍镜下观察叶绿体的形态和分布

4.制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液→用牙签取碎屑→盖盖玻片

5.观察线粒体蓝绿色的是线粒体.细胞质接近无色。

讨论:1、细胞质基质中的叶绿体.是不是静止不动的?为什么?答:不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动.这种运动能随时改变椭球体的方向.使叶绿体既能接受较多光照.又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布.与叶绿体的功能有什么关系?答:叶绿体的形态和分布都有利于接受光照.完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多.这可以接受更多的光照。实验六观察植物细胞的质壁分离和复原〔必修一P61"探究"一、实验目的:1.学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。2.了解植物细胞发生渗透作用的原理。二.实验原理:1.质壁分离的原理:当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时.细胞就会通过渗透作用而失水.细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中.使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大.当细胞不断失水时.原生质层就会与细胞壁分离。2.质壁分离复原的原理:当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时.细胞就会通过渗透作用而吸水.外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中.整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态.紧贴细胞壁.使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。二、实验材料:紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色.易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。三、实验步骤:步骤注意问题分析1.制作洋葱表皮的临时装片。在载玻片上滴一滴水.撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平〔也可挑取几条水绵放入水滴中。盖上盖玻片。

盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片.然后轻轻放平。

防止装片产生气泡。2.观察洋葱〔或水绵细胞可看到:液泡大.呈紫色.原生质层紧贴着细胞壁。〔或水绵细胞中有带状叶绿体.原生质层呈绿色.紧贴着细胞壁。

液泡含花青素.所以液泡呈紫色。

先观察正常细胞与后面的"质壁分离"起对照作用。3.观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液.在另一侧用吸水纸吸引.重复几次。镜检。观察到:液泡由大变小.颜色由浅变深.原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。

重复几次糖液浓度不能过高蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度.细胞通过渗透作用失水.细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大.液泡和原生质层不断收缩.所以发生质壁分离。为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。否则.细胞严重失水死亡.看不到质壁分离的复原。4.观察细胞质壁分离的复原现象。从盖玻片的一侧滴入清水.在另一侧用吸水纸吸引.重复几次。镜检。观察到:液泡由小变大.颜色由深变浅.原生质层恢复原状。

发生质壁分离的装片.不能久置.要马上滴加清水.使其复原。重复几次。细胞液的浓度高于外界溶液.细胞通过渗透作用吸水.所以发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久.也会死亡。

为了使细胞完全浸入清水中。实验讨论答案:1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中.这些表皮细胞会出现什么现象?答:表皮细胞维持原状.因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时.红细胞会不会发生质壁分离?为什么?答:不会。因为红细胞不具细胞壁。考点提示:〔1洋葱为何要选紫色的?若紫色过淡怎么办?〔2洋葱表皮应撕还是削?为何?〔3植物细胞为何会出现质壁分离?〔4质壁分离时.液泡大小和颜色的变化?复原时呢?〔5若发生质壁分离后的细胞.不能发生质壁分离复原.其原因是什么?〔6高倍镜使用前.装片如何移动?〔7换高倍物镜后.怎样使物像清晰?视野明暗度会怎样变化?如何调亮?〔8所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系?〔9物像清晰后.物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系?〔10总放大倍数的计算方法?放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数?〔11放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系?〔12更换目镜.若异物消失.则异物在目镜上;更换物镜.若异物消失.则异物在物镜上、移动载玻片.若异物移动.则异物在载玻片上。〔13怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度?〔1紫色的洋葱有紫色的大液泡.便于观察液泡的大小变化;缩小光圈.使视野变暗些。〔2表皮应撕不能削.因为削的表皮往往太厚。〔3当细胞失去水分时.其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性;动物细胞不会发生质壁分离.因为动物细胞没有细胞壁。〔4细胞发生质壁分离时.液泡变小.紫色加深;当细胞质壁分离复原时.液泡变大.紫色变浅。〔5细胞已经死亡〔可能是外界溶液浓度过大.细胞失水过多或质壁分离时间过长〔6若要把视野中上方的物像移到视野的正中心.则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心.则要将装片继续向左方移动.因为显微镜视野中看到的是倒像。〔7换高倍物镜后.应调节细准焦螺旋使物像变得清晰;视野会变暗.可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。〔8目镜越长.放大倍数越小;物镜越长.放大倍数越大。〔9物镜与载玻片之间的距离越小.放大倍数越大。〔10总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积;放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。〔11放大倍数越大.视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。〔12更换目镜.若异物消失.则异物在目镜上;更换物镜.若异物消失.则异物在物镜上、移动载玻片.若异物移动.则异物在载玻片上。〔13①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。实验七探究影响酶活性的因素〔必修一P78、P83一.实验目的:1.探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。2.培养实验设计能力。二.方法步骤:提出问题→作出假设→设计实验→〔包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格→实施实验→分析与结论→表达与交流。实例1:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率一.实验原理:鲜肝提取液中含有过氧化氢酶.过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算.质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比.每滴FeCl3溶液中的Fe3+数.大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。二方法步骤:步骤注意问题解释取4支洁净试管.编号.分别加入2mLH2O2溶液不让H2O2接触皮肤H2O2有一定的腐蚀性将2号试管放在900C左右的水浴中加热.观察气泡冒出情况.与1号对照

