高等生物分离工程知识点

1.生化分离工程是生化工程的一个重要组成部分，它是描述回收生物产品分离过程2.生物技术下游加工过程的一般步骤和单元操作:4.简述本课程所介绍的公用设施及设备。①洁净空气调节系统的组成：小规模、单分区洁净空气调节系统；中大规模、多分2）洁净室及洁净空气调节系统的测定②洁净室的物理指标和生物学指标：温度、相对湿度、噪度、照度、静压差、层流3）低温环境系统：制冷技术应用的三个温区：低温（-120C）,中温（-120C皿以4）生产用水供应系统：①制药用工艺用水：工艺用水中使用的水，按化学成分2）细胞浓度c的影响：产生的热量随细胞浓度的降低而下降，但是单位细所主要是空化作用：在液固两相的交界处，存在一些小空泡，声波的稀疏阶段使小空泡迅速多小气泡，在压缩相中气泡会被压缩，直到不能被压缩时，气泡破裂，释放出猛烈9.什么是离心分离因数？根据分离因数Fr的大小，可将离心机分为哪几类？有何4都是利用膜的筛分性质，以压差为传质推动力，用于截流高分子溶(2)通过改变流速、压力、温度和料液浓度等可以降低浓差极化效应。方法包括降16.沉淀法改变溶液的条件，使蛋白质以固体形式从溶液中分出的操作技术称为固之后还要考虑：溶剂度大，能配制高离子强度的溶液；溶解度受温度影响小；盐溶2）温度：温度升高，蛋白质溶解度增大，高离子强度时，升高温度，蛋白质溶解度3）PH:接近等电点时，溶解度最小，调节溶液PH在等电点附近有4）蛋白质起始浓度：蛋白质起始浓度不同，沉淀所需无机盐用量也不同，提高蛋白质（5）亲和层析：子化合物可以和它们相对应的配基进行特异并可逆结合的原理来（6）金属螯合层析：利用金属离子与有关蛋白残基的特异螯合作用来分离纯化高分（7）共价作用层析：利用溶质分子与层析剂凝胶之间的共价吸附作用将目的产物与（8）正相与反相层析：是分配层析的扩展，基于流动相与固定相之间分配系数的差16.什么是离子交换层析？如何将交换到介质上的蛋白洗脱下来？一般展开层析的方（1）带电荷的目标分子通过离子交换，与离子交换固定相上带固定电荷的功能基团（2）通过提高洗脱剂的PH和离子强度可使交换到介质上的蛋白质逐步洗脱下（3）一般的洗脱展开层析方式有静态洗脱和动态洗脱两种方式。器，溶剂过滤器，进样室，层析柱，检测器，收集器，记录仪灌注色谱的诞生是从分离介质的突破开始的，由美国PerseptiveBiosystems公司a灌注色谱打破了传统的流速与分辨率，容量间的三角关系，在流速增加的情况b分离速度与传统色谱相比快了10－100倍，并且保证了一定的分辨率和柱容量c分离速度的加快减少了溶质分子在柱内的保留时间，提高了分离物分子的生物活性，灌注色谱法是一种快速高分辩分离生物大分子的方法d分析时间的缩短和高的柱容量，降低了大规模色谱分析的成本1）样品浓度：样品浓度越高越容易结晶，而且一般控制在3%~5%的范围内2）样品纯度：采用高纯度的蛋白质是对其进行结晶的前提，样品纯度越高越容易结晶，而且结晶母液的纯度一般接近或超过50%。溶液中某些外来的微粒可能作为成核中心而使晶核更多,影响晶体纯度,因此应该尽量避免过饱和溶液中有尘粒,或在结晶前将准备结晶的蛋白质溶液高速离心将其除去,而且要尽可能避免产生小的3）溶液的pH值：蛋白质之间的相互作用是使蛋白质排入晶格的基本条件，这种5）温度：温度的变化会引起蛋白质溶解度的改变。不同的蛋白质结晶的温度不21.本课程介绍的其他概念（双水相萃取、超临界萃取、正吸附和负吸附、径向层系统中，蛋白质的分配系数随着葡聚糖相对分子量的增加而增加，但随PEG相对分超临界流体萃取（Supercriticalfluidextraction）:是将超临界流体作为萃取剂的一种15.拖带剂又称夹带剂、改性剂（modifier）或共溶剂（cosolvent）,指在流体中的？（3.膜过滤一般用于去除含有固形物的悬浮液，使用超滤技术可以使分子量相差四倍4.完全借助等电点技术来纯化蛋白是行不通的，在某一蛋白的等电点进行盐析时可以较快且彻底的沉淀蛋白，借助有机溶剂沉淀的方法也不可能得到纯蛋白5.离子交换层析技术对于等电点相近的蛋白是无能为力的，凝胶过滤层析对于分离6.电泳技术一般用于鉴定蛋白质的纯度和亚基，只有在样品量少、目标蛋白的附加7.对提取液进行初步纯化后，亲和层析纯化技