第六章芳酸及其酯类药物的分析演示文稿

第六章芳酸及其酯类药物的分析演示文稿本文档共132页；当前第1页；编辑于星期二\20点40分优选第六章芳酸及其酯类药物的分析本文档共132页；当前第2页；编辑于星期二\20点40分第一节典型药物分类与理化性质本文档共132页；当前第3页；编辑于星期二\20点40分非甾体抗炎类药物

1.水杨酸类---典型药物6种2.邻氨基苯甲酸类---典型药物：甲芬那酸7

其他类---典型药物：尼美舒利、对乙酰氨基酚阿司匹林，水杨酸，双水杨酯，贝诺酯、二氟尼柳。一、分类3.邻氨基苯乙酸类---典型药物：双氯芬酸钠4.芳基丙酸类---典型药物：布洛芬、酮洛芬、萘普生6.苯并噻嗪甲酸类---典型药物：吡罗昔康、美洛昔康5.吲哚乙酸类---典型药物：吲哚美辛本文档共132页；当前第4页；编辑于星期二\20点40分salycylicacidaspirinsalsalate贝诺酯benorilate二氟尼柳（一）水杨酸类典型药物本文档共132页；当前第5页；编辑于星期二\20点40分（二）邻氨基苯甲酸类甲芬那酸

mefenamicacid本文档共132页；当前第6页；编辑于星期二\20点40分（二）邻氨基苯乙酸类双氯芬酸钠本文档共132页；当前第7页；编辑于星期二\20点40分（四）芳基丙酸类典型药物本文档共132页；当前第8页；编辑于星期二\20点40分布洛芬本文档共132页；当前第9页；编辑于星期二\20点40分酮洛芬本文档共132页；当前第10页；编辑于星期二\20点40分萘普生本文档共132页；当前第11页；编辑于星期二\20点40分（五）吲哚乙酸类典型药物本文档共132页；当前第12页；编辑于星期二\20点40分吲哚美辛本文档共132页；当前第13页；编辑于星期二\20点40分（六）苯并噻嗪甲酸类典型药物本文档共132页；当前第14页；编辑于星期二\20点40分吡罗昔康本文档共132页；当前第15页；编辑于星期二\20点40分美洛昔康本文档共132页；当前第16页；编辑于星期二\20点40分其他非甾体抗炎药尼美舒利本文档共132页；当前第17页；编辑于星期二\20点40分对乙酰氨基酚（扑热息痛）本文档共132页；当前第18页；编辑于星期二\20点40分结构特点共同点：苯环、羧酸本文档共132页；当前第19页；编辑于星期二\20点40分羧基状态：游离:水杨酸、阿司匹林、双水杨酯、二氟尼柳、 甲芬那酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生、吲哚美辛盐/酯:双氯芬酸钠、双水杨酯酰胺:吡罗昔康、美洛昔康本文档共132页；当前第20页；编辑于星期二\20点40分苯环结构特征：邻羟基苯甲酸:水杨酸、

阿司匹林、双水杨酯、二氟尼柳邻胺基苯甲酸:甲芬那酸二苯甲酮:酮洛芬羟基不饱和酮:吡罗昔康、美洛昔康杂环:吲哚美辛、

吡罗昔康、

美洛昔康特殊元素:二氟尼柳（氟）

双氯芬酸钠/吲哚美辛（氯）

吡罗昔康/美洛昔康（硫）本文档共132页；当前第21页；编辑于星期二\20点40分1.性状大部分是固体，具有一定的熔点。2.溶解性大部分不溶于水，易溶于有机溶剂二、主要理化性质物理性质本文档共132页；当前第22页；编辑于星期二\20点40分

1.酸性具游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸化学性质本文档共132页；当前第23页；编辑于星期二\20点40分-X、-NO2、-OH、-COOH等吸电子取代基存在使酸性增强-CH3、-NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱

邻位取代>间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强水杨酸>乙酰水杨酸>苯甲酸化学性质酸性顺序：本文档共132页；当前第24页；编辑于星期二\20点40分pKa=3.492.954.26本文档共132页；当前第25页；编辑于星期二\20点40分水杨酸、阿司匹林、双水杨酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬、甲芬那酸均可用标准氢氧化钠滴定液测定含量。本文档共132页；当前第26页；编辑于星期二\20点40分2.水解性

酯键：阿司匹林、双水杨酯

芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质本文档共132页；当前第27页；编辑于星期二\20点40分酰胺键：吲哚美辛、吡罗昔康、美洛昔康、尼美舒利、对乙酰氨基酚

易水解，利用水解反应鉴别或利用水解产物的理化特性鉴别或含量测定。本文档共132页；当前第28页；编辑于星期二\20点40分3.吸收光谱特征紫外特征光谱:

鉴别、含量均匀度检查、溶出度/释放度测定红外特征光谱

:

鉴别本文档共132页；当前第29页；编辑于星期二\20点40分4.基团或元素特性酚羟基:

对乙酰氨基酚、水杨酸与Fe3+显色——鉴别二苯甲酮:

酮洛芬与苯肼缩合显色——鉴别硫: 美洛昔康热分解后产生的硫化氢， 与醋酸铅生成黑色硫化铅——鉴别本文档共132页；当前第30页；编辑于星期二\20点40分与铁盐的反应重氮化—偶合反应缩合反应水解反应氧化反应紫外吸收光谱法红外吸收光谱法薄层色谱法高效液相色谱法第二节鉴别试验特征元素的反应本文档共132页；当前第31页；编辑于星期二\20点40分一、与铁盐的反应1.具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物

Ar-OH+FeCl3紫堇色铁配位化合物pH=4~6直接：水杨酸、二氟尼柳水杨酸Ch.P.（2010）[鉴别]（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。本文档共132页；当前第32页；编辑于星期二\20点40分

间接：阿司匹林、贝诺酯、双水杨酯阿司匹林Ch.P.（2010）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。阿司匹林水杨酸△2.苯甲酸的碱性水溶液或苯甲酸的中性溶液苯甲酸(钠)+FeCl3赭色↓碱性或中性3.丙磺舒丙磺舒钠盐米黄色↓NaOHpH5.0~6.0FeCl3本文档共132页；当前第33页；编辑于星期二\20点40分紫堇色赭色↓米黄色↓pH5.0~6.0T.S.FeCl3pH4~6中性溶液三氯化铁反应鉴别本文档共132页；当前第34页；编辑于星期二\20点40分二、重氮化—偶合反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物

2.间接：对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚H2O/H+

△芳伯氨基结构HCl

NaNO2

OH-β-萘酚

橙红色沉淀↓本文档共132页；当前第35页；编辑于星期二\20点40分重氮化试剂：HCl+NaNO2偶合试剂：碱性-萘酚本文档共132页；当前第36页；编辑于星期二\20点40分

直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺

间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯

本文档共132页；当前第37页；编辑于星期二\20点40分三、缩合反应酮洛芬具有二苯甲酮结构，

在酸性条件下与二硝基苯肼缩合生成橙色偶氮化合物沉淀本文档共132页；当前第38页；编辑于星期二\20点40分

四、水解反应1.阿司匹林与碳酸钠试液加热水解

白色

醋酸臭气↑阿司匹林Ch.P.（2010）【鉴别】

（2）取本品约0.5g，加碳酸钠试液10ml，煮沸2分钟后，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。本文档共132页；当前第39页；编辑于星期二\20点40分2.双水杨酯双水杨酯+NaOH白色水杨酸沉淀煮沸稀盐酸水杨酸沉淀物溶于醋酸铵试液3.羟苯乙酯羟苯乙酯△乙醇对羟基苯甲酸HgNO3分层汞盐沉淀HNO3硝酸使羟苯乙酯的酚羟基氧化为醌式化合物，上清液显红色本文档共132页；当前第40页；编辑于星期二\20点40分五、氧化反应甲芬那酸Ch.P.（2010）【鉴别】（2）取本品约5mg，加硫酸2ml使溶解，加0.5%重铬酸钾溶液0.05ml，即显深蓝色，随即变为棕绿色。本文档共132页；当前第41页；编辑于星期二\20点40分六、特征元素的反应1．氯元素的鉴别