向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液.观察气泡产生情况不可用同一支滴管

肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏要制成研磨液由于酶具有高效性.若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶.会影响实验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质.放置过久.可受细菌作用而分解.使肝脏组织中酶分子数减少.活性降低研磨可破坏肝细胞结构.使细胞内的酶释放出来.增加酶与底物的接触面积2-3min后.将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方.观察复燃情况放卫生香时.动作要快.不要插到气泡中现象:4号试管产生气泡多.冒泡时间短.卫生香猛烈复燃.3号试管产生气泡少.冒泡时间长.卫生香几乎无变化避免卫生香因潮湿而熄灭注意问题:①实验时必须用新鲜的、刚从活的动物体中取出的肝脏作实验材料。肝脏如果不新鲜.肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解.使组织中酶分子的数量减少且活性降低。②实验中使用肝脏的研磨液.可以加大肝细胞内过氧化氢酶与试管中过氧化氢的接触面积.从而加速过氧化氢的分解。考点提示:〔1为何要选新鲜的肝脏?〔2该实验中所用试管应选较粗的还是较细的?为什么?〔3为何要选动物的肝脏组织来做实验.其他动植物的组织的研磨液能替代吗?〔4相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液.哪一个催化效果好?为什么?〔5滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时.可否共用下个吸管?为什么?〔1因为在不新鲜的肝脏中.过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。〔2应选用较粗的.因为在较细的试管中容易形成大量的气泡.而影响卫生香的复燃。〔3因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富;其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶.所以能够替代。〔4研磨液效果好;因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。〔5不可共用.防止过氧化氢酶与氯化铁混合.而影响实验效果。酶的专一性〔1方案一:用同一种酶催化两种不同物质淀粉酶淀粉〔非还原糖麦芽糖〔还原糖淀粉酶淀粉酶①淀粉酶蔗糖〔非还原糖蔗糖②用淀粉酶分别作用于淀粉和蔗糖后.再用斐林试剂鉴定.根据是否有砖红色沉淀生成来判断淀粉酶对二者是否有催化作用.从而探索酶的专一性。淀粉酶〔2方案二:用两种不同酶催化同一种物质淀粉酶淀粉〔非还原糖麦芽糖〔还原糖淀粉酶①淀粉酶淀粉〔非还原糖淀粉②再用斐林试剂鉴定.从而探究酶的专一性。疑难点拔:这三个实验为探索类实验。①探索酶的高效性时.应合理设计对照实验.严格控制实验变量。②探索酶的专一性时.设计实验首先要从已知入手.确定何为实验变量〔自变量.何为因变量.何为控制变量。淀粉、蒸糖水解的产物.水解的速率等为变化的结果.即因变量.从因变量入手我们将推知自变量〔实验变量即淀粉酶对其的影响程度或它们之间的关系。淀粉、蔗糖在实验过程中的浓度、用量.淀粉酶的浓度、用量。水解过程的温度等都为控制变量.需遵循同时等量原则.以排除控制变量对2个水解反应的影响。③探索温度对酶活性的影响时.通过研究某一因素.如温度〔实验变量对某一特定反应的影响时.要在其他因素〔控制变量相同的条件下进行。观察不同的实验变量〔如不同的温度对特定反应的影响结果〔因变量.以便对实验结果〔实验变量与因变量关系进行科学的分析。实例2:温度对酶活性的影响一实验目的:1.初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2.探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。二实验原理:1.淀粉遇碘后.形成紫蓝色的复合物。2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖〔淀粉水解过程中.不同阶段的中间产物遇碘后.会呈现红褐色或红棕色。麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售a-淀粉酶的最适温度约600C三方法步骤:操作注意问题解释取3支试管.编上号.然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液

