病原微生物室sop标准操作程序文件

临床微生物室

标准操作程序

SOP

编制人：XXX

审核人：XXX

批准人：XXX

修订版号：2022-4

生效日期：2022-4-25

临床微生物室标准操作程序(SOP)目录

1.标本采集与送检原则标准操作程序-LC-SOP-GC-1

2.血液及骨髓标本的采集标准操作程序-LC-SOP-GC-2

3.呼吸道标本留取标准操作程序・LC-SOP-GC-3

4.尿液标本留取标准操作程序-LC-S0P-GC-4

5.脓及创伤感染标本留取标准操作程序*LC-SOP-GC-5

6.生殖道分泌物标本采集标准操作程序-LC-SOP-GC-6

7.粪便标本采集标准操作程序-LC-SOP-GC-7

8.穿刺液标本留取标准操作程序-LC-S0P-GC-8

9.脑脊液、胆汁标本采集标准操作程序LC-S0P-GC-9

10.组织标本的采集标准操作程序-LC-S0P-GC-10

11.静脉道管标本采集标准操作程序-LC-SOP-GC-11

12.眼、耳及乳突分泌物标本采集标准操作程序LC-S0P-GC-12

13.样本接收、核对、接种、培养标准操作程序LC-SOP-GC-13

14.菌株的纯化、鉴定、药敏流程标准操作程序LC-S0P-GC-14

15.普通MicroScan板接种培养流程标准操作程序LC-S0P-GC-15

16.判读普通革兰阳性板标准操作程序-LC-S0P-GC-16

17.判读普通革兰阴性板标准操作程序«LC-SOP-GC-17

18.普通Microscan板报告标准操作程序-LC-S0P-GC-18

19.常见标本培养结果解释标准操作程序-LC-S0P-GC-19

20.KB法药敏试验标准操作程序-LC-SOP-GC-20

21.超广谱P-内酰胺酶(ESBLs)检测标准操作程序LC-SOP-GC-21

22.B-内酰胺酶检测标准操作程序-LC-SOP-GC-22

23.革兰染色标准操作程序«LC-S0P-GC-23

24.抗酸染色标准操作程序-LC-S0P-GC-24

25.解胭/人型支原体培养标准操作程序-LC-SOP-GC-25

26.AccuStep衣原体抗原检测标准操作程序-LC-SOP-GC-26

27.ATBFUNGUS2真菌药敏标准操作程序-LC-SOP-GC-27

28.培养基的制备标准操作程序-LC-S0P-GC-28

29.触酶试验标准操作程序«LC-S0P-GC-29

30.氧化酶试验标准操作程序-LC-SOP-GC-30

31.芽管试验标准操作程序"LC-SOP-GC-31

32.临床微生物实验室安全标准操作程序-LC-S0P-GC-32

编号：LC-SOP-GCT

XX医院标本采集与送检原则日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

正确采集和处理标本是实验室取得正确结果的前提，必须予以重视。但对标本采

集的方法和时间，标本的来源，实验室常不能加以控制，实验室人员有责任通过

各种方式，指导医师和护士正确采集标本。特制定以下原则，以便统一标准执行。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【基本原则】

1.送检报告单应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验

目的、抗生素使用情况，使实验室正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。

2.尽量在抗生素使用前采集标本。

3.在采集血液、脑脊液、穿刺液等标本时，应严格无菌操作，避免杂菌污染。

4.标本采集后应立即送到实验室，床边接种可提高病原菌的检出率。

5.以拭子采集的标本如咽拭子、伤口拭子或肛拭子等，最好采用运送培养基送

检，应采用吸水性好、不宜干燥的材料取样。

6.混有正常菌群的标本，如痰、尿、伤口拭子、不可置肉汤培养基送检。

7.盛标本容器需经灭菌处理，但不得使用消毒剂。

编号：LC-S0P-GC-2

XX医院血液及骨髓标本的采集日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导血液及骨髓标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.一般采血部位为肘静脉，疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为

宜。切忌在静脉滴注药物处（或一手滴药，另一手采血）采集血标本；

2.选择体温上升时才血可提高阳性率。对正在使用抗菌药物而又不能停药的患

者，应在下次投入抗菌药物前采集标本。

3.采集部位先以70%酒精擦拭。再用棉签沾取2%碘酊涂于欲作穿刺处，让其干

后再用70%酒精擦拭。

4.全部手续再作一此（如必要）。

5.采血量以培养液体积的1/10为宜，成人每次采血5T0ml,婴幼儿每次采血

l-5ml;