双氯芬酸钠Ch.P.（2010）【鉴别】（3）取本品约50mg，加碳酸钠0.2g，混匀，炽灼至炭化，放冷，加水5ml，煮沸，滤过，滤液显氯化物鉴别反应（附录III）本文档共132页；当前第42页；编辑于星期二\20点40分2．硫元素的鉴别

美洛昔康Ch.P.（2010）【鉴别】（1）取本品约30mg，置试管中，炽灼，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色。本文档共132页；当前第43页；编辑于星期二\20点40分七、光谱鉴别法（一）紫外-可见分光光度法本文档共132页；当前第44页；编辑于星期二\20点40分1.规定一定浓度药物的最大吸收波长

Ch.P.（2010）萘普生的鉴别：取本品，加甲醇制成每1ml中含30g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在262nm、271nm、317nm与331nm的波长处有最大吸收。本文档共132页；当前第45页；编辑于星期二\20点40分2.规定一定浓度药物的max及其吸光度Ch.P.（2010）甲芬那酸的鉴别：取本品，加1mol/L盐酸溶液-甲醇（1∶99）混合液溶解并稀释制成每1ml中含20g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在279nm与350nm的波长处有最大吸收，其吸光度分别为0.69～0.74与0.56～0.60。本文档共132页；当前第46页；编辑于星期二\20点40分3.规定一定浓度药物的max及在两波长处的吸光度比值

Ch.P.（2010）二氟尼柳的鉴别：取本品，加0.1mol/L的盐酸乙醇溶液溶解并稀释制成每1ml中含20g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在251nm与315nm的波长处有最大吸收，吸光度比值应为4.2～4.6。本文档共132页；当前第47页；编辑于星期二\20点40分4.规定一定浓度药物的max、min及肩峰

Ch.P.（2010）布洛芬的鉴别：取本品，加0.4％氢氧化钠溶液制成每1ml中含0.25mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在265nm与273nm的波长处有最大吸收，在245nm与271nm的波长处有最小吸收，在259nm的波长处有一肩峰。本文档共132页；当前第48页；编辑于星期二\20点40分（二）红外分光光度法（三）荧光分光光度法甲芬那酸Ch.P.（2010）【鉴别】（1）取本品约25mg，加三氯甲烷15ml溶解后，置紫外光灯（254nm）下检视，显强烈绿色荧光。本文档共132页；当前第49页；编辑于星期二\20点40分邻双取代苯γCH

770-730cm-1

υOH3400-2500cm-1(宽)υC=O：1700cm-1（—COOH）υC=O：1770—1720cm-1（酯）：δO-H950-900cm-1本文档共132页；当前第50页；编辑于星期二\20点40分八、色谱鉴别法（一）薄层色谱法（二）高效液相色谱法本文档共132页；当前第51页；编辑于星期二\20点40分Ch.P.（2010）中二氟尼柳胶囊的鉴别：取本品内容物适量（约相当于二氟尼柳50mg），加甲醇5ml，振摇使二氟尼柳溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另称取二氟尼柳对照品适量，用甲醇溶解制成每1ml中约含10mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取上述两种溶液各5l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-二氧六环-冰醋酸（85∶10∶5）为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。本文档共132页；当前第52页；编辑于星期二\20点40分1．鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁练习:本文档共132页；当前第53页；编辑于星期二\20点40分2.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是苯酚乙酰水杨酸C.水杨酸D.醋酸钠

