经典免疫学技术演示文稿

经典免疫学技术演示文稿本文档共81页；当前第1页；编辑于星期二\18点35分（优选）经典免疫学技术本文档共81页；当前第2页；编辑于星期二\18点35分第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术本文档共81页；当前第3页；编辑于星期二\18点35分第一节沉淀反应根据抗原与抗体反应的条件及附加因素，沉淀反应可分为两种主要形式：1．溶液中沉淀反应

2．凝胶中沉淀反应本文档共81页；当前第4页；编辑于星期二\18点35分第一节沉淀反应根据抗原与抗体反应的条件及附加因素，沉淀反应可分为两种主要形式：

1．溶液中沉淀反应

2．凝胶中沉淀反应本文档共81页；当前第5页；编辑于星期二\18点35分1．溶液中沉淀反应

（Precipitationreactioninsolution）

是指在清彻透明的液体中，呈溶解状态的抗原与抗体在试管内或凹玻片上混匀，可凝聚成为肉眼可见的絮状或颗粒状的不溶性沉淀物。本文档共81页；当前第6页；编辑于星期二\18点35分溶液中沉淀反应

盐溶液抗原+抗体———沉淀

20~56℃、pH6～8

抗原：沉淀原抗体：沉淀素本文档共81页；当前第7页；编辑于星期二\18点35分1．溶液中沉淀反应

（Precipitationreactioninsolution）

（1）环状沉淀试验（2）免疫比浊法（3）免疫沉淀技术本文档共81页；当前第8页；编辑于星期二\18点35分（1）环状沉淀试验

环状沉淀试验

（ringprecipitationtest）或毛细管内沉淀反应 （precipitationin capillarytube）本文档共81页；当前第9页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第10页；编辑于星期二\18点35分（2）免疫比浊法(immunonephelomytry）

可溶性的抗原、抗体在液相中特异结合，形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液出现浑浊。复合物的量与浊度成正比。与标准品比较即可计算出样品中的抗原或抗体含量。本文档共81页；当前第11页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第12页；编辑于星期二\18点35分免疫沉淀技术本文档共81页；当前第13页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第14页；编辑于星期二\18点35分免疫共沉淀本文档共81页；当前第15页；编辑于星期二\18点35分GSTpull-down技术

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2．凝胶中沉淀反应本文档共81页；当前第17页；编辑于星期二\18点35分2．凝胶中沉淀反应（Precipitationreactioningel）

1968年Ouchterlong发明的。即将抗原抗体溶液放在琼脂凝胶板上的小孔中，使它们彼此对向扩散，在抗原抗体相遇的地方形成沉淀线。本文档共81页；当前第18页；编辑于星期二\18点35分2．凝胶中沉淀反应

此沉淀线的突出性质是：特异性抗原抗体不能通过；与沉淀线无关的抗原和抗体分子则可自由通过此沉淀线。本文档共81页；当前第19页；编辑于星期二\18点35分2．凝胶中沉淀反应（1）单相免疫扩散试验（2）双相免疫扩散试验（3）免疫电泳（4）火箭电泳试验（5）免疫印迹技术本文档共81页；当前第20页；编辑于星期二\18点35分单相免疫扩散试验本文档共81页；当前第21页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第22页；编辑于星期二\18点35分双相免疫扩散试验本文档共81页；当前第23页；编辑于星期二\18点35分（3）免疫电泳（immunoelectrophoresis）本文档共81页；当前第24页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第25页；编辑于星期二\18点35分（4）火箭电泳试验本文档共81页；当前第26页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第27页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第28页；编辑于星期二\18点35分又称Westernblotting电泳印渍及检测（5）免疫印渍技术（immunoblotting）本文档共81页；当前第29页；编辑于星期二\18点35分免疫印渍本文档共81页；当前第30页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第31页；编辑于星期二\18点35分第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术本文档共81页；当前第32页；编辑于星期二\18点35分第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

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本文档共81页；当前第34页；编辑于星期二\18点35分1．直接凝集反应

（directagglutination）

是将细菌或红细胞与其相应抗体结合产生的细菌凝集或红细胞凝集现象。本文档共81页；当前第35页；编辑于星期二\18点35分1．直接凝集反应（1）微生物凝集反应 如诊断伤寒病的肥达氏（Widalreaction）反应（2）同种红细胞凝集反应如检查血型的血细胞凝集现象本文档共81页；当前第36页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第37页；编辑于星期二\18点35分第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

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（indirectagglutination）

用可溶性抗原（或抗体）包被在一种与免疫无关的、具一定大小的不溶性颗粒（即载体颗粒，如：乳胶颗粒或红细胞）的表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在有适宜电解质存在的条件下，结合产生的凝集现象。本文档共81页；当前第39页；编辑于星期二\18点35分2．间接凝集反应正向间接凝集反应：将抗原先吸附在载体表面，然后与相应抗体结合产生的凝集反应。反向间接凝集反应：将特异性抗体先吸附在载体表面，然后与相应抗原结合产生的凝集反应。既可检测抗原，也可检测抗体；方法简便、敏感。本文档共81页；当前第40页；编辑于星期二\18点35分正向间接凝集反应本文档共81页；当前第41页；编辑于星期二\18点35分