6.骨髓采集:严格消毒后抽取骨髓0.5Tml

7.血液或骨髓抽出后过火，立即注入双相血培养瓶，马上充分混匀后，及时送

检。

8.每列至少采血两次，间隔时间据病情而定，以利于提高阳性率和区别感染菌

和皮肤污染菌。

编号：LC-S0P-GC-3

XX医院呼吸道标本留取日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导呼吸道标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.痰液标本的采集以清晨为好，因此时痰量多，含菌量大。标本收集前，病人

必须用清水漱口数次，除去口腔内大部分杂菌。然后用力自气管深部咳出痰

液于无菌器皿内，及时送检。咳痰时应尽量防止唾液及鼻咽部的分泌物混入,

以减少污染。

2.痰量极少者可用45℃10%氯化钠雾化吸入导痰，一般以清晨第一口痰为好

3.检查结核菌时，必要时可收集24小时痰液，以提高阳性率。

4.支气管分泌物内含的细菌常能正确地反映出下呼吸道中的病理变化，标本的

采集应由专科医生利用支气管镜直接从患者支气管内采取。

5.咽拭采集:嘱病人在留取标本之前，用清水反复漱口以减少正常菌群的污染,

将拭子越过舌根到咽后壁或悬壅垂后侧，反复涂抹数次，注意避免拭子接触

口腔和舌拈膜,置无菌容器中尽快送检。

编号：LC-S0P-GC-4

XX医院尿液标本留取日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导尿液标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.正常人尿液是无菌的，而尿液细菌培养最大的问题是杂菌污染。正常人外尿

道有大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病源菌。

因此要作好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集问题。

2.中段尿采集：是临床上最常用的方法。女病人先用肥皂水或0.1%高铳酸钾水

溶液冲洗外阴部及尿道口，用无菌纱布擦拭,最后用手指将阴唇分开排尿；男

病人应翻转包皮冲洗，用肥皂水或2%红汞或0.1%新洁尔灭消毒尿道口，再

用无菌纱布或干棉球拭干，叫病人排尿。将尿液分成三段，第一段排掉，收

集中段尿3〜5ml留入试管中，立即加塞盖好送检。

3.婴儿则先消毒其阴部，将无菌小瓶直接对准尿道以胶布粘上固定于皮肤，待

排尿后立即送检。

4.导尿管采集尿液：一般用无菌导尿管取得尿液10〜15ml,盛3~5ml于无菌试

管中，不能混入消毒剂，否则影响细菌生长。虽该可减少污染，但由于导尿

有将微生物引入膀胱的危险，因此除非必要，应避免用此法。

5.对于留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用无菌注射器斜穿管

壁抽吸尿液，或消毒后解开接口，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内

尿液送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。

6.做结核菌培养的尿液标本，应收集24小时全部尿液，并将沉淀部分盛于洁

净瓶内送检。

7.婴幼儿中段尿采集困难或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集

无污染的膀胱内尿液。

8.送检标本以晨尿为佳，但室温较高时，应采集即时尿液，但尿液在膀胱内至

少置留了4小时以上。

编号：LC-SOP-GC-5

XX医院脓及创伤感染标本留取日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导脓及创伤感染标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.应首先用无菌生理盐水清洗脓液及病灶的杂菌，再采集标本，以免影响检验

结果。

2.一般用棉拭子采取脓液及病灶的深部的分泌物，矮管也可以无菌手续采取组

织放入无菌试管内送检。

3.脓肿标本以无菌注射器抽取为好，也可在切开排脓时，以无菌棉拭子采取，

也可以将沾有脓汁的最内层敷料放人无菌平皿中送检。

4.厌氧菌感染的脓液常有腐臭应予注意。采集和运送标本是否合格，对厌氧培

养是否成功至关重要，特别要注意两点：1.避免正常菌群所污染；2.由采集

至接种前尽量避免接触空气。标本采取完毕应立即送往细菌室检测。如一时

来不及送，应在室温内作暂短保存，一般认为不要冷藏，因冷藏对某些细菌

有害，而且在低温时氧的溶解度较高。

编号：LC-S0P-GC-6

XX医院生残道分泌物标本采集日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导生殖道分泌物标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.尿道及尿道口标本:生理盐水清洗局部后，将无菌棉拭子插入尿道口1-2cm,