本文档共132页；当前第54页；编辑于星期二\20点40分3.水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是

pH=10.0pH=2.0C.pH=7～8D.pH=4～6

本文档共132页；当前第55页；编辑于星期二\20点40分4.在下列药物中，不能和三氯化铁试液反应的药物是

A二氟尼柳B阿司匹林

C吡罗昔康

D吲哚美辛E对乙酰氨基酚

本文档共132页；当前第56页；编辑于星期二\20点40分阿司匹林中特殊杂质的检查双水杨酯中游离水杨酸的检查二氟尼柳中相关物质的检查萘普生中6-甲氧基-2-萘乙酮等有关物质检查甲芬那酸中特殊杂质的检查第三节特殊杂质检查对乙酰氨基酚中对氨基酚和对氯苯乙酰胺的检查本文档共132页；当前第57页；编辑于星期二\20点40分一、阿司匹林中特殊杂质的检查（一）游离水杨酸

1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）本文档共132页；当前第58页；编辑于星期二\20点40分特殊杂质的由来与方法检查Acetyl

Salicylic

Acid副产物SAASA⊙Aspirin生产工艺一、阿司匹林中特殊杂质的检查本文档共132页；当前第59页；编辑于星期二\20点40分2.检查方法HPLC限量原料：0.1%

阿司匹林片：0.3%阿司匹林肠溶片：1.5%阿司匹林肠溶胶囊：1.0%阿司匹林泡腾片：3.0%阿司匹林栓：3.0%本文档共132页；当前第60页；编辑于星期二\20点40分

取本品约0.1g，精密称定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液适量，振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（临用新制）；取水杨酸对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录ⅤD）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20∶5∶5∶70）为流动相；检测波长为303nm。理论板数按水杨酸峰计算不低于5000，阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。立即精密量取供试品溶液、对照品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与水杨酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。本文档共132页；当前第61页；编辑于星期二\20点40分杂质：乙酰水杨酸酐(ASAN)、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）等。

供试品：约1%的1%冰醋酸甲醇溶液。对照品：供试品稀释200倍的1%冰醋酸甲醇溶液。灵敏度试验液：对照品溶液稀释10倍。

色谱条件：C18柱，流动相A为乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）流动相B为乙腈，按0-60min流动相A100%-20%，流动相B0%-80%梯度洗脱。UV276nm检测。

N：按ASA计，≧5000

；R：ASA与SA应符合要求

进样量：10μl

规定：如有杂质峰，除水杨酸外，其他各杂质峰面积的和不得大于对照品主峰面积（0.5%).供试品溶液色谱图中任何小于灵敏度试验主峰面积可忽略不计。三.有关物质（（HPLC法）：本文档共132页；当前第62页；编辑于星期二\20点40分检查方法分光光度法反应原理利用水杨酸可与三价铁生成有色配位化合物的特性，用硝酸铁溶液显色后，在530nm的波长处测定吸光度，规定供试品溶液的吸光度不得大于水杨酸对照溶液的吸光度

限量

0.5%；二、双水杨酯中游离水杨酸的检查本文档共132页；当前第63页；编辑于星期二\20点40分本文档共132页；当前第64页；编辑于星期二\20点40分三、甲芬那酸中特殊杂质的检查（一）合成工艺（P209）（二）检查

1铜盐

AA法324.8nm，不得超过10ppm。本文档共132页；当前第65页；编辑于星期二\20点40分2有关物质：各国药典都是采用TLC，主要是一些酰胺类和二甲基苯胺，邻-氯苯甲酸。供试品自身对照法。

Ch.P.（2010）:

HPLC--不加校正因子的主成分自身对照法控制“有关物质”

GC---外标法测控制“2，3-二甲基苯胺”

USP(32)

HPLC：色谱纯度

JP(15)

TLC:高低浓度自身对照法

本文档共132页；当前第66页；编辑于星期二\20点40分有关物质Ch.P.（2010）取本品适量，用流动相制成每1ml中含1mg的供试品溶液；精密量取适量，用流动相稀释制成每1ml中含5μg的对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的15%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/5，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积。本文档共132页；当前第67页；编辑于星期二\20点40分2，3-二甲基苯胺