另取3支试管.编上号.然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液

将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组.分别放入热水〔约600C、沸水和冰块中.维持各自的温度5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时.由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化.反应温度不是操作者所要控制的温度.影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中.摇匀后.维持各自的温度5min保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液.摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察用表格的形式显示实验步骤序号加入试剂或处理方法试管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL///新鲜淀粉酶溶液///1mL1mL1mL2保温5min6010006010003将a液加入到A试管.b液加入到B试管.c液加入到C试管中.摇匀

4保温5min601000

5滴入碘液.摇匀2滴2滴2滴

6观察现象并记录

实例3:PH值对酶活性的影响操作步骤:用表格开式显示实验步骤:〔注意操作顺序不能错序号加入试剂或处理方法试管1231注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸馏水1mL//3注入氢氧化钠溶液/1mL/4注入盐酸//1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保温5min

7加入斐林试剂.边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min

9观察3支试管中溶液颜色变化变记录

实验八叶绿体色素的提取和分离〔必修一P97一.实验目的:1.尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。2.分析实验结果.探究叶绿体中有几种色素.以及各自所呈现的颜色。二.实验原理:1.叶绿体中的色素是有机物.不溶于水.易溶于丙酮等有机溶剂中.所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2.层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同.分子量小的溶解度高.随层析液在滤纸上扩散得快.溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。三、实验材料:幼嫩、鲜绿的菠菜叶四、实验步骤:步骤注意问题分析1.提取色素5克绿叶剪碎.放入研钵.加SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇.迅速、充分研磨。〔若没有无水乙醇.也可用体积分数为95%的乙醇.但要加入适量的无水碳酸钠.加SiO2加CaCO3

加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。因为叶绿素含镁.可被细胞液中的有机酸产生的氢代替.形成去镁叶绿素.CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸.防止叶绿体被破坏。叶绿体色素易溶于无水乙醇等有机溶剂。2.收集滤液漏斗基部放一单层尼龙布.研磨倒入漏斗内挤压.将滤液收集到小试管中.用棉花塞塞住试管口。

尼龙布起过滤作用。试管口用棉花塞塞紧是为了防止无水乙醇挥发。3.制备滤纸条将干燥的滤纸.顺着纸纹剪成长6cm.宽1cm的纸条.一端剪去二个角.并在距这一端1cm处划一铅笔线。

干燥顺着纸纹剪成长条一端剪去二个角

可吸收更多的滤液。层析时.色素分离效果好。可使层析液同时到达滤液细线。4.划滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液.沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线.干后重复三次。

滤液细线越细、越齐越好。重复三次。

防止色素带之间部分重叠。

增加色素在滤纸上的附着量.实验结果更明显。5.纸层析法分离色素将3mL层析液倒入烧杯中.将滤纸条〔划线一端朝下插入层析液中.用培养皿盖盖上烧杯。

层析液不能没及滤纸条。烧杯要盖培养皿盖。

防止色素溶解在层析液中.

