荧光定量PCR仪操作指南eppendorf

名目：安全预防法安装交货包装仪器的安装功能性单元Mastercyclereprealplex启动realplex模块与热模块之间的连接Mastercyclereprealplex与计算机之间的连接与其它部件的连接realplex安装主程序数据恢复realplex3.操作治理者登陆登陆用户变更系统配置对使用者的治理用户建立编辑用户删除用户用户层循环仪realplex模块系统层特性登陆出错信息用户登陆软件更检测工程治理建立检测工程翻开检测工程保存检测工程保存模板文件模板文件的使用复制检测工程检测工程的输出检测工程的输入建立文件夹删除检测工程和文件夹探针治理染料治理校准背景校准颜色校准使用商业的校准工具包进展的颜色校准客户特有的染料的校准数据库治理当前数据库的自动保存当前数据库的保存输入数据库数据库的归档编程〔检测工程的建立〕建立一个的检测工程建立板布局染料确实定参考染料的选择样本容积输入探针类型确实定背景确实定样品类型的定义标准阳性比照阴性比照未知样品复制和标准系列的自动建立定量的样品类型相对定量的样品类型plexplex熔点分析中的样品类型终点测定中的样品类型+/-检测工程中的样品类型基因辨识中的样品类型样品的复制与剪切删除样品几个样品的归组子检测工程的测定板布局的删除完整检测工程的板布局编辑pcr用模板程序建立一个pcr不用模板程序建立pcr序步的插入和编辑温度循环〔1－5〕保温暂停熔解曲线终点程序的复制程序的删除测量点确实定热盖设置操作〔监测〕样品的加载模块温度掌握样品体积启动检测工程单个样品的选择单个样品类型的选择循环仪状态当前运行检测工程的中断连续运行检测工程终止检测工程mastercyclereprealplex作为pcrmastercyclereprealplex作为荧光计的使用关闭分析概要翻开检测工程翻开在运行的检测工程翻开子检测工程单一检测工程的选择使样品处于不活动状态样品类型的选择分析模式的选择图标缩放存储默认设置图表的保存和复制样品数据的保存和复制编辑报告模板报告的应用分析的保存调用分析定量阈值确定基准线测定标准曲线分析multiplex分析相对定量阈值的测定plex分析的估算plex熔解曲线分析阈值的测定分析终点测量标准曲线分析+/-检测工程将终点测定作为数据源的+/-检测工程分析模式阈值的测定pcr+/-assay阈值测定分析plex基因测定阈值测定分析维护清洁仪器的一般方法热模块的清洁热模块的验证与校准8故障查找一般故障sybrqrt－pcr过程中发生的错误登陆用户的建立创立一个检测工程检测工程的保存执行检测工程概述板布局pcr开头检测工程当前运行检测工程的中断连续运行检测工程退出检测工程分析10技术数据功能性单元Mastercyclereprealplex1：关闭的realplex1realplex2状态显示密封压板〔锁住状态〕掌握面板的挂钩〔Mastercyclereprealplex〕5热模块2：翻开的realplex1密封压板〔开启状态〕2realplex3热模块放入试验样本后，向前拉动realplex模块，掩盖住插入的试管。然后用压板密封，程序开头启动。留意在把密封压板归位时留神不要弄伤手指。realplexrealplexmastercyclereprealplexLED可以开头运行realplex您也可以在mastercyclereprealplex处于关断状态下运行realplex连续运行软件。留意：当使用realplex〔如：CD器或者媒体播放器等！决不行以使计算机工作在电池供电模式程中，计算机不会进入待机状态。3.操作治理者登陆当realplex软件第一次被翻开时，将会显示如下图的一个登陆对话框，提示软件治理者为Eppendorf命名并输入登陆密码。这项是仪器的出厂设置，如有需要用户可以在UserAdministrator对话框中对此项进展修改〔具体状况请查阅节。此后软件再次被翻开时，无论软件治理者还是其他的软件使用者realplex软件。登陆在翻开程序时，Mastercyclereprealplex用户都必需先登陆才能进一步使用软件。