Ch.P.（2010）2，3-二甲基苯胺照气相色谱法（附录VE）测定。取本品适量，精密称定，用二氯甲烷-甲醇（3∶1）溶解并定量稀释制成每1ml中约含25mg的溶液，作为供试品溶液；另取2，3-二甲基苯胺适量，精密称定，用二氯甲烷-甲醇（3∶1）溶解并定量稀释制成每1ml中约含2.5μg的溶液，作为对照品溶液。采用聚乙二醇为固定相的毛细管色谱柱，对照品采用恒温150℃，供试品采用程序升温，初始温度150℃维持至主峰出峰后，以每分钟70℃的升温速率升至220℃，维持20分钟；检测器温度为260℃；气化室温度为250℃。精密量取供试品溶液与对照品溶液各1μl直接进样，记录色谱图。供试品溶液中如有与2，3-二甲基苯胺保留时间一致的色谱峰，其面积不得大于对照品溶液中2，3-二甲基苯胺峰面积（100ppm）。本文档共132页；当前第68页；编辑于星期二\20点40分四、二氟尼柳中的相关物质的检查合成路线及相关物质产生（P209）有关物质：多种苯或联苯类合成中间体及副产物。结构与性质相差较大。Ch.P.（2010）正相TLC和反相HPLC色谱法，以自身对照法（高低浓度对比）检查有关物质A和有关物质B检测方法：见P142USP（29）检查：“色谱纯度”“有机挥发性物质”“残留溶剂”本文档共132页；当前第69页；编辑于星期二\20点40分四、二氟尼柳中有关物质的检查1．有关物质A

取本品，加甲醇溶解并稀释制成每1ml溶液中约含10mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇定量稀释制成每1ml溶液中约含50μg的溶液，作为对照溶液，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-二氧六环-冰醋酸（85∶10∶5）为展开剂，展开，晾干，置紫外光（254nm）灯下检视，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。本文档共132页；当前第70页；编辑于星期二\20点40分2．有关物质B

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-甲醇-乙腈-冰醋酸（55∶23∶30∶2）为流动相，检测波长为254nm，理论板数按二氟尼柳峰计算不得低于2000。精密量取有关物质A项下的对照溶液5μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的25%；再精密量取有关物质A项下的供试品溶液与对照溶液各5μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（0.5%）本文档共132页；当前第71页；编辑于星期二\20点40分五、萘普生中6-甲氧基-2-萘乙酮等有关物质的检查HPLC本文档共132页；当前第72页；编辑于星期二\20点40分六、对乙酰氨基酚中对氨基酚和对氯苯乙酰胺的检查1.对氨基酚及有关物质HPLC2.对氯苯乙酰胺HPLC

本文档共132页；当前第73页；编辑于星期二\20点40分（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成乙酰化H2ONaOH还原Fe(CH3CO)2O四、特殊杂质检查本文档共132页；当前第74页；编辑于星期二\20点40分1、酸度（1）来源：①生产过程引进酸性杂质②贮存过程水解产物醋酸（2）适宜pH为5.5-6.5(本品1％的水溶液）

偏酸或偏碱易发生水解，从而影响质量。一般杂质检查：酸度、氯化物、硫酸盐、水分（干燥失重）、炽灼残渣、重金属。特殊杂质检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质、对氨基酚。本文档共132页；当前第75页；编辑于星期二\20点40分2.乙醇溶液的澄清度与颜色生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体（对氨基酚）有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。原理对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。方法配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；如显混浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准液比较，不得更深。本文档共132页；当前第76页；编辑于星期二\20点40分有关物质：对氨基酚对氯苯乙酰胺0－乙酰基对乙酰氨基酚偶氮苯氧化偶氮苯苯醌醌亚胺本文档共132页；当前第77页；编辑于星期二\20点40分对氨基酚对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。来源制备对乙酰氨基酚时，乙酰化不完全或贮存不当发生水解原理深蓝色本文档共132页；当前第78页；编辑于星期二\20点40分