层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发。6.观察实验结果由上至下分别为:胡萝卜素〔橙黄色叶黄素〔黄色叶绿素a〔蓝绿色叶绿素b〔黄绿色扩散最快是胡萝卜素.扩散最慢是叶绿素b.含量最多的是叶绿素a。四种色素之所以能被分离.是因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。溶解度越高扩散速度越快.五:实验讨论:1.滤纸条上的滤液细线.为什么不能触及层析液?答:滤纸条上的滤液细线如触及层析液.滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中.实验就会失败。2.提取和分离叶绿体色素的关键是什么?答:提取叶绿体色素的关键是:①叶片要新鲜、浓绿;②研磨要迅速、充分;③滤液收集后.要疑难点拔:四条色素带的分布与色素扩散速度有关.而扩散速度大小由分子量大小所决定.这四种色素的分子量分别是:胡萝卜素〔C40H56536、叶黄素〔C40H56O2568、叶绿素a〔C55H72O5N4Mg892、叶绿素b〔C55H70O6N4Mg906.所以色素带从上到下.即扩散从快到慢依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。胡萝卜素与叶黄素分子量相差32.叶绿素a与叶绿素b的分子量相差14.故前二种色素的距离大于后二种色素的距离。色素带的粗细与色素的含量有关。通常叶绿素含量是类胡萝卜素的四倍.叶绿素a的含量是叶绿素b的三倍.叶黄素含量是胡萝卜素的二倍.含量越多.色素带就会越浓越粗.故由浓粗到淡细依次是:叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素。考点提示:〔1对叶片的要求?为何要去掉叶柄和粗的时脉?〔2二氧化硅的作用?不加二氧化硅对实验有何影响?〔3丙酮的作用?它可用什么来替代?用水能替代吗?〔4碳酸钙的作用?不加碳酸钙对实验有何影响?〔5研磨为何要迅速?要充分?过滤时为何用布不用滤纸?〔6滤纸条为何要剪去两角?〔7为何不能用钢笔或圆珠笔画线?〔8滤液细线为何要直?为何要重画几次?〔9滤液细线为何不能触到层析液?〔10滤纸条上色素为何会分离?〔11色素带最宽的是什么色素?〔12滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素?〔13色素带最窄的是第几条色素带?为何?〔1绿色、最好是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素很少。〔2为了使研磨充分。不加二氧化硅.会使滤液和色素带的颜色变浅。〔3溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替.但不能用水来代替.因为色素不溶于水。〔4保护色素.防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。不加碳酸钙.滤液会变成黄绿色或褐色。〔5研磨迅速.是为了防止丙酮大量挥发;只有充分研磨.才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸.但能通过尼龙布。〔6防止两侧层析液扩散过快。〔7因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素.会影响色素的分离结果。〔8防止色素带的重叠;增加色素量.使色素带的颜色更深一些。〔9防止色素溶解到层析液中。〔10由于不同的色素在层析液中的溶解度不同.因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。〔11最宽的色素带是叶绿素a.它的溶解度比叶绿素b大一些。〔12胡萝卜素和叶黄素。〔13第一条色素带.因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。及时用棉塞将试管口塞紧.以免滤液挥发。分离叶绿体色素的关键是:一是滤液细线要细且直.而且要重复划几次;二是层析液不能没及滤液线。实验九探究酵母菌的呼吸方式〔必修一P91一.实验目的:1.了解酵母菌的无氧呼吸和有氧呼吸情况2.学会运用对比实验的方法设计实验二.实验原理:1.酵母菌是一种单细胞真菌.在有氧和无氧的条件下都能生存.属于兼性厌氧菌.因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。方程式〔略2.CO2可使澄清石灰水变混浊.也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短.可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。3.橙色的重铬酸钾溶液.在酸性条件下与乙醇〔酒精发生化学反应.在酸性条件下.变成灰绿色。三.方法步骤:提出问题→作出假设→设计实验→〔包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格→实施实验→分析与结论→表达与交流。1.酵母菌培养液的配制取20g新鲜的食用酵母菌.分成两等份.分别放入锥形瓶A〔500mL和锥形瓶B〔500mL中.再分别向瓶中注入240mL质量分数为5%的葡萄糖溶液2.检测CO2的产生用锥形瓶和其他材料用具组装好实验装置〔看课本图示.并连通橡皮球〔或气泵.让空气间断而持续地依次通过3个锥形瓶〔约50min。然后将实验装置放到25-350C的环境中培养8-10h。3.检测洒精的产生各取2mL酵母菌培养液的滤液.分别注入2支干净的试管中。向试管中分别滴加0.5mL溶有0.1g重铬酸钾的浓硫酸溶液〔体积分数为95%-97%并轻轻振荡.使它们混合均匀.观察试管中溶液的颜色变化。实验十观察细胞的有丝分裂〔必修一P115一.实验目的:1.制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片2.观察植物细胞有丝分裂的过程.识别有丝分裂的不同时期.比较细胞周期不同时期的时间长短。3.绘制植物细胞有丝分裂简图。二.实验原理:1.在高等植物体内.有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的.因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。2.染色体容易被碱性染料〔如龙胆紫溶液着色.通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体〔或染色质的存在状态.就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期.进而认识有丝分裂的完整过程。三.实验材料:洋葱〔可用葱、蒜代替。因为根尖生长点属于分生组织.细胞分裂能力强.易观察到有丝分裂各个时期的细胞。四.实验步骤:步骤注意问题分析一、根尖的培养实验前3~4天.让洋葱放在广口瓶上.底部接触清水。根长约5cm时可用。

