土壤中农药残留量的测定　液相色谱-串联质谱法：壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚残留量的测定

土壤中农药残留量的测定液相色谱-串联质谱法：壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚残留量的测定范围本文件规定了土壤中壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚残留量液相色谱-串联质谱测定方法。本文件适用于土壤中壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚残留量的测定。本文件测定土壤中壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚定量限为0.005

mg/kg，线性范围为0.005

mg/L～0.2

mg/L。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样用乙腈提取，液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。试剂与材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂和GB/T6682中规定的一级水。试剂甲醇（CH3OH，65-56-1），色谱纯。碳酸铵（（NH4）2CO3，506-87-6），色谱纯。乙腈（CH3CN，75-05-8）。丙酮（CH3COCH3，67-64-1）。氯化钠（NaCl，7647-14-5）：140

℃烘烤4

h。材料滤膜：聚四氟乙烯，0.22

μm。滤纸：中速。玻璃器皿。分析中涉及的材料应避免塑料材质，所用的玻璃器皿应洗净后用一级水淋洗3次，丙酮浸泡1

h后晾干备用。溶液配制1

mmol/L碳酸铵水溶液：准确称取0.096

g碳酸铵于1

000

mL容量瓶中，用水定容至刻度，现配现用。标准溶液壬基酚二氧乙烯醚（CAS1119449-38-5）：10

mg/L。壬基酚（CAS25154-52-3）：10

mg/L。4-正壬基酚（CAS104-40-5）：10

mg/L。混合标准溶液配制吸取一定量标准溶液于10

mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光0

℃～4

℃保存，有效期1个月。仪器和设备液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。电子天平，感量0.001

g和0.01

g。水浴振荡器（往复式）。具塞量筒：100

mL。玻璃三角瓶。土壤筛：金属，2

mm孔径。试样制备土壤鲜样，除去石块、动植物残体等杂物，风干后过2

mm孔径筛，装入洁净容器，密封，标明标记，-18

℃以下保存备用。分析步骤提取称取25

g试样（精确至0.01

g），于250

mL玻璃三角瓶中，加入25

mL水和25

mL乙腈，室温下水浴振荡提取30

min，滤纸过滤。收集滤液置于100

mL具塞量筒（内放7

g～10

g氯化钠），剧烈震荡1

min，室温下静置30

min，取上清液约2

mL，用0.22

μm滤膜过滤，待测。仪器参考条件液相色谱参考条件色谱柱：C18，75

mm×2.0

mm×1.7

μm，或相当者。柱温箱温度：40

℃。进样量：1.0

μL。流速：0.2

mL/min。流动相组成和梯度洗脱程序见表1。流动相组成和梯度洗脱程序时间min流动相A（1mmol/L碳酸铵水溶液）%流动相B（甲醇）%0.065351.525753.010905.510905.66535质谱参考条件离子源：电喷雾离子源。扫描方式：正负离子扫描。加热模块温度：400

℃。DL管温度：250

℃。碰撞气（氦气）压力：230

kPa。干燥气（氮气）流速：15

L/min。检测方式：多反应监测（MRM）。多反应监测条件和保留时间（见表2）。壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚、4-正壬基酚保留时间和多反应监测条件序号中文名称保留时间min定量离子对碰撞能V定性离子对碰撞能V1壬基酚5.39326.1/183.129326.1/121.1252壬基酚二氧乙烯醚5.58219.1/133.0-12219.1/147.1-2334-正壬基酚6.16219.3/106.020219.3/106.0标准工作曲线的制备准确吸取一定量的混合标准溶液（4.5），用甲醇逐级稀释成质量浓度为0.005

mg/L、0.01

mg/L、0.05

mg/L、0.1

mg/L和0.2

mg/L的混合标准工作溶液。空白基质溶液氮气吹干，加入1

mL上述混合标准工作溶液复溶，过滤膜（4.2.1）配制成系列基质混合标准工作溶液，供液相色谱-串联质谱仪测定。以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。定性及定量保留时间被测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5

%之内。定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表3规定的范围，则可判断样品中存在目标化合物。壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚、4-正壬基酚多反应监测的色谱图参见附录A。定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度＞50 %＞20 %～50 %＞10 %～20 %≤10 %允许的相对偏差±20 %±25 %±30 %±50 %定量外标法定量。试样溶液的测定将基质混合标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱-串联质谱仪中，保留时间和定性离子定性，测得定量离子峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。平行试验按以上步骤对同一试样进行平行测定。数据处理试样中被测物残留量以质量分数ωi计，单位以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（1）计算： ωi=ρi×v式中：ωi——试样中被测物残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；ρi——基质混合标准工作溶液中被测物的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；v1——提取有机溶剂总体积，单位为毫升（mL）；m  ——试样的质量，单位为克（g）。计算结果应扣除空白值，测XX果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字，当含量超过1mg/kg时保留三位有效数字。精密度在重复性条件下，两次独立测XX果的绝对差不大于重复性限（r），重复性限（r）的数据应按附录B执行。在再现性条件下，两次独立测XX果的绝对差不大于再现性限（R），再现性（R）的数据应按附录C执行。回收率本方法的添加水平和回收率范围见附录D。

（资料性）

壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚多反应监测（MRM）色谱图壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚多反应监测（MRM）色谱图见图A.1～图A.3。壬基酚壬基酚二氧乙烯醚4-正壬基酚多

（规范性）

重复性限重复性限如表B.1所示。方法的重复性限（r）序号名称含量mg/kg重复性限r含量mg/kg重复性限r含量mg/kg重复性限r1壬基酚0.0057.7×10-40.058.9×10-30.22.6×10-22壬基酚二氧乙烯醚0.0056.2×10-40.052.4×10-30.21.1×10-234-正壬基酚0.0053.2×10-40.053.8×10-30.21.3×10-2

（规范性）

再现性限再现性限如表C.1所示。方法的再现性限（R）序号名称含量mg/kg再现性限R含量mg/kg再现性限R含量mg/kg再现性限R1壬基酚0.0051.4×10-30.051.0×10-20.21.2×10-12壬基酚二氧乙烯醚0.0056.3×10-40.055.6×10-30.27.9×10-234-正壬基酚0.0