停留10余秒,轻轻旋转采集标本,置无菌容器中尽快送检；

2.外阴糜烂、溃疡标本：用无菌盐水和手术刀清除溃疡面，暴露出溃疡基底，渗

出物积聚较明显时，用拭子或吸管采集，置无菌容器中尽快送检；

3.宫颈标本：用无菌盐水湿润窥阴镜暴露宫颈，清除阴道和宫颈分必物，弃之,

轻压宫颈使分必物流出用拭子采集，或用拭子插入宫颈管1—2cm,转动并停

10—30s再取出，置无菌容器中尽快送检；

4.阴道标本：先清除阴道表面的分泌物，弃之，然后在后穹窿或阴道上端采集

粘膜分泌物。

5.前列腺液:有医生通过前列腺按摩获取,置无菌容器中尽快送检。

6.用于除去宫颈外粘液的拭子不宜作微生物培养，因其含有大量的阴道菌群。

编号：LC-SOP-GC-7

XX医院粪便标本采集日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导粪便标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.粪便标本采集时应挑取有脓血、粘液部分的粪便2—3g；液状粪便取絮状物

盛于灭菌的广口瓶中或腊状纸盒中，并及时送检和接种。

2.在无法获得粪便时，可用无菌生理盐水或增菌液湿润直肠，将棉拭子插入肛

门4〜5cm深处（小儿2〜3cm）,轻轻转动一周擦取直肠表面的粘液后取出，

盛入无菌试管或保存液中送检。

编号：LC-S0P-GC-8

XX医院穿刺液标本留取日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导穿刺液（胸、腹水、心包液、关节液）标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.各种穿刺液标本的留取应由临床医生以无菌穿刺术抽取，胸腹水抽取量一般

约为5一10ml,心包液、关节液等一般抽取量为1〜5ml,将所得穿刺液盛

于含有无菌的试管中，立即送检。

2.对易自凝的标本可用已添加抗凝剂的无菌试管，充分混匀，立即送检。

3.也可将5Tom1的穿刺液无菌操作注射到双相血培养瓶中送检。

编号：LC-S0P-GC-9

XX医院脑脊液、胆汁标本采集日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导脑脊液、胆汁标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

脑脊液、胆汁标本的采集方法应由医生亲自严格无菌操作，留在无菌试管内，注

意保温，以防细菌死亡并立即送细菌室培养。

编号：LC-SOP_GC_10

XX医院组织标本的采集日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导组织标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术

切除。对窦道和痰管应刮取深部管壁组织。

2.深部组织标本可经皮穿刺或手术切除。标本置无菌容器并加少量生理盐水以

保湿度；或置肉汤增菌液，或置血平皿送检。

3.尸体标本应予死后20小时内采取，以防肠道菌侵入引起污染。

4.作病原体分离的组织标本不可用福尔马林固定。疑有污染的组织块可用烧红

的烙铁烧灼其表面，或置沸水中5-10秒钟使其表面变白消除污染后，再用

无菌器械切开组织，取中间部位组织送检。

编号：LC-SOP_GC_11

XX医院狰脉道管标本采集日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导静脉道管标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.从病人体内拔出静脉插管，用无菌技术剪去导管体外部分，体内段导管立即

置血平皿上作滚动涂布接种。不能作床边接种者，将导管置含少量生理盐水

的无菌试管内送检。

2.也可将剪下的导管体内段置肉汤内增菌，但不能区分导管感染菌与少量定植

菌。

3.有些标本的微生物学检验在诊断感染或指导治疗上无多大价值，如Foley导

管的尖端、恶露、呕吐物、结肠造口术的渗出物等，一般不进行培养。

4.口腔及牙周损伤处、褥疮及静脉曲张处、烧伤、浅层坏死及肛周脓肿等部位

标本，应先彻底清疮后在取组织送检。

5.冲洗用的道管、静脉导管及动脉导管应在进入部位的皮肤消毒后，小心取出，

以无菌方法切区去皮肤外的短部，其余部分送检。

编号：LC-SOP_GC_12

XX医院眼耳及乳突分泌物标本采集日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

指导眼、耳及乳突分泌物标本的正确采集。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.以无菌棉拭子采集眼分泌物、尤其是脓性分泌物及耳部脓汁置无菌试管中及