置于温暖处.常换水。

因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。二、装片的制作〔解离→漂洗→染色→制片1.解离:上午10时至下午2时.剪取洋葱根尖2~3mm.立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液〔1:1的玻璃皿中.室温下解离3~5min。

解离时间要保证.细胞才能分散开来。

解离时间也不宜过长。

目的:溶解细胞间质.使组织中的细胞相互分离开来。此时.细胞已被盐酸杀死。否则.根尖过于酥软.无法取出。2.漂洗:待根尖酥软后.用镊子取出.放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。漂洗要充分.可换水1~2次。

目的:洗去解离液.便于染色。〔防止过分解离

3.染色:把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。染色时间不宜过长.否则显微镜下一片紫色.无法观察。龙胆紫等为碱性染料.可使染色体着色。醋酸洋红溶液也能使染色体着色4.制片:用镊子将这段洋葱根尖取出来.放在载玻片上.加一滴清水.并用镊子尖把洋葱根尖弄碎.盖上盖玻片.在盖玻片上再加一片载玻片。然后.用拇指轻轻地压载玻片.使细胞分散开来。要弄碎根尖.再垂直向下均匀用力压片.不可移动盖玻片.目的:使细胞分散.避免细胞重叠.便于观察。做得成功的装片.标本被压成云雾状。三、观察1.低倍镜观察:把装片放在低倍镜下.慢慢移动装片.找到分生区细胞。

2.高倍镜观察:移走低倍镜.换上高倍镜.用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰.仔细观察.找出处于细胞分裂期中期的细胞.再找出前期、后期、末期的细胞。

一定要找到分生区。

在一个视野里.往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样.可以慢慢地移动装片.从邻近的分生区细胞中寻找。

