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文档简介
细菌的生理第一节细菌生长繁殖一、细菌的化学组成和物理性状水75-90%蛋白质、糖类、脂质核酸、无机盐(一)化学组成肽聚糖、脂多糖、胞壁酸、磷壁酸、D型AA、DAP、吡啶二羧酸(二)细菌的物理性状1、带电现象(负电荷)
G+菌等电点低PH2~3G-菌等电点稍高PH4~52、表面积
细菌体积虽小,但其单位体积的细胞表面积总和比其他生物体大3、光学性质细菌细胞为半透明体细菌悬液为混浊状态4、半透性选择性通透性作用5、渗透压
G+菌渗透压高达20~25个大气压
G-菌为5~6个大气压二、细菌的营养物质水
生物所必需的,占细菌总量的
80-90%
,细菌的吸收和代谢均需有水才能进行。碳源
合成菌体成分,作为获得能量的主要来源。氮源
有机氮化物如氨基酸、蛋白胨等;菌体的原料。无机盐
构成菌体的成分;作为酶的组成部分,维持酶的活性;调节菌体内外的渗透压。
生长因子
细菌生长需要但自身不能合成。如:维生素、嘌呤、嘧啶、氨基酸等。营养物质水碳源(糖)氮源(氨基酸蛋白胨)无机盐生长因子重要溶剂菌体成分能源菌体成分原料某些菌需之菌体及酶的组分能量储存及转运调节渗透压与繁殖及致病相关三、细菌的生长繁殖(一)细菌生长繁殖的条件充足的营养:水、碳源、氮源、无机盐、必要的生长因子。适宜的温度:寄生菌以人体温度(37℃)适宜,个别嗜冷(鼠疫杆菌28~
30℃
)或嗜热(嗜热菌50~
60℃
)金葡菌(5℃)合适的酸碱度:
大多数是中性(PH7.2~7.6),个别强碱性(霍乱杆菌PH8.4~9.2)或弱酸性(结核杆菌PH5.6~6.8)。必要的气体环境:
氧气和二氧化碳。(1)专性需氧菌(aerobe)(2)专性厌氧菌(anaerobe)(3)兼性厌氧菌(facultativeanaerobe)(4)微需氧菌(microaerophilicbacteria)如幽门螺杆菌、空肠弯曲菌(二)细菌的生长繁殖方式和速度繁殖方式以二分裂方式进行无性繁殖繁殖速度(代时)
20~30分钟分裂一次但结核杆菌18~20小时才分裂一次
细菌生长繁殖曲线:510152025小时细菌数的对数迟缓期(lagphase)衰亡期(diclinephase)稳定期(stationaryphase)对数期(logarithmicphase)细菌生长曲线(growthcurve)生长曲线细菌的群体生长可分四个时期:
迟缓期:适应过程,为生长繁殖作准备。
对数期:生理特性较典型,研究生物学性状药敏实验。
稳定期:芽胞、内、外毒素、抗生素等产生。发生变异。
衰亡期:细菌死亡速度大于繁殖速度。
第二节细菌的人工培养一、培养基
人工配制的适合细菌生长繁殖的营养基质。(一)按成分来分1.合成培养基:成分是已知的各种化学物质。如蔡氏培养基2.天然培养基:天然物质制成,化学成分不恒定、不确定,配制方便,营养丰富,较常用。3.半合成培养基:在天然物质的基础上加入某些已知成分。如培养真菌的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。(二)按物理性状分:1.液体培养基:不加凝固剂,主要用于增菌培养和鉴定细菌。2.半固体培养基:液体培养基中加入0.2%-0.5%的琼脂,用于观察细菌动力、鉴定菌种和保存菌种。3.固体培养基:液体培养基中加入2%-5%的琼脂,用于微生物分离、鉴定及保存菌种等。液体培养基+2-5%琼脂固体培养基:细菌的分离培养0.2-0.5%琼脂半固体培养基:用于大量繁殖细菌+动力检查(三)按用途分:1.基础培养基:如肉汤培养基和普通琼脂培养基。2.营养培养基:加入营养物质,如血平板3.选择培养基:加入某些化学物质,抑制杂菌生长,如SS琼脂培养基。4.鉴别培养基:用于培养和鉴别细菌。如糖发酵管等。5.厌氧培养基:用于厌氧菌的分离、培养和鉴别,如疱肉培养基。