时送检；

2.乳突炎患者标本在手术时采集。

编号：LC-SOP-GC-13

XX医院样本接收、核对、接种、培养日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

标本的质量是检验结果准确性与有效性的基础，为使标本从病人到实验室这一过

程受控，保证准确可靠的检验结果，特制定本程序。

【适用人员】

临床微生物实验室检验人员

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.接收样本：

核对各样本号与申请单联号是否一致，如不一致马上与病房联系以便作出

相应的处理，如退单或重送样本等，并做好联系情况的记录。核查各送检样本

是否符合要求。

1）痰液样本：先看外观、再直接涂片镜检，低倍镜下见白细胞＞10个/LP,上

皮细胞＜25个/每个视野，为合格痰液。

2）无菌体液样本：检查各种无菌体液样本的盛放器皿是否符合要求。

3）容易干燥的样本：对一些容易干燥的样本如大便、咽拭子、脓液拭子、泌尿

生殖道拭子等是否已经干燥。

对不符合要求的样本必需与临床联系，以便作出相应处理，方法如联号

不符的样本。做好记录。对符合的样本进行接种，并注明日期。

2.样本接种：

1）大便致病菌、三线，分区划线接种于麦康凯平板；

2）血液、骨髓按要求采集直接注射于法国梅里埃双相血培养瓶送检；

3）支原体培养+药敏，按支原体操作规程接种于支原体专用培养基；

4）衣原体检测，按衣原体操作规程操作；

5）其它标本（痰液、咽拭子、脑脊液、各种无菌体液、脓液分泌物）分别接种血

平皿、麦康凯平板，分三区划线接种；

对脓液、脑脊液等在接种的同时应对其沉渣进行革兰染色，如有细菌立刻通

知临床，并做记录。

4样本培养：

移种过的血平板、麦康凯平板、血液增菌培养瓶及支原体培养条板均置于

35.0℃的培养箱（HH.B1L420型）。

编号：LC-S0P-GC-14

XX医院菌株的纯化、鉴定、药敏流程日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共1页

【目的】

明确菌株纯化、鉴定、药敏流程，指导检测人员正确进行菌株的纯化、鉴定、药

敏操作。

【适用人员】

临床微生物实验室检验人员

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1.查对昨天移种平板申请单，确定标本移种是否正确。

2.观察血液增菌培养瓶，如发现有细菌生长，马上涂片革兰染色，将细菌的染

色特性及形态报告给临床，并做好记录，同时将阳性的血液增菌瓶移种到血

平板与麦康凯平板上，且用无菌棉签沾取该阳性增菌液涂于MH培养基，依

革兰染色，按NSSLS贴药敏纸片，培养18-24小时（临时报告）。

3.观察平板，挑取可疑菌落涂片革兰染色，并将菌落纯化于血平板；

4.将前一天分纯的细菌严格按照美国德灵MicroScan细菌分析系统操作手册配

制菌悬液、加样、置培养箱。

5.对一些不适合用仪器检测药敏的细菌，改用标准的K-B法进行检测。碰到

异常的耐药模式应要慎重，需重复试验或送上一级单位确认后方可发出报

告，如碰到耐万古霉素的葡萄球菌、粪肠球菌，耐泰能的大肠埃希菌、克

雷伯菌属、肠杆菌属等。并加做特殊的药敏纸片，并改用纸片法加以比较。

6.真菌用ATBFUNGUS2真菌药敏条进行耐药性检测，严格按操作规程操作。

7.大便培养，对可疑菌用抗血清做凝集试验，阳性的再做生化鉴定和药敏试验,

需血清凝集试验与生化鉴定相符方可报告，否则要慎重。

编号：LC-S0P-GC-15

XX医院普通MicroScan板接种培养流程日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共2页

【目的】

明确普通G，、GMicroScan板接种培养流程，指导检测人员正确进行普通G'、G

MicroScan板接种培养的操作流程。

【适用人员】

临床微生物实验室检验人员

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】

