烈性噬菌体的繁殖过程一般分为五个阶段课件

第三章非细胞微生物【知识目标】1．掌握病毒及噬菌体的形态结构及化学组成，理解病毒的增殖过程。2．了解噬菌体的检测方法及与发酵工业的关系。【技能目标】1．学会识别噬菌体在发酵工业中造成的污染。2．学会噬菌体检测的方法并处理噬菌体的污染。第一节病毒一、病毒的生物学特性1．个体极微小。病毒的个体称为病毒粒子，绝大多数能通过细菌过滤器，必须借助电子显微镜才能看到，常以纳米（nm）为单位来表示其大小。2．无细胞结构，只是由核酸和蛋白质组成的大分子。3．每种病毒只含有一种核酸，或者是DNA，或者是RNA。4．专性细胞内寄生。5．以复制方式增殖，依靠宿主细胞进行自我复制繁殖。6．在离体条件下，只能以无生命的大分子状态存在，并可长期保持其侵染性。7．对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感。二、病毒的基本形态和大小1．牛痘苗病毒2．传染性脓疱皮炎病毒3．腮腺炎病毒4．T-偶数噬菌体5．疱疹病毒

6．大蚊病毒

7．流感病毒

8．烟草花叶病毒9．腺病毒10．多瘤病毒

11．脊髓灰质炎病毒图3-1几种病毒的形状大多数病毒的直径在10nm～300nm之间（图3-2）。病毒大小悬殊，较大的病毒如痘病毒为300nm，较小的病毒如口蹄疫病毒10nm，所以，不能用普通光学显微镜观察其形态，必须用电子显微镜放大几千倍、几万倍，甚至十几万倍才能看到其基本形态。图3-2病毒大小与其他微生物的比较三、病毒的基本结构病毒主要由核心和衣壳两部分构成，核心与衣壳合称为核衣壳。有些病毒在核衣壳外还有一层膜称包膜。结构最简单的病毒没有包膜，只由核衣壳构成，称为裸露病毒，有包膜的病毒，称为包膜病毒（图3-3）。图3-3病毒的基本结构四、包膜有些较大型病毒在核衣壳外面有一层膜状结构，称为包膜，也叫囊膜，如麻疹病毒、腮腺炎病毒。大多数有包膜病毒呈球形（如流感病毒），但痘病毒呈砖形，狂犬病毒呈弹形。包膜由脂质、蛋白质和糖类组成。包膜表面形成包膜突起，称为刺突，嵌附在包膜脂质中，它是多糖与蛋白质的复合物（糖蛋白）。刺突因病毒的种类不同而异，可作为鉴定的依据。当包膜受到破坏时，包膜病毒也丧失吸附和侵入宿主细胞的能力，从而丧失感染性。五、病毒的增殖病毒的增殖又称为病毒的复制，是病毒在活细胞中的繁殖过程。病毒没有活细胞所具备的细胞器，缺乏完整的酶系统，不能单独进行新陈代谢，必须借助宿主细胞供给原料和能量，才能在病毒核酸控制下合成新的病毒核酸和蛋白质并装配成完整的病毒颗粒，并以一定方式释放到细胞外，再感染其他细胞。病毒从进入宿主细胞开始，经复制成为成熟的病毒颗粒并释放到细胞外的过程称为复制周期，包括吸附、侵入、生物合成、装配与释放五个连续的过程。第二节噬菌体一、噬菌体的概念及其主要类型感染细菌、放线菌、真菌、螺旋体等微生物的病毒称为噬菌体，即微生物病毒。噬菌体具有其他病毒的共同特性：个体极微小，没有细胞结构，主要由核酸（DNA或RNA）和蛋白质组成，专性细胞内寄生，以复制方式增殖等。噬菌体的基本形态为蝌蚪形、微球形和纤线形。从形态学角度又可将噬菌体分为六个群（图3-6）。1、2、3群为蝌蚪形，4、5群为微球形，6群为纤线形。图3-6噬菌体的形态1～3．蝌蚪形4～5．微球形6．纤线形二、噬菌体的结构特点图3-7噬菌体结构模式图三、烈性噬菌体和温和噬菌体根据噬菌体感染宿主细胞产生的结果不同，可将噬菌体分为烈性噬菌体和温和噬菌体。（一）烈性噬菌体凡能引起宿主细胞迅速裂解的噬菌体，称为烈性噬菌体，通常把烈性噬菌体的繁殖看成是噬菌体的正常表现。烈性噬菌体的宿主如果是细菌就称为敏感细菌。从噬菌体进入细菌开始，到引起细菌裂解并释放出子代噬菌体为止，为一个增殖周期，一般需15min～20min。烈性噬菌体的繁殖过程一般分为五个阶段：即吸附、侵入、复制、装配和释放。溶菌现象：在细菌培养液中，细菌被噬菌体感染，细菌裂解，使混浊的菌悬液变澄清，这种现象称为溶菌现象。噬菌斑：在固体培养基上，如果噬菌体侵染宿主细胞，释放子代噬菌体，通过培养基扩散到四周细胞，继续侵染，引起连锁宿主细胞裂解，从而形成肉眼可见的、具有一定形态、大小和边缘的空斑，称为噬菌斑（图3-8）。在一定条件下，每个噬菌体可产生一个噬菌斑，所以通过噬菌斑的计数可知接种到平板上噬菌体粒子的相对数目。噬菌体的效价：在实践中可采用平板法测定每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数，称为噬菌体的效价，又称噬菌斑形成单位数（plaque-formingunit，简称成斑单位，用pfu表示）。