全部用户名都列在选取框中。我们要做的就是选出自己的用户名并输入相应密码。用户由软件治理者建立〔请参阅节〕假设登陆密码输入错误，则会显示登陆失败loginfaile。点击OK登陆程序。假设点击Cancel〔情参阅节为进入工作状态，使用者必需再次翻开登陆对话框〔情参阅节〕完成登陆手续。留意：登陆以后，用户可以对自己的文件夹和分析程序进展读或者写的操作，与Mastercyclereprealplex仪器连接后可以执行其他的试验操作。而对软件其他用户的文制到自己的文件夹中。用户变更通过点击该图标以退出登陆。当已有其他使用者登陆时，可以依据以下方法登陆系统：通过点击该图标以退出登陆。假设选择登陆图标，User假设选择登陆图标，Userlogin对话框将被弹出，使用者可以依据节中描述的登陆步以上两种功能也可以通过File菜单来实现。当前登陆用户将被显示在屏幕下方的状态栏内。软件在同一时刻仅允许一名用户登陆，用户的登陆将自动使原来的使用者退出系统。当前登陆用户将被显示在屏幕下方的状态栏内。登陆后，主屏幕显示为Administror或者User。主屏幕包括向导区，工作区和状态区。假设显示热模块的状态信息和当前使用者的用户信息。菜单栏工具栏向导区工作区通过选项show/hide通过选项show/hidenavigator，向导区可以被显示或者隐蔽。这一操作也可以通过setup实现。选择性的操作还可以通过点击鼠标右键来实现。系统配置在setup菜单中选择systemconfiguration项，则在菜单栏中显示realplexsystemconfiguration单，此外还有系统设置及其功能的结点选项。在向导栏内不同的层次显示为不同的符号。当其附属文件夹被选中，将在对话框的右边显示出相应的窗口内容。对使用者的治理中选中User项，UserAdministration作。循环仪cycler设备特性被列在properties图表下。此外相应硬件的资料以及最终登陆的用户名，还有最终运行的程序都会在此栏下显示出来。在incubate和lid图表下，可以调整热模块和加热盖的温度值。具体做法为首先在newtemperatureincubate复选框以确认。如停顿调温，则释放incubatePCR程序文档信息在protocol假设选中这个功能键，则原始记录将被作为txt文件保存。首先给出了启动PCR程序的登陆用户的信息以及该PCR假设选中这个功能键，则原始记录将被作为txt文件保存。假设选中这个功能键，则原始记录将被与计算机相连的打印机打印出来。CyclerSystem假设选中这个功能键，则原始记录将被与计算机相连的打印机打印出来。特性：properties栏中显示出模块的型号以及热模块的序列号，同时热模块被最终验定和校定的信息也会显示出来。Sensors：显示当前传感器的温度值。〔请详见命令信息。该过程在温度验定系统的操作手册中有具体描述。操作手册中有具体描述。realplex模块realplexmodulerealplexmastercyclereprealplexRealplexmodulerealplexCAN总线地址以及热模块和realplex是通过CANCoverstaterealplexmoduleModulelog程序运行中消灭的全部出错信息。这一图表中的出错信息可以通过选中save功能键以txt格式保存下来，或者选中print检测工程治理在工具栏中可以实现以下的检测工程的治理功能：检测工程翻开检测工程保存检测工程打印报告将文件输入当前的选中局部将当前的选中局部输出留意：以上提及的各个功能还可以通过file菜单，或者把鼠标放在向导栏中点击右键来实现。建立检测工程newnewassaypcr中选中open中选中openassay标有setupassaysetup标有setupassaysetup和标有template的文本可以作为建立文本的模板文本使用。更多相关信息请详见和节analysis中，而且在analysis标有template的文本可以作为建立文本的模板文本使用。更多相关信息请详见和节标有complete的文本代表数据获得已经发生过的文本。