分生区细胞特点是:细胞呈正方形.排列紧密.有的细胞正处于分裂期。讨论:制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么?答:制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点:〔1剪取洋葱根尖材料时.应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间;〔2解离时.要将根尖细胞杀死.细胞间质被溶解.使细胞容易分离;〔3压片时.用力的大小要适当.要使根尖被压平.细胞分散开。提醒<1>先漂洗再染色,这两步不能颠倒,否则影响实验效果。<2>漂洗的目的①防止解离过度,根尖过分酥软。②洗去盐酸,防止与碱性染液发生作用,便于染色。<3>使根尖细胞相互分散的方法①解离时,盐酸可破坏细胞壁的果胶层.使组织细胞分离。②制片时用镊子捣碎。③压片。<4>显微镜下观察的都是死细胞,不能看到细胞分裂动态变化,若视野中找不到某一时期的细胞,可通过移动装片从邻近的区域中找。<5>在显微镜下观察到间期细胞数目最多,原因是间期历时最长。考点提示:〔1培养根尖时.为何要经常换水?〔2培养根尖时.应选用老洋葱还是新洋葱?为什么?〔3为何每条根只能用根尖?取根尖的最佳时间是何时?为何?〔4解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一块载玻片?〔5若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的.其原因是什么?〔6解离过程中盐酸的作用是什么?丙酮可代替吗?〔7为何要漂洗?洗去盐酸便于染色。〔8细胞中染色最深的结构是什么?〔9若所观察的细胞各部分全是紫色.其原因是什么?〔10为何要找分生区?分生区的特点是什么?能用高倍物镜找分生区吗?为什么?〔11分生区细胞中.什么时期的细胞最多?为什么?〔12所观察的细胞能从中期变化到后期吗?为什么?〔13观察洋葱表皮细胞能否看到染色体?为什么?〔14若观察时不能看到染色体.其原因是什么?〔1增加水中的氧气.防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。〔2培养根尖时.应选用老洋葱还是新洋葱?为什么?〔3为何每条根只能用根尖?取根尖的最佳时间是何时?为何?〔4解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一块载玻片?〔5压片时用力过大。〔6分解和溶解细胞间质;不能.而硝酸可代替。〔7洗去盐酸便于染色。〔8染色最深的结构是染色质或染色体。〔9染液浓度过大或染色时间过长。〔10因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂;分生区的特点是:细胞呈正方形.排列紧密.有的细胞处于分裂状态;不能用高倍镜找分生区.因为高倍镜所观察的实际范围很小.难以发现分生区。〔11间期;因为在细胞周期中.间期时间最长。〔12不能.因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。〔13不能.因为洋葱表皮细胞一般不分裂。〔14没有找到分生区细胞;没有找到处于分裂期的细胞;染液过稀;染色时间过短。实验十一模拟探究细胞表面积与体积的关系〔必修一P110一.实验目的:通过探究细胞大小.即细胞的表面积与体积.与物质运输效率之间的关系.探讨细胞不能无限长大的原因。二.实验原理:用琼脂块模拟细胞。琼脂块越小.其表面积越大.则其与外界效换物质的表面积越大.经交换进来的物质在琼脂块中扩散的速度快;琼脂块中含有酚酞.与NaOH相遇.呈紫红色.可显示物质〔NaOH在琼脂块中的扩散速度。三.操作步骤:操作方法注意问题解释用塑料餐刀将含酚酞的琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体

将3块琼脂块放在烧杯内.加入NaOH溶液.将琼脂块淹没.浸泡10min。用塑料勺不时翻动琼脂块。不要用勺子将琼脂块切开或挖动其表面避免干扰实验结果戴上手套.用塑料勺将琼脂块从NaOH溶液中取出。用纸巾把它们吸干.用塑料刀把琼脂块切成两半。仔细观察切面的颜色变化.变成红色的部分代表NaOH扩散的深度.测量每一块上NaOH扩散后着色的浓度。记录测量结果应避免NaOH与皮肤和眼睛等接触。如泼洒出来.应立即用水冲洗泼洒处。每两次操作之间必须把刀擦干NaOH有腐蚀性