原料:取本品1.0g,加甲醇溶液(1→2)20ml溶解后,加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml,摇匀,放置30min;如显色,与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50μg用同一方法制成的对照液比较，不得更深(0.005%)

制剂:HPLC法:外标法对乙酰氨基酚咀嚼片、泡腾片、颗粒、滴剂的

Ch.P(2005)收载方法。方法：本文档共132页；当前第79页；编辑于星期二\20点40分对氨基酚及其他杂质检查方法Ch.P.(2010)

取本品适量，精密称定，加溶剂[甲醇－水(4：6)]制成每1ml中约含对乙酰氨基酚20mg的溶液，作为供试品溶液(临用新制)；另取对氨基酚和对乙酰氨基酚对照品适量，精密称定，加上述溶剂制成每1ml中约含对氨基酚1µg和对乙酰氨基酚20µg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录VD）测定。用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠8.95g，磷酸二氢钠3.9g，加水溶解至1000ml，加入10%四丁基氢氧化铵溶液12ml）-甲醇（90：10）为流动相；检测波长为245nm；柱温为40℃；理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于2000，对氨基酚与对乙酰氨基酚峰之间的分离度应符合要求。取对照品溶液20µl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使对氨基酚色谱峰的峰高约为满量程的10%，再精密量取供试品溶液与对照品溶液各20µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的4倍；按外标法以峰面积计算，含对氨基酚不得过0.005%，其他杂质相对于对照品溶液色谱图中对乙酰氨基酚峰面积计算，单个未知杂质不得过0.1%，杂质总量不得过0.5％。本文档共132页；当前第80页；编辑于星期二\20点40分3.有关物质（对氯苯乙酰胺等）对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯苯乙酰胺。副反应水解还原乙酰化乙酰化还原本文档共132页；当前第81页；编辑于星期二\20点40分供试品对照品样品液:对乙酰氨基酚乙醚溶液对照液:对氯乙酰苯胺乙醚溶液固定相:硅胶GF254展开剂:氯仿-丙酮-甲苯判断:在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。薄层色谱法(TLC法)本文档共132页；当前第82页；编辑于星期二\20点40分对氯苯乙酰胺检查方法Ch.P.(2010)

临用新制取对氨基酚检查项下供试品溶液作为供试品溶液；另取对氯苯乙酰胺对照品适量，精密称定，加上述溶剂制成每1ml中约含1µg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录VD）测定。用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠8.95g，磷酸二氢钠3.9g，加水溶解至1000ml，加入10%四丁基氢氧化铵12ml）-甲醇（60：40）为流动相；检测波长为245nm；柱温为40℃；理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于2000，对氯苯乙酰胺与对乙酰氨基酚峰之间的分离度应符合要求。取对照品溶液20µl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使对氯苯乙酰胺色谱峰的峰高约为满量程的10%，再精密量取供试品溶液与对照品溶液各20µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法以峰面积计算，含对氯苯乙酰胺不得过0.005%。本文档共132页；当前第83页；编辑于星期二\20点40分5.阿司匹林原料药中应检查的项目是