假设这样的文本被翻开，数据标有complete的文本代表数据获得已经发生过的文本。假设这样的文本被翻开，数据将会显示在analysis下。并且除非有其它文本当前正在被运行的状况下，该文本才会显示assaysetup由于断电或者系统发生错误等缘由造成失败的文本都带有这个aborted的标志。假设在当某个文本被选中，该文本中保存的全局部析数据都将被显示在下方的analysis由于断电或者系统发生错误等缘由造成失败的文本都带有这个aborted的标志。假设在发生失败前获得了足够多的数据，那么该文本还是可以被拿来分析的。保存检测工程saveassaysaveassay当要把一个检测工程保存在某目标文件夹下时，可以选中file菜单下的saveas翻开相关对话框来实现。输入检测工程名后，文本通过复选框assaytype被选中，点击ok保存模板文件在保存文件的过程时，复选框中选择template模板文件的使用assaysetup通过功openassay复制检测工程用户可以复制其它用户的文本到自己的文件夹,对这些文本与模板进展启动和编辑。具体方assay对话框中使用openassay然后通过saveas〔请查阅节。这时用户就可以在连接mastercyclereprealplex了。检测工程的输出exportassayexportassaytofileASY的计算机上以便对文本做更多的处理。在窗口的靠上一栏中选出检测工程的保存位置，然后输入文本的名字，并在filetype一栏中选择realple－exchang〔*.as。中选中图标import中选中图标importassayfromfile时，一个格式为ASY个空白的文本中。当输入一个检测工程时，必需在窗口的靠上一栏内选中一个相关的保存位置，文件类型为realpleexchang〔*.as。建立文件夹建立文件夹便利日后的调用。依据如下的步骤建立文件夹：选中本人用户结点后，通过功能键new来添加一个的文件夹。可以首先通过选中文件夹，然后再点击功能键rename来重命名。通过图标选中本人用户结点后，通过功能键new来添加一个的文件夹。可以首先通过选中文件夹，然后再点击功能键rename来重命名。然后检测工程就可以在建立的文件夹中进展复制和创立等操作了〔请查阅和节〕删除检测工程和文件夹选中一个检测工程或者文件夹后，可以通过点击功能键delete，和确认yes通过图标openassay，用户可以在检测工程对话框中，点击功能键delete来删除选中的检选中一个检测工程或者文件夹后，可以通过点击功能键delete，和确认yes来删除该检测工程或者文件夹。选中dyes选中dyesFAM520nm520+/-5nm〕滤光片是格外重要的。请向各自的生产商询问所需染料的最大放射量。留意：在执行颜色校准〔请查阅节〕前，必需先定义相应的染料。染料名称染料最大的放射波长，单位为纳米〔nm〕染料检测通道。基于特定的染料波长有程序预先自动设定。具体染料校准时的光电倍增器的敏感度。包含有四位数码，用来为四个滤光最终一次执行染料校准的用户最终一次校准时间。片中的每一个设定相应数值〔1代表低敏感度，9代表高敏感度。该数码由软件预先设置。染料名称染料最大的放射波长，单位为纳米〔nm〕染料检测通道。基于特定的染料波长有程序预先自动设定。具体染料校准时的光电倍增器的敏感度。包含有四位数码，用来为四个滤光最终一次执行染料校准的用户最终一次校准时间。在点击此键以后所显示的对话框中，染料的全部数据都可以在这里输入进来。在点击此键以后所显示的对话框中，染料的全部数据都可以在这里输入进当前染料的全部数据都可以在点击此键以后显示的对话框中修改。按ok以这个对话框用来输入染料的名称和检测染料的滤光片当前染料的全部数据都可以在点击此键以后显示的对话框中修改。按ok以点击此键后，选择yes点击此键后，选择yes确认删除的染料。留意：假设染料的滤光片发生转变的话，将会失去染料的校准资料。校准mastercyclereprealplex校准mastercyclereprealplex和随后的试验处于一样的温度下。肯定要确保没有液体蒸发，否则使用的校准板。在校准前，要保证仪器已经启动了至少15入。