实验六双波长分光光度法测定

实验六双波长分光光度法测定第一页，共十七页，编辑于2023年，星期二一、实验目的

1．掌握双波长分光光度法测定原理。2．学习双波长分光光度法在复方制剂分析中的应用。第二页，共十七页，编辑于2023年，星期二复方磺胺甲噁唑片的处方为：磺胺甲噁唑（SMZ）400g甲氧苄啶（TMP）80g制成1000片每片含SMZ：360~440mg(Chp2000)第三页，共十七页，编辑于2023年，星期二二、基本原理

当吸收光谱重叠的a、b两组分共存时，若要消除a组分的干扰测定b组分，可在a组分的吸收光谱上选择两个吸收度相等的两波长λ1和λ2，测定混合物的吸光度差值。然后根据ΔA值计算b的含量。

第四页，共十七页，编辑于2023年，星期二第五页，共十七页，编辑于2023年，星期二磺胺甲噁唑（SMZ）在257nm波长处有最大吸收；甲氧苄啶（TMP）在此波长吸收最小并在304nm波长附近有一等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定波长（λ2），在304nm波长附近选择参比波长（λ1）。

第六页，共十七页，编辑于2023年，星期二A257＝AS，257＋AT,257A304＝AS，304＋AT,304ΔA＝A257－A304∵AT,257＝AT,304

＝AS，257－AS，304

＝ΔECSMZlΔA与CSMZ有线性关系。第七页，共十七页，编辑于2023年，星期二在λ2与λ1两波长处分别测定供试品溶液与SMZ对照品溶液的吸收度，求出供试品溶液吸收度差值(ΔAx)、SMZ对照品溶液的吸收度差值(ΔAs)，计算，即得。第八页，共十七页，编辑于2023年，星期二每片中含SMZ的毫克数Cs=0.505mg/mlW称=0.06960gW=552.64mg第九页，共十七页，编辑于2023年，星期二

由于参比波长对测定影响较大，故采用对照品溶液来确定。此波长可因仪器不同而异，测定时应仔细选择。第十页，共十七页，编辑于2023年，星期二三、实验内容1、供试品溶液的制备（教师准备）取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg与甲氧苄啶10mg)，置于100mL量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺甲噁唑与氧苄啶溶解，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。第十一页，共十七页，编辑于2023年，星期二二、对照品溶液的制备（教师准备）精密称取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg与甲氧苄啶对照品10mg，分别置于100mL瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。第十二页，共十七页，编辑于2023年，星期二三、磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)，(2)各2mL，分别置于100mL量瓶中，各加0.4％氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。第十三页，共十七页，编辑于2023年，星期二取对照品溶液(2)的稀释液，以257nm为测定波长（λ2），在304nm波长附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求ΔA＝Aλ2－Aλ1＝0。第十四页，共十七页，编辑于2023年，星期二再在λ2与λ1两波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(ΔA)，计算，即得。第十五页，共十七页，编辑于2023年，星期二四、操作注意事项测定之前应先检查仪器波长是否准确。第十六页，共十七页，