放射免疫试验详解演示文稿

放射免疫试验详解演示文稿本文档共38页；当前第1页；编辑于星期三\5点31分（优选）放射免疫试验本文档共38页；当前第2页；编辑于星期三\5点31分引言放射免疫试验以放射性核素为特征，通过测定放射性强度评估抗原-抗体反应的强度，从而实现对待测物质的定量（或定性）分析。放射免疫试验将放射性核素的高灵敏性与抗原-抗体间的高特异性结合于一体，具有较高的分析敏感性和分析特异性。本文档共38页；当前第3页；编辑于星期三\5点31分引言放射免疫试验创立了两种重要标记免疫分析模式即竞争性免疫分析（放射免疫分析方法）和非竞争性免疫分析（免疫放射分析方法），同时，也创立了固相吸附分离方法，以及剂量-反应曲线的数学处理模型，为酶免疫试验和发光免疫试验奠定理论和实践基础。本文档共38页；当前第4页；编辑于星期三\5点31分本章目录第一节放射免疫分析方法第二节免疫放射分析方法第三节两种方法比较第四节临床应用第五节关键因素本文档共38页；当前第5页；编辑于星期三\5点31分重点提示放射免疫分析方法（原理）免疫放射分析方法（原理）本文档共38页；当前第6页；编辑于星期三\5点31分第一节放射免疫分析方法本文档共38页；当前第7页；编辑于星期三\5点31分相关知识放射免疫分析方法radioimmunoassay,RIA；首个用于超微量物质定量的标记免疫分析技术；发明人：Yalow

andBerson1959本文档共38页；当前第8页；编辑于星期三\5点31分一、分析原理放射免疫分析方法竞争性免疫分析模式标记抗原和待检抗原同质分析体系中的抗体限量本文档共38页；当前第9页；编辑于星期三\5点31分分析原理图：放射免疫分析方法原理示意图（1）本文档共38页；当前第10页；编辑于星期三\5点31分图：放射免疫分析方法原理示意图（2）本文档共38页；当前第11页；编辑于星期三\5点31分技术（操作）要点抗原抗体反应标本与试剂混合并温浴分离技术分离结合标记物与游离标记物发射性测量数据处理本文档共38页；当前第12页；编辑于星期三\5点31分二、抗原-抗体反应竞争模式平衡法非平衡法温浴条件温度酸碱度基质图：非平衡法本文档共38页；当前第13页；编辑于星期三\5点31分三、分离技术非均相免疫分析结合标记物（Bind，B）游离标记物（Free，F）分离方法聚乙二醇沉淀法双抗体法本文档共38页；当前第14页；编辑于星期三\5点31分分离技术图：聚乙二醇-双抗体法(特异性和低成本）本文档共38页；当前第15页；编辑于星期三\5点31分四、放射性测量和数据处理抗原-抗体（温浴）分离结合标记物放射性测量数据处理本文档共38页；当前第16页；编辑于星期三\5点31分放射性测量放射性核素

125Iγ射线测量仪器采用γ计数器本文档共38页；当前第17页；编辑于星期三\5点31分

图：标准曲线实例：本文档共38页；当前第18页；编辑于星期三\5点31分第二节免疫放射分析方法本文档共38页；当前第19页；编辑于星期三\5点31分相关知识免疫放射分析

immunoradiometricassay，IRMA非竞争性免疫分析发明人：Miles

andHales1968本文档共38页；当前第20页；编辑于星期三\5点31分一、分析原理（1）免疫放射分析单位点法适合测定小分子抗原双位点法适合测定小分子抗原本文档共38页；当前第21页；编辑于星期三\5点31分一、分析原理（2）图：免疫放射分析（单位点法）测定原理示意图本文档共38页；当前第22页；编辑于星期三\5点31分一、分析原理（3）图：免疫放射分析（双位点法）测定原理示意图本文档共38页；当前第23页；编辑于星期三\5点31分一、分析原理（4）双位点法一对互相匹配的抗体捕获抗体（与固相载体连接）检测抗体（标记放射性核素）非竞争性免疫分析模式体系中抗体保持过量本文档共38页；当前第24页；编辑于星期三\5点31分技术要点抗原抗体反应B、F的分离放射性测量数据处理本文档共38页；当前第25页；编辑于星期三\5点31分二、分离技术固相吸附分离法固相材料捕获抗体将结合标记物捕获于固相材料表面，而游离标记物分布于液相中，经洗涤去除液相中的游离标记物。本文档共38页；当前第26页；编辑于星期三\5点31分固相吸附技术本文档共38页；当前第27页；编辑于星期三\5点31分固相吸附技术包被

Coating将捕获抗体吸附于固相材料表面的过程封闭blocking用高溶度蛋白溶液封闭空白结合位点本文档共38页；当前第28页；编辑于星期三\5点31分数据处理（实例）图：标准曲线本文档共38页；当前第29页；编辑于星期三\5点31分第三节两种方法的比较本文档共38页；当前第30页；编辑于星期三\5点31分RIA&IRMA本文档共38页；当前第31页；编辑于星期三\5点31分RIA&IRMA放射免疫分析液相状态的抗原与抗体反应免疫放射分析固相表面与液相状态之间的抗原抗体反应抗体固相化对抗体结构和功能的影响本文档共38页；当前第32页；编辑于星期三\5点31分第四节临床应用本文档共38页；当前第33页；编辑于星期三\5点31分历史地位方法建立

20世纪60年代快速发展

20世纪80年代～90年代本文档共38页；当前第34页；编辑于星期三\5点31分临床应用体内激素水平

病原体抗原或抗体肿瘤标志物药物测定本文档共38页；当前第35页；编辑于星期三\5点31分临床应用现存检测项目反三碘甲状腺原氨酸（分子量651Da）、胃泌素（分子量2098Da）、醛固酮（分子量364Da）、血管紧张素-I（分子量1200Da）和血管紧张素-Ⅱ（分子量1046Da）本文档共38页；当前第36页；编辑于星期三\5点31分第五节关键因素本文档共38页