此方法对检测微量抗原具有较高的敏感性。而且由于相关病原体的抗原成分一般情况下比血清抗体出现早，所以可用于某些传染病如钩端螺旋体抗原和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)或原发性肝癌AFP的检测等。反向间接凝集反应本文档共81页；当前第42页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第43页；编辑于星期二\18点35分第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

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又称Coombs抗球蛋白试验。此试验用于检测不完全抗体。本文档共81页；当前第45页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第46页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第47页；编辑于星期二\18点35分第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

本文档共81页；当前第48页；编辑于星期二\18点35分4．共同凝集反应

又称协同凝集反应。指由两种颗粒成分相互作用而发生的凝集反应。本文档共81页；当前第49页；编辑于星期二\18点35分4．共同凝集反应（1）细菌抗体与携带蛋白A的金黄色葡萄球菌CowanⅠ系致敏，即通过其IgG的Fc段与蛋白A结合，再与相应细菌发生凝集反应。（2）玫瑰花结试验：主要用于研究各种淋巴细胞特性。本文档共81页；当前第50页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第51页；编辑于星期二\18点35分E花环形成示意图本文档共81页；当前第52页；编辑于星期二\18点35分

B细胞EA、EAC玫瑰花环形成示意图

本文档共81页；当前第53页；编辑于星期二\18点35分淋巴细胞的分离本文档共81页；当前第54页；编辑于星期二\18点35分玫瑰花结本文档共81页；当前第55页；编辑于星期二\18点35分淋巴细胞与红细胞形成

玫瑰花结的主要模式玫瑰花结的类型红细胞的类型及处理淋巴细胞类型E花结绵羊红细胞T、50%NKEA花结抗体致敏的红细胞B、T、NK、粒细胞、单核细胞及巨噬细胞EAC花结补体致敏的红细胞B本文档共81页；当前第56页；编辑于星期二\18点35分第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术本文档共81页；当前第57页；编辑于星期二\18点35分

第三节

补体参与的抗原抗体反应

1．补体参与直接的抗原抗体反应2．补体参与间接的抗原抗体反应本文档共81页；当前第58页；编辑于星期二\18点35分

第三节

补体参与的抗原抗体反应

1．补体参与直接的抗原抗体反应2．补体参与间接的抗原抗体反应本文档共81页；当前第59页；编辑于星期二\18点35分1．补体参与直接的

抗原抗体反应

（1）溶血反应（2）溶菌反应本文档共81页；当前第60页；编辑于星期二\18点35分（1）溶血反应

（hemolyticassay）

溶血反应常作为是否存在游离补体的指示系统。本文档共81页；当前第61页；编辑于星期二\18点35分（1）溶血反应1942年Rutstein和Walker根据补体能使兔抗羊红细胞抗体致敏的羊红细胞发生溶血的特点，建立了测定血清中总补体活性的方法（即50%溶血反应CH50

测定方法）本文档共81页；当前第62页；编辑于星期二\18点35分（2）溶菌反应

溶菌反应常作为某血清中是否存在相应抗体的检测方法。本文档共81页；当前第63页；编辑于星期二\18点35分

第三节

补体参与的抗原抗体反应

1．补体参与直接的抗原抗体反应2．补体参与间接的抗原抗体反应本文档共81页；当前第64页；编辑于星期二\18点35分2．补体参与间接的

抗原抗体反应

（1）补体结合试验（2）被动红细胞溶解试验（3）溶血空斑试验本文档共81页；当前第65页；编辑于星期二\18点35分（1）补体结合试验（complementfixationtest）

1901年由Bordet和Gengou首先应用溶血反应作为指示系统，建立的检测抗原抗体反应的方法。本文档共81页；当前第66页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第67页；编辑于星期二\18点35分补体结合试验原理本文档共81页；当前第68页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第69页；编辑于星期二\18点35分（2）被动红细胞溶解试验

即吸附抗原的红细胞在有相应抗体和补体存在时，出现红细胞溶解反应。抗原致敏红细胞——加入待测血清和补体——判断结果（阳性对照：加入相应抗体和补体）

本文档共81页；当前第70页；编辑于星期二\18点35分（3）溶血空斑试验

是测定B淋巴细胞产生和分泌抗体功能的一种体外试验方法。本文档共81页；当前第71页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第72页；编辑于星期二\18点35分本文档共81页；当前第73页；编辑于星期二\18点35分溶血空斑试验本文档共81页；当前第74页；编辑于星期二\18点35分第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术本文档共81页；当前第75页；编辑于星期二\18点35分第四节中和反应中和反应（neutralization）：是免疫学和病毒学中常用于检测中和抗体是否存在及其效价的试验，反映抗体中和病毒感染性或细菌毒素的生物学效应。本文档共81页；当前第76页；编辑于星期二\18点35分

中和抗体：病原微