A.溶液的澄清度

B.溶液的颜色

C.间氨基酚

D.水杨酸

练习:本文档共132页；当前第84页；编辑于星期二\20点40分[6-8]A高效液相色谱法B气相色谱法C原子吸收分光光度法

D紫外分光光度法E薄层色谱法下列药物的检查方法为6.甲芬那酸中的2，3-二甲基苯胺的检查7.二氟尼柳中的有关物质A的检查8.萘普生中的有关物质检查

AEB本文档共132页；当前第85页；编辑于星期二\20点40分9.阿司匹林中含量最高的杂质为A.乙酰水杨酸酐B.乙酰水杨酸水杨酸C.水杨酸D.水杨酰水杨酸

练习:本文档共132页；当前第86页；编辑于星期二\20点40分酸碱滴定法双相滴定法紫外分光光度法高效液相色谱法第四节含量测定本文档共132页；当前第87页；编辑于星期二\20点40分案例6-1Ch.P(2005)阿司匹林片的含量测定取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色。再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1。置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4问题:1.阿司匹林片的含量测定能否采用直接滴定法或水解后剩余滴定法?为什么?2.何为”中性乙醇”?3.简述该法的原理及优缺点.Ch.(2010)阿司匹林片、阿司匹林肠溶片的含量测定改用何种方法？有何优点？本文档共132页；当前第88页；编辑于星期二\20点40分一、酸碱滴定法(以阿司匹林为例)（一）直接滴定法---游离羧基Ch.P.(2010)用于阿司匹林原料药的测定方法取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。本文档共132页；当前第89页；编辑于星期二\20点40分原理产物为强碱弱酸盐宜选酚酞为指示剂+NaOH溶解阿司匹林防止酯键水解乙醇对酚酞显酸性,可消耗氢氧化钠滴定液.本文档共132页；当前第90页；编辑于星期二\20点40分滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数，mg/ml滴定液浓度，mol/L1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常体现为反应摩尔比，即1∶n被测物的摩尔质量，g/mol本文档共132页；当前第91页；编辑于星期二\20点40分浓度校正因子供试品的质量（g）供试品消耗滴定液的体积（L）本文档共132页；当前第92页；编辑于星期二\20点40分应用范围不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）;酸性杂质干扰（如水杨酸）本文档共132页；当前第93页；编辑于星期二\20点40分例

称取阿司匹林供试品0.3955g，溶于中性乙醇，用酚酞为指示剂，以氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）滴定到终点时，消耗氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）21.56ml，每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。计算阿司匹林的百分含量。本文档共132页；当前第94页；编辑于星期二\20点40分（二）水解后剩余滴定法---酯结构USP(33)用于阿司匹林原料药的测定方法利用阿司匹林分子中的酯键,加入定量过量的NaOH溶液加热使之水解,剩余的碱用硫酸溶液滴定，同时做空白。

碱液在受热时易吸收二氧化碳，用酸回滴时会影响测定结果，故需进行空白校正本文档共132页；当前第95页；编辑于星期二\20点40分原理应用范围羟苯乙酯+NaOH定量过量反应摩尔比为1∶2本文档共132页；当前第96页；编辑于星期二\20点40分优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰USP（33）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4本文档共132页；当前第97页；编辑于星期二\20点40分含量计算本文档共132页；当前第98页；编辑于星期二\20点40分例题3

取供试品1.5078g,加入NaOH滴定液(0.5mol/L)50.0mL混合,加酚酞指示液,用硫酸滴定液(0.25mol/L,F=0.996)滴定剩余的氢氧化钠液,消耗15.70mL。空白试验消耗49.70mL,已知每毫升的氢氧化钠滴定液(0.５mol/L)相当于45.04mg药物,试计算供试品的百分含量。本文档共132页；当前第99页；编辑于星期二\20点40分（三）两步滴定法---酯结构(含酸性杂质)Ch.P(2005)用于阿司匹林片剂的测定方法第一步---中和用氢氧化钠中和所有的游离酸，不计量。本文档共132页；当前第100页；编辑于星期二\20点40分酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH→酒石酸钠枸橼酸钠水杨酸钠醋酸钠不用于含量计算本文档共132页；当前第101页；编辑于星期二\20点40分第二步---水解与测定，采用剩余滴定法+NaOH定量过量本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰反应摩尔比为1∶1本文档共132页；当前第102页；编辑于星期二\20点40分

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，此时中和了原来的游离酸，阿司匹林也同时成为钠盐。再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1。置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4本文档共132页；当前第103页；编辑于星期二\20点40分