避免干扰实验结果根据测量结果进行计算.并将结果填在记录表中

结论:琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小;NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比随着琼脂块的增大而减小。四.课后讨论题答案:1.当NaOH与含酚酞的琼脂块相遇时.其中的酚酞变成紫红色.这是常用的检测NaOH的方法.从琼脂块的颜色变化就知道NaOH扩散到多远;在相同时间内.NaOH在每一琼脂块内扩散的深度基本相同.说明NaOH在每一琼脂块内扩散的速率是相同的。2.根据球体的体积公式V=4/3πr3.表面积公式S=4πr2.计算结果如下表。细胞直径

〔μm表面积

〔μm2体积

〔μm3比值〔表面积/体积20125641870.30302826141300.203.细胞越大.物质运输的效率越低.所以多细胞生物体是由许多细胞而不是由少数体积更大的细胞构成的。细胞越大.需要与外界环境交流的物质越多;但是细胞体积越大.其表面积相对越小.细胞与周围环境之间物质交流的面积相对小了.所以物质运输的效率越低。实验十二观察细胞的减数分裂〔必修二P21一.实验目的:通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片.识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目.加深对减数分裂过程的理解。二.实验原理:蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞.再形成精子。此过程要经过两次连续的细胞分裂:减数第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中.细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化.因而可据此识别减数分裂的各个时期。三.方法步骤:〔一个精母细胞经两次有丝分裂形成四个精母细胞再经减数分裂形成十六个精子细胞A.精巢管顶端