1、标本按微生物室标准操作程序所推荐的方法进行收集、运送和初步离培养。

2、染色：挑取纯培养细菌进行革兰氏染色

1）革兰氏阴性杆菌、弧菌：进行氧化酶实验，记下实验结果，选用阴性板NC21

2）革兰氏阳性球菌：进行触酶实验，区分链球菌科（-）和微球菌科（+）,记

下实验结果，选用阳性板PC12

3、接种：

①.接种的准备：

a）用取种针去接触纯菌落3、4次，让顶端凹槽填满菌，用CAP帽子抹去

多余菌，放接种水中盖紧，充分混匀，备用。

b）挑选琼脂平板上，形态相同的菌落移种于M-H液体培养基中，置35℃

温箱中孵育4小时，用生理盐水稀释至相当于0.5麦氏浊度标准，或用

接中环挑取菌落，悬浮于生理盐水中振荡混匀后与标准化浊管比浊，调

整浊度至相当于0.5麦氏浊度标准，吸100ul菌悬液于25ml接种水中，

备用；

②.Microscan板的水化与接种：

要用的干板取出室温平衡后，用无菌吸嘴吸取115ul菌悬液于相应的

Microscan板中。

4、加石蜡油：于孔下划有一横线的孔滴加2、3滴石蜡油。

阴性板NC21：7个孔（GLUURELYSH2sARGORNDCB）

阳性板PC12：2个孔（睡ARG）

5、贴封口胶纸：对革兰氏阴性板，氧化酶（+）的板右上角9个孔贴封口胶（空

位为DCB孔）

CITTAROF/G

MALACEOF/B

ONPGCET阚

6、孵育：测试板上盖一块空板，35c非CO?培养箱孵育16-24小时。

7、检查：从培养箱取出板

①检查C孔（控制孔）须澄清；G孔（生长孔）混浊，有菌长。

（如不满足上述条件，则不要判药敏结果）

②革兰氏阳性板：

aPGT孔(+)黄色

b以下9孔，有任意三个以上为(+)黄色

RAFLACTRE

MNSSORARA

RBSINCMAN

★以上两个条件，任意一个符合即可加试剂叛读结果。若以上两个条件均不符合,

则需再孵育15-24小时。药敏MIC结果需在16-24小时内判读。

③革兰氏阴性板：

a葡萄糖发酵菌：1)GLU=深黄色2)SUC=黄色或SOR=黄色

b葡萄糖非发酵菌：1)ARG=紫色和OF/G=黄色3)LYS=紫色

2)ARG=紫色和CET=混浊4)01^=紫色

★符合以上条件之一则可加试剂叛读结果。若不符合，则需再孵育15-24小时。

药敏MIC结果需在16-24小时内判读。

8、加试剂：

革兰氏阴性板：VP-40%K0H(VPl),5%a-蔡酚(NIT2)各一滴。

迎「0.8%对氨基苯磺酸(NIT1),0.5%a-蔡酚(NIT2)各一

滴。(5分钟后判读)。

TDA-10%Fecl3(TDA)一滴。

IND-柯凡奇试剂(IND)3滴。

革兰氏阳性板：VP-40%K0H(VPl),5%a-蔡酚(VP2)各一滴。

NIT-0.8%对氨基苯磺酸(NIT1),0.5%a-蔡酚(NIT2)各一

滴。(5分钟后判读。)

PYR-肽酶试剂(PET)2滴。

★如果VP(-)须等到20分钟后再确定VP是否真为阴性

9、拿掉封口剂。

10＞人工判读，将生化反应和药敏结果记录在相应的Microscan结果记录纸上。

编号：LC-S0P-GC-16

XX医院判读普通革兰阳性板日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共2页

【目的】

指导检测人员正确进行普通革兰阳性（G'MicroScan）板的结果判读，保证检验

结果。

【适用人员】

临床微生物实验室检验人员

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【普通G*MicroScan板阳性对照色卡】

VP1、VP2各一滴20分钟

A

＞微球菌编码

1

4CVNOVBEPGTLACNaCLPBSBAC

2MSPGROPTIS3URETRESORINUPRV

1NITIDXPHOARGMANMNSARARAFHEM

二链球菌编码

NITI、NIT2”一滴5分钟PEP二滴2分钟

【步骤】

一、35℃非也培养箱孵育16-24小舟后，C孔（控制孔）须1清;G孔（生长

孔）混浊，有菌长，并符合以下条件之一则可加试剂判读结果:

aPGT孔（+）黄色有沉淀

b以下9孔，有任意三个以上为（+）黄色

RAFLACTRE

MNSSORARA

RBSINCMAN

二、以上两个条件均不符，则先判读所有药敏结果。记录鉴定药敏或生长试验

CV、MS、NOV、NaCL、BAC和IDX、PHO、BL实验结果，其它生化反应试验再

孵育15-24小时后判读。

三、普通G'MicroScan板々E化结果判断：

试验孔名称阳性结果阴性结果

CVMSNaCL有生长（混浊）无生长（清）

OPTNOVBAC

PGRPHOPGT黄色（孔中有一点黄色即可）无色

（与NOV作对照）

试验孔名称阳性结果阴性结果

IDX蓝色，灰色沉淀无色或白色沉淀

VP粉红至红色无色至褐色或极淡粉色

试验孔名称阳性结果阴性结果

BE暗棕色至黑色无色至亮棕色

PYR红色或橙红色黄色至橙色

ARG微球菌属橙色，粉红/红色黄色至橙黄色

链球菌属粉红/红色黄色至橙色

URE粉红色（24H）黄色至橙色

RAFLACSORRBSINU黄色橙色至红色

PRVTREARAMNSMAV

BL无色兰色至黑色

NIT粉红至红色无色或淡粉色

HEMB-溶血无B-溶血

LOC仪器识别反应板类型用

四、MIC药敏结果的判读：

1.所有的药敏，CV、MS、NOV、NaCL、OPT和BAC的结果以黑色为背景判读；

2.以最开始出现生长抑制的最低浓度孔记录为MIC；

3.当所有孔均不出现细菌生长，MIC记录为小于等于最低浓度；

4.当所有孔均出现细菌生长,MIC记录为大于最高浓度；

5.当不出现细菌生长的浓度孔出现于细菌生长的浓度孔梯度孔中，譬如，细菌

在1、2、和8ug/ml浓度孔中生长，但在4ug/ml孔中不生长，此孔则称为跳

孔，这个浓度孔结果应被忽略。

五、生化和药敏结果均记录在手工记录纸上：

Microscan阳性复合板PC12结果记录：

病人：床号：记录时间：

鉴定结果：

4CVNOVVPBEPGTLACNaCLPBSBAC

2MSPGROPTPYRURETRESORINUPRV

1NITIDXPHOARGMANMNSARARAFHEM

鉴定值

药敏结果:

T/SRifOxAugTeImp

AmPCfVaECla

CfzCdGmCftCpNxn

FdTFGSTSGMSB-Lac

编号：LC-S0P-GC-17

XX医院判读普通革兰阴性板日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共2页

【目的】

指导检测人员正确进行普通革兰阴性(GMicroScan)板的结果判读，保证检验

结果。

【适用人员】

临床微生物实验室检验人员

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【普通GMicroScan板阳性对照色卡】

葡萄糖发酵菌编码TDA一滴3分钟NITI、NIT2各一滴5分钟

1、_

4GLURAFINOURELYS■■CITCL>4TAROF/GCL>4

2SUCRHAADOARGMALCF>8ACEP>4Fd>64OXI

1SORARAMEL■]ORNONPGOXICETK>4To>4

葡萄糖非发酵菌编码.

_________V1______________________

IND三滴5分钟VP1、VP2各一滴20分钟

【步骤】

一、35℃非CO?培养箱孵育16-24小时后，C孔(控制孔)须澄清；G孔(生长

孔)混浊，有菌长，并符合以下条件之一则可加试剂叛读结果：

1、葡萄糖发酵菌：1)GLU=深黄色2)SUC=黄色或SOR=黄色

2、葡萄糖非发酵菌：1)ARG=紫色和OF/G=黄色3)LYS=紫色

2)ARG=紫色和CET=混浊4)0RN=紫色

二、以上条件均不符，则先判读所有药敏结果。记录鉴定药敏CL4；Cf8、P4、

K4、FD64和CET实验结果，其它生化反应试验再孵育15-24小时后判读。

三、普通GMicroScan板生化结果判断:

试验孔名称阳性结果阴性结果

GLU深黄色橙红色

SUCRAFINOSOR黄色、橙黄色红色

RHAADOARAMEL

URE洋红、粉红色黄、橙黄或淡粉红色

H2S黑色有沉淀没变黑

IND粉红至红色澄清、橙色

LYSORNARG发酵菌紫色至灰色黄色

(DCB为对照孔)非发酵菌紫色无色或灰色

试验孔名称阳性结果阴性结果

TDA暗棕色黄色至橙色

ESC棕色至黑色澄清

VP红色澄清

ONPG浅黄色澄清

CITTARMALACE蓝色至蓝绿色绿色至黄色

OF/G若OF/B为绿色黄色绿色至蓝色

若OF/B为蓝色或蓝绿色黄色至绿色蓝色

NIT红色无色或淡粉色

P4K4CL4Cf8CET有生长（混浊）无生长（清）

LOC仪器识别反应板类型用

四、MIC药敏结果的判读：

6.所有的药敏，CV、MS、NOV、NaCL、OPT和BAC的结果以黑色为背景判读；

7.以最开始出现生长抑制的最低浓度孔记录为MIC；

8.当所有孔均不出现细菌生长，MIC记录为小于等于最低浓度；

9.当所有孔均出现细菌生长,MIC记录为大于最高浓度；

10.当不出现细菌生长的浓度孔出现于细菌生长的浓度孔梯度孔中，譬如，细菌

在1、2、和8ug/ml浓度孔中生长，但在4ug/ml孔中不生长，此孔则称为跳

孔，这个浓度孔结果应被忽略。

五、生化和药敏结果均记录在手工记录纸上：

Microscan阴性复合板NC21结果记录

病人：床号：记录时间：

鉴定结果：

4GLURAFINOURELYSTDACITCL>4TAROF/GCL>4NIT

2sueRHAADOH2SARGESCMALCF>8ACEP>4Fd>64OXI

1SORARAMELINDORNVPONPGOXICETK>4To>4

鉴定值

药敏结果:

A/SAmCfP/TPiAzt

CfzCfxCpCpdCrmCax

CazCftCpeT/SGmTo

ImpAkESBL

编号：LC-S0P_GC-18

XX医院普通Microscan板报告日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共2页

【目的】

明确普通Microscan板报告的操作流程，指导检测人员正确进行普通Microscan

板的细菌查询、英文报告生成与传送、中文报告检索生成与打印。

【适用人员】

临床微生物实验室检验人员

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

［步骤］

一、英文资料输入（测定结果）

1、打开电脑电源，自检通过后，电脑屏幕显示

Fl=Standardbootofbootablepartition

F2=CCIConcurrentDOSMicroscan

按HF23键进入MicroScan英文系统

二、细菌鉴定板判读和细菌查询

1、完成板加试剂判读，记录生化反应和药敏结果；

2、根据生化反应生成6-9位编码；

3、进入仪器第四平台：同时按KCtrl』和进入

革兰氏阴性发酵菌和孤菌（氧化酶阴性）选择KU；

革兰氏阴性非发酵菌和迟缓酵菌（氧化酶阳性）选择K2』；

革兰氏阳性链球菌和肠球菌（触酶阴性）选择D53；

革兰氏阳性葡萄球和微球菌（触酶阳性）选择K163；

根据编码检索，确定细菌名和代码记录。

三、资料输入

1、DMS主菜单输入KU按RENTER1键，选择第一项（DatdEnrtyandEdit）

进入；

第一页输入样本编号（SpecimemNO.）：一般输入8为号码,如：02080101；

样本来源（Source）：如输入K5］为痰液，输入（3』为尿液，（可

按KF31键查看）

按（PageDown］］键进入第二页（按［［PageUp3键返回第一页）

第二页输入菌株号（Iso/ResNO.）：输入H13（同一标本分离的第二

菌株输入K21）

测试板类型（PansType）：输入口》为G板，输入（2》为G板，

菌名代码（Orgabism）：输入第四平台查询得到地菌名代码；

测试日期（TestDate）：输入为当天日期，m为昨天日

期；

增加试验（ExtraTesst）：按要求输入TFGESBLsBL等（+/-/*）；

STSGMS（R/S）

药敏结果（MICs）：输入检测药敏结果；

完成菌株和药敏资料输入后按KF103保存当前页，可继续输入同一病人

分离的另外菌株资料，或按KF6D保存前后两页资料，并进入下一病人资

料输入。完成所有资料输入后同时按KCtrl+FlO》保存退出。

四、英文报告传送

1、确定任务：传送英文报告，进入第二平台：同时按KCtrl3和K2』；

DMS主菜单输入K33按KEnterD键，选择第三项进入；

2、选择报告格式和内容：

Selectedby:输入K3D按HEnter］］键，使用测试日期；

TypeofReport:输入键，选择长报告格式；

Sortedby:输入K1D按KEnter1］键，选择样品编号；

TypeofResult:输入按HEnter］］键，选择所有结果；

输入m或m按kEnter』键，选择是否包括打印过的资料；

输入E23按(Enter1键，选择长报告不包括总结页；

3、检索结果范围：

输入起止样品编号，按HEnterl］键确定；

输入起止测试日期，直接按KEnterll键选择当天结果；

4、查看和打印/传送报告：

输入K2D或H33按KEnterD键，查看选择结果；

输入口』按KEnterD键，确认准备完成后再按HEnterU键打印可传

送；

5、退出：完成后连续按KEsc3+［Enter1三次，返回到主菜单。

6、完成当天工作后，确认第一和第二平台都处于主菜单(MainMenu)下,

输入K1OX按1Enter』退出到C：\DMS\；可以关闭或重启电脑

五、中文报告检索生成和打印

1、完成步骤四报告传送后，重新启动电脑，屏幕出现提示：

Fl=Standardbootofpartition

F2=CCIConcurrentDOSMicroscan

2、按KFl1键进入Windows中文系统；

3、运行微生物中文报告系统，输入病人资料后进行检索，确认结果；

4、无菌报告在中文系统手工输入生成

5、审核后打印报告。

编号：LC-S0P-GC-19

XX医院常见标本培养结果解释日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

第1页，共2页

【目的】

由于微生物标本采集过程中正常菌群及环境微生物的污染(特别是医院感染时的

许多分离菌均是机体正常的菌群)，因而对许多感染标本的培养结果应作综合分

析，而不能笼统将所有培养分离出的细菌均认为是感染的病原菌。特别是医院感

染，由于抗生素的应用等因素导致菌群失调，定植治病菌污染感染部位标本甚为

多见，其给医院感染的病原学诊断带来困难，为提高疾病诊断的正确性，确认感

染病原菌而制定本程序。

【适用人员】

临床微生物实验室检验人员

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员

批准签字：专业主管、科主任。

【血液结果解释】

1.通常血培养分离的细菌或真菌，可认为是血液感染的病原菌。但如为表皮葡

萄球菌、类白喉棒状杆菌等皮肤常居菌，则连续两次培养为同种菌方可确定。

血培养为枯草杆菌则污染可能性大。

2.如为静脉插管病人，血中培养一次阳性，且选用相应敏感抗生素治疗有效时，

也可认为是病原菌。

【尿液结果解释】

1.中断尿分离的革蓝阴性菌浓度＞l()5cFU/ml,革蓝阳性球菌＞l()4cFU/ml可

认为是感染的病原菌，反之污染的可能性大。真菌或肠球菌浓度〉

1000-10000CFU/ml可认为是感染菌。

2.已用抗菌药物或经导尿管采集的尿液，多次尿培养为单一的同种菌，细菌浓

度虽未达到上述界限，也可认为是感染菌。

3.尿培养显示浓度超过上述界限，但有两种以上细菌或真菌时，应考虑污染的

可能。

4.耻骨上穿刺尿标本分离出细菌，不管量是多少均有临床意义。

5.无菌生长的脓性尿表明有肾结核的可能，应建议进行接和结核菌检查。

【痰液结果解释】

1.外观干燥或仅为唾液者属不合格，应要求重留。

2.半定量培养结果的临床意义

各区菌落数目相当于菌落数

级别临床意义

第一区第二区第三区(CFU/ml)

极少量+<10<10'多为污染菌

少量++>10<5105污染可能性大，建议重复培养

中等量+++>10>5<5106感染可能性大，建议重复培养

大量++++>10>5>5210，多为感染病原菌

3.经筛选的痰液(白细胞＞10个/LP,磷状上皮细胞＜25个/LP)连续两次分

离出相同的病原菌。

4.痰液与血液或胸水中分离到相同病原体，有诊断意义。

5.如经纤维支气管镜或人工气道采集的标本分离出浓度为lOkfu/ml的致病菌

或条件致病菌即有意义。

6.呼吸道标本中检到特殊的病原体，如结核杆菌、军团菌即有意义。

【皮肤和软组织结果解释】

感染部位引流物或吸引物培养出病原体，如为皮肤正常菌群（如表皮葡萄球菌或

微球菌），则需为纯培养。

编号：LC-SOP_GC_20

XX医院KB法药敏试验日期：22年4月25日

临床微生物实验室标准操作程序版号：2022-4

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