背景校准必需要在颜色校准之前执行。背景校准选中菜单栏setup背景校准选中菜单栏setup后，就会弹出backgroundcalibration准。该列表还列出了校准时间和执行校准的用户名。除此之外还显示了背景校准的状态。使用的板名称作为默认设置的背景校准，带有十字标记。光电倍增器的敏感度在染料校准过程中以四位数码的形式被确定下来。四个执行背景校准的日期执行背景校准的用户一个的背景校准过程会在点击该栏后消灭的对话框中进展。使用的板名称作为默认设置的背景校准，带有十字标记。光电倍增器的敏感度在染料校准过程中以四位数码的形式被确定下来。四个执行背景校准的日期执行背景校准的用户一个的背景校准过程会在点击该栏后消灭的对话框中进展。滤光片中，每个滤光片都对应确定一个数码〔1滤光片中，每个滤光片都对应确定一个数码〔19。这四个数码由软件预先设定。码由软件预先设定。—对话框—对话框new—在右边的对话框的incubation栏中，输入模块和盖子的温度值。模块温度的缺省值为60105—插入背景板以后，单击功能键—在右边的对话框的incubation栏中，输入模块和盖子的温度值。模块温度的缺省值为60105—插入背景板以后，单击功能键calibrate开头执行校准，单击ok—在加热和第一次读值完成后，软件会提示翻转背景板，请依据软件的提示操作，翻转背景板，单击ok—假设背景校准成功完成的话，背景板会显示出96ok关闭“校准成功完成”提示框。在显示的对话框内，可以转变当前背景校准的全部的数据，然后校准过程被假设背景板在校准过程中的某些位置校准失败时，单击cancel来放弃校准数据。在这种状况proceed被排解。在显示的对话框内，可以转变当前背景校准的全部的数据，然后校准过程被中选中功能键default时，对于全部的检测工程来说，校准都为默认设置。中选中功能键default时，对于全部的检测工程来说，校准都为默认设置。点击yes点击yes背景校准失败的另一个缘由可能是热模块内一些容器内的荧光污染造成的详见节。数据库治理全部的数据、设置值、用户构造都自动保存在数据库中，推举用户定期为数据库建立备份。留意：不要混淆不同器皿的数据库。Databasetooldatabasedatabasetoolrealplexdatabaseadministration上面的selecteddatabaseDatebasesandArchives实际使用的数据库，其中的数据都是当前存储的。数据库的名字由数据和数据库开头使用的日期组成。在selecteddatabase档案文件数据库都处于只读状态，储存以前的数据。这种数据库由档案和建立数据库的日期组成。在selecteddatabase假设选中功能startrealplexrealplexselected假设选中功能startrealplexrealplex当前数据库的自动保存打开realplexC:\programs\eppendorf\realplex\securityconfiguration留意：只有治理者用户才有权力使用图表configuration设置自动保存。留意：当建立的自动备份超过十个时，最先建立的那个备份将被自动删除。因此，推举定期建立备份。这些备份应当保存在磁板或者效劳器上。当前数据库的保存当前数据库副本的保存可以在图表backupdatabase定，其中包括检测工程、模板文件、校准数据和用户构造。面板显示了哪一个数据库要进展备份和在图表databases都是针对数据库和档案文件操作的。中选中图标browse中选中图标browse时，对话框setbackupfilename当前的数据库将被赐予名称，点击功能键save，将该数据库以gbk形式放置在backup面板上提示的名目下。当点击startbackup功能键时，在目录为了当点击startbackup功能键时，在目录C:\programs\eppendorf\realplex\backup下，建立一个备份文件。该过程被记录在图表log备份被自动保存在名目C:\programs\eppendorf\realplex\backup下。