B.减数第一次分裂

C.减数第二次分裂

D.精子细胞

E.精子四.课后讨论题:1.减数第一次分裂会出现同源染色体联会、四分体形成、同源染色体在赤道板位置成对排列、同源染色体分离、移向细胞两极的染色体分别由两条染色单体组成〔着丝点不分裂、非同源染色体自由组合等现象。减数第二次分裂的中期.非同源染色体成单排列在细胞赤道板位置.移向细胞两极的染色体不含染色单体〔着丝点分裂2.减数第一次分裂的中期.两条同源染色体分别排列在细胞赤道板的两侧.末期在细胞两极的染色体由该细胞一整套非同源染色体组成.其数目是体细胞染色体数的一半.每条染色体均由两条染色单体构成。减数第二次分裂的中期.所有染色体的着丝点排列在细胞的赤道板的位置。末期细胞两极的染色体不含染色单体。3.同一生物的细胞.所含遗传物质相同;增殖的过程相同;不同细胞可能处于细胞周期的不同阶段。因此.可以通过观察多个精原细胞的减数裂.推测出一精原细胞减数分裂过中色体的连续变化。实验十三低温诱导染色体加倍〔必修二P88一.实验目的:1.学习低温诱导植物染色体数目变化的方法2.理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制二.实验原理:1.进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞.在有丝分裂后期.染色体的着丝点分裂.子染色体在纺缍丝的作用下分别移向两极.最终被平均分配到两个子细胞中去。2.用低温处理植物组织细胞.使纺缍体的形成受到抑制.以致影响染色体被拉向两极.细胞也不能分裂成两个子细胞.于是.植物细胞染色体数目发生变化。三.方法步骤:四.课后讨论题答案:两者都是通过抑制分裂细胞内纺锤体的形成〔前期.使染色体不能移向细胞两极.而引起细胞内染色体数目加倍。实验十四调查常见的人类遗传病〔必修二P91一.实验目的:1.初步学会调查和统计人类遗传病的方法2.通过对几种人类遗传病的调查.了解这几种遗传病的发病情况3.通过实际调查.培养接触社会.并从社会中直接获取资料或数据的能力二.实验原理:显性遗传病具有世代相传的特点.隐性遗传病隔代出现。伴X染色体隐性遗传病的遗传特点是交叉遗传.隔代出现.患者男性多于女性。伴X染色体显性遗传病的遗传特点是世代相传.患者女性多于男性。三.方法步骤:可以以小组为单位开展调查工作。其程序是:组织问题调查小组→确定课题→分头调查研究→撰写调查报告→汇报交流调查结果〔如右流程图注意事项:1.调查时.最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病.如红绿色盲、白化病、高度近视〔600度以上等2.为保证调查的群体足够大.小组调查的数据.应在班级和年级中进行汇总3.4.人类常见的遗传病类型概括实验十五探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用〔必修三P51一.实验目的:1.了解植物生长调节剂的作用2.进一步培养进行实验设计的能力二.实验原理:植物插条经植物生长调节剂处理后.对植物插条的生根情况有很大的影响.而且用不同浓度、不同时间处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度.在此浓度下植物插条的生根数量最多.生长最快。三.方法步骤:1.选择生长素类似物:2.4-D或α-萘乙酸〔NAA等。2.配制生长素类似物母液:5mg/mL〔用蒸馏水配制.加少许无水乙醇以促进溶解。3.设置生长素类似物的浓度梯度:用容量瓶将母液分别配成0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、3、4、5mg/mL的溶液.分别放入小磨口瓶.及时贴上相应标签。NAA有毒.配制时最好戴手套和口罩。4.剩余的母液应放在4℃保存.如果瓶底部长有绿色毛状物.则不能继续使用。5.选择插条:以1年生苗木为最好〔1年或2年生枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活实验表明.插条部位以种条中部剪取的插穗为最好.基部较差.梢部插穗仍可利用。实验室用插穗长5~7cm.直径1~1.5cm为宜。6.处理插条:枝条的形态学上端为平面.下端要削成斜面.这样在扦插后可增加吸收塔水分的面积.促进成活。每一枝条留3-4个芽.所选枝条的芽数尽量一样多。处理方法:1浸泡法:把插条的基部浸泡在配制好的溶液中.深约3cm.处理几小时至一天。〔要求的溶液浓度较低.并且最好是在遮阴和空气湿度较高的地方进行处理2沾蘸法:把插条基部在浓度较高的药液中蘸一下〔约5s.深约1.5cm即可。7.探究活动:提出问题→作出假设→设计实验→〔包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格→实施实验→分析与结论→表达与交流。注1:可先设计一组梯度比较大的预实验进行摸索.再在预实验的基础上设计细致的实验。2.实验材料:可以用杨、加拿大杨、月季等的枝条。3.实验用具:天平、量筒、容量瓶、烧杯、滴管、试剂瓶、玻璃棒、木箱或塑料筐〔下方带流水孔、盛水托盘、矿泉水瓶。实验十六不同浓度的生长素类似物促进杨插条生根的最适浓度实例如下:1.提出问题不同浓度的生长素类似物.如2.4-D或NAA.促进杨插条生根的最适浓度是多少呢?2.作出假设适宜浓度的2.4-D或NAA可以使杨或月季插条基部的薄壁细胞恢复分裂能力.产生愈伤组织.长出大量不定根。3.预测实验结果经过一段时间后〔约3~5d.用适宜浓度的2.4-D或NAA处理过的插条基部和树皮皮孔处〔插条下1/3处出现白色根原体.此后逐渐长出大量不定根;而用较低浓度、较高浓度或清水处理的枝条长出极少量的不定根或不生根。4.实验步骤〔1制作插条。〔2分组处理:将插条分别用不同的方法处理〔药物浓度、浸泡时间等可多组。如可分别在NAA中浸泡1、2、4、8、12、24h等。〔3进行实验:将处理过的插条下端浸在清水中,注意保持温度〔25~30℃〔4小组分工.观察记录:前三天每天都要观察记录各小组实验材料的生根情况。自行设计记录表格.记录用不同浓度生长素类似物处理后枝条生根情况.如生根条数.最长与最短根的长度等。〔浓度适宜的生长素类似物处理后.在绿色树皮的皮孔处长有白色幼根;时间长一些会在枝条下端斜面树皮与木质部之间长有白色根原体。每隔2~3d记录也可。〔5研究实验中出现的问题。①分析不同插条

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