二、细菌在培养基中的生长现象1、液体培养基:
浑浊生长、沉淀生长、菌膜生长在液体培养基中的生长情况
多数呈均匀混浊状态少数链状菌呈沉淀生长专性需氧菌则在表面生长,常形成菌膜菌膜2、半固体培养基:
检查细菌动力有鞭毛的细菌:可扩散,呈放射状或云雾状无鞭毛的细菌:沿穿刺线生长在半固体培养基中的生长情况:常用于观察细菌动力
有鞭毛的细菌可沿穿刺线呈羽毛状或云雾状混浊生长无鞭毛细菌则只能沿穿刺线呈明显的线状生长3、固体培养基:
形成菌落菌落:单个细菌分裂繁殖后形成的肉眼可见的细菌集团。菌苔:多个菌落融合成片。纯培养:挑取一个菌落转种到另一个培养基中。在固体培养基中的生长情况:
划线接种18-24小时培养后,可见菌落菌落(colony)纯培养(pureculture)液体培养基斜面培养基菌落(colony)纯培养(pureculture)斜面培养基液体培养基菌落的类型:(1)S型菌落(smoothcolony)(2)R菌落(roughcolony)(3)M菌落(mucoidcolony)三、人工培养细菌的意义(一)在医学中的应用
1.细菌的鉴别与研究
2.细菌性疾病的诊断和治疗
3.生物制品的制备
4.细菌毒力分析及细菌学指标的检测(二)其他方面的应用
1.在工农业生产中的应用
2.在基因工程中的应用第三节细菌的代谢产物及意义一、细菌的分解代谢产物及生化反应(一)细菌对糖和蛋白质的分解(二)细菌的生化反应生化反应主要用于革兰阴性细菌的鉴别
糖发酵试验、甲基红试验、V-P试验、吲哚试验、硫化氢试验
吲哚(I)甲基红(M),VP(V),枸橼酸盐利用试验(C)合称为IMVC试验,用于鉴别肠道杆菌。(1)糖酵解试验:++—气泡不发酵产酸不产气产酸又产气(2)甲基红(methylred)试验:葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇(红色)(pH值>5.4)(pH<4.5)(—)(+)大肠杆菌产气肠杆菌(3)VP试验:葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰红色(+)OH-+含胍基化合物(—)(+)产气肠杆菌大肠杆菌(4)枸橼酸盐利用(citrateutilization)试验:(+)(—)枸橼酸盐(碳源)碳酸盐铵盐(氮源)氨培养基变为碱性兰色(+)产气肠杆菌大肠杆菌(5)吲哚(indol)试验:(—)(+)色氨酸吲哚(靛基质)玫瑰吲哚(红色)+二甲基氨基苯甲醛大肠杆菌伤寒杆菌(6)硫化氢试验:(—)(+)含硫氨基酸硫化氢硫化铁或硫化铅(黑色,+)+铁离子或铅离子伤寒杆菌痢疾杆菌(7)尿素酶试验:(—)(+)尿素氨培养基变碱性(红色,+)大肠杆菌变形杆菌二、细菌的代谢产物及意义★合成代谢产物:毒素和侵袭性的酶热原质(引起发热反应)致病抗生素维生素治疗色素细菌素鉴别
毒素:包括内毒素和外毒素,是细菌重要的致病物质。内毒素(endotoxin):G-菌细胞壁的脂多糖,菌体死亡崩解后游离出来;外毒素(exotoxin):多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质,毒性强于内毒素。侵袭性酶:
亦为细菌重要的致病物质,能损伤机体组织,促使细菌的侵袭和扩散。
热原质(pyrogen),又称致热原概念:是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热的物质。热源质体温上升
特点:耐高温消除方法:250℃高温干烤;用吸附剂和特殊石棉滤板吸附液体中的热原质;蒸馏法除之。蒸馏最好色素
一
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