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65432图3-8噬菌斑的形态图中白色为溶菌而透明；黑色为细菌生长1．透明2．浑浊3．浑浊中部透明4．有菌生长环5．中心有菌生长点

6．有生长环与生长点7．中心有针孔状生长点（二）温和噬菌体概念：有些噬菌体侵入宿主细胞后，不马上增殖，而是潜伏下来，并将其核酸整合到宿主染色体上，并随宿主染色体的复制而一起复制，又随宿主分裂而分布到子代宿主体内，如此不断延续传代，这种不造成宿主细胞裂解的噬菌体称为温和噬菌体，也叫溶源性噬菌体，这种现象称为溶源现象。含有噬菌体基因组的细菌称为溶源性细菌。整合在宿主细胞核上的核酸称为原噬菌体。溶源性细菌可以抵抗相应烈性噬菌体的感染，这种抵抗力具有高度的特异性。例如，用弱病毒感染植物细胞，诱发植物的免疫功能，从而不受强病毒的感染，而使植物得到保护。溶源性细菌的自发裂解的机率极低，只有极少数溶源性细菌中的噬菌体大量复制而导致细菌裂解，释放噬菌体粒子，使溶源性细菌变成非溶源性细菌，这个过程称为溶源性细菌非溶源化。如果在低剂量的紫外线照射或其他物理、化学方法影响下也能诱发这种现象。温和噬菌体对于敏感细菌所形成的噬菌斑是浑浊的，这是因为中央有溶源性细菌生长的缘故。四、噬菌体的监测方法双层平板法单层平板法载片快速检测法气体样品的检查法液体培养检查法五、噬菌体与发酵工业的关系（一）噬菌体的危害1．丙酮、丁醇发酵与噬菌体污染2．食品工业的噬菌体污染3．抗生素发酵与噬菌体污染发酵工业和食品工业被噬菌体污染表现两个方面：一是发酵周期明显延长，影响产品的产量和质量；二是污染生产菌种，使发酵液变清，不积累发酵产物，严重时无法继续发酵，甚至停产。其原因可能有两个方面：一是生产菌种本身可能携带有噬菌体，或使用的生产菌种是溶源性菌；二是生产环境存在噬菌体，没有做好消毒与灭菌工作。（二）噬菌体的防治1．决不使用可疑的生产菌种2．严格保持环境卫生3．严格控制活菌体的排放4．保证发酵系统和空气过滤系统的合理性与无菌状态5．不断筛选抗性菌种，并经常轮换生产菌种六、噬菌体感染后的补救措施

在生产中如果发生噬菌体污染，及时采取合理措施:（1）尽快提取产品;（2）使用药物抑制;

（3）及时改用抗噬菌体的生产菌株.【本章小结】病毒是一类个体极微小、无细胞结构、只含一种核酸、专性细胞内寄生、以复制方式增殖的非细胞微生物。病毒的基本形态有球形、卵圆形、砖形、杆形、丝状、蝌蚪状等。大多数病毒的直径在10nm～300nm之间。核酸构成病毒的核心，蛋白质构成病毒的衣壳，只有核衣壳的病毒称裸露病毒，有包膜的病毒称包膜病毒，包膜由脂质、蛋白质和糖类组成。病毒的复制包括吸附、侵入、生物合成、装配与释放五个连续的过程。噬菌体的基本形态有蝌蚪形、微球形和纤线形。

从形态学角度又可将噬菌体分为六个群。噬