反应摩尔比为1∶1

本文档共132页；当前第104页；编辑于星期二\20点40分计算本文档共132页；当前第105页；编辑于星期二\20点40分

例取标示量为0.3g的阿司匹林片10片，称出总重为3.5840g，研细后称取0.3484g，按药典方法测定。供试品消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）23.84ml，空白试验消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）39.88ml。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O4。求此片剂的标示量%。本文档共132页；当前第106页；编辑于星期二\20点40分（四）剩余量滴定法美洛昔康Ch.P.（2010）取本品约0.4g，精密称定，精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）25ml，微温溶解，放冷，加中性乙醇（对溴麝香草酚蓝指示液显中性）100ml，加溴麝香草酚蓝指示液10滴，用盐酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于35.14mg的C14H13N3O4S2。本文档共132页；当前第107页；编辑于星期二\20点40分（五）非水碱量法

芳酸碱金属盐：双氯芬酸钠有机弱碱：吡罗昔康冰醋酸作溶剂高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂结晶紫作指示剂指示终点或电位法指示终点

本文档共132页；当前第108页；编辑于星期二\20点40分二、紫外分光光度法三、高效液相色谱法(一)直接紫外分光光度法二氟尼柳胶囊(二)离子交换-紫外分光光度法氯贝丁酯(三)柱分配色谱-紫外分光光度法阿司匹林胶囊(一)阿司匹林栓剂的含量测定(二)丙磺舒原料的含量测定本文档共132页；当前第109页；编辑于星期二\20点40分取装量差异项下的内容物，研细，精密称取适量（约相当于二氟尼柳0.1g），置100ml量瓶中，加0.1mol/L的盐酸乙醇溶液适量，超声处理10分钟使二氟尼柳溶解，放冷，用0.1mol/L的盐酸乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置l00ml量瓶中，用0.1mol/L的盐酸乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，在315nm的波长处测定吸光度；另取二氟尼柳对照品，精密称定，用0.1mol/L的盐酸乙醇溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含50μg的溶液作为对照品溶液，同法测定，计算，即得。本文档共132页；当前第110页；编辑于星期二\20点40分片剂、胶囊剂、注射用无菌粉末：紫外分光光度法的对照品对照法本文档共132页；当前第111页；编辑于星期二\20点40分

吲哚美辛贴片Ch.P.（2010）

取本品5片，分别剪成小条，除去保护层，置干燥的具塞锥形瓶中，精密加甲醇250m1，避光放置，浸渍2h后，摇匀，精密量取浸渍液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。照紫外-可见分光光度法，在320nm的波长处测定吸收度，按C19H16ClNO4的吸收系数（）为179计算，即得。本文档共132页；当前第112页；编辑于星期二\20点40分片剂、胶囊剂、注射用无菌粉末：紫外分光光度法的吸收系数法本文档共132页；当前第113页；编辑于星期二\20点40分例.VitB1片UV法含量测定：取本品20片(规格10mg/片)，精密称得重量1.4070g，研细，精密称取0.1551g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)约70ml，振摇15分钟，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5.0ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，在246nm处测得吸收度0.474，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数为421计算本片的标示量%。本文档共132页；当前第114页；编辑于星期二\20点40分本文档共132页；当前第115页；编辑于星期二\20点40分（二）柱分配色谱-紫外分光光度法USP（33）阿司匹林胶囊和栓剂固定相：NaHCO3

洗脱液：冰醋酸-三氯甲烷280nm测定，对照法定量本文档共132页；当前第116页；编辑于星期二\20点40分USP（33）阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定:固定相：FeCl3SA保留，冰醋酸的乙醚溶液洗脱，306nm测水杨酸的量（2）含量测定:固定相：NaHCO3

AAS、SA保留冰醋酸三氯甲烷洗脱，280nm测总量柱分配色谱-紫外分光光度法本文档共132页；当前第117页；编辑于星期二\20点40分三、HPLC

离子抑制色谱法阿司匹林栓Ch.P.（2010）本文档共132页；当前第118页；编辑于星期二\20点40分

反相高效液相色谱法中的离子抑制色谱法，内标法定量

三、高效液相色谱法HPLC

1.阿司匹林栓剂、肠溶胶囊、泡腾片Ch.P.（2010）肠溶胶囊：本文档共132页；当前第119页；编辑于星期二\20点40分色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷健合硅