该名目可以在图表configuration中被修改。假设计算机是一个网络中的其中一台的话，建议将此名目设置在效劳器的名目之下。留意：只有治理者用户有权进入图表configurations〔详见章内容。输入数据库在realplex软件中，假设要将原来的数据库的备份激活，当前数据库必需被替换成一个备份文件，具体做法为首先在图表restoredatabase点击图标browse点击图标browse后，显示openbackupfilesstartrestore以后，数据库从名目C:\programs\点击功能键open后，将在图表restorestartrestore以后，数据库从名目C:\programs\realplex\backuplog据库时，要确保全部的校准数据还是有效的。restoredatabase中被加载后，激活复选框createmaindatabasefromarchive执行恢复操作。建议在此之前对当前数据库建立一个备份。密码，并按ok〔请查阅节realplex数据库的归档250MB时，翻开realplex的设定、校准数据和用户构造内容。okrealplex用户登陆后，可以翻开createarchive选中功能键startarchiving后，在目录面板中显示了将要被进展归档操作的数据库，在表databases中选中该数据库。归档名称有软件自动建立，包含有选中功能键startarchiving后，在目录c:\proguamme\eppendorf\realplex\backuplog中。4编程〔检测工程的建立〕mastercyclereprealplexassaysetupanalysis。模块assaysetupplatelayou〔板布局pcr程序和监测系统。前边两个子工程用于检测工程的编辑，而在监测系统之下，运行的检测工程可以被在线的监测。analysis各自使用不同检测工程的两个模块可以并行操作另一个已完成检测工程的分析可以同时进展〔6〕建立一个的检测工程的检测工程可以通过点击file菜单下的newassay次显示的建检测工程没知名字，带有附属项板布局〔platelayout，pcr程序〔pcrprogra〕和监测monitorin。假设附属项其中的一项被选中后，建检测工程显示在右边的工作区内。另外，通过菜单项commands功能键，不同的模块也可以被加载到工作区。翻开软件后，作为默认设置，在工作区内存在一个可用的空白的板布局。建立板布局platelayoutpcr96为了对其进展编辑，首先要确定被检测的染料。为了便利用户，后续操作的各条指令显示在与工作区相邻的右下方的hints区内。为建立板布局，如下的工具栏内的各个功能都是有效的。1清理板2未知3标准4阳性比照5阴性比照1清理板2未知3标准4阳性比照5阴性比照6删除样本7组成复制组8拆分复制组9建立子检测工程10删除子检测工程11板布局的编辑模式11板布局的编辑模式留意：另外，以上各个功能还可以通过菜单工程platelayout染料确实定在此，在带有相关滤光片的filter＋dyes面板上，染料通过组合框被选中。假设所需染料不包含在选项中，必需首先将其添加在菜单栏setup〔请查阅节〕下的列表和校准该染料的〔请查阅节。realplexmastercyclereprealplex2580nm605nm片不会显示在面板上。参考染料的选择参考染料可以在referencedye经执行过了，而且该染料已经在filter＋dyes样本体积输入在工作区面板的右上端的samplevol中输入样本的体积。虽然这项输入并不是必需的，但是为了检测工程文件编制的完整，建议完成该项输入。探针类型确实定首先在setupprobes〔请查阅。留意：pcr为了检测工程文件编制的完整，建议完成该项输入。背景确实定类型。假设所需的板类型不包含在选项内，必需首先执行该背景的校准。样品类型的定义的，通过图标选择不同的样品类型。以上板布局编辑功能也可以通过鼠标右键或者菜单platelayout当各项输入完成后，带有样品类型、样品名称和sample表中的位置等数据的样品就会显示在左边窗口内。在右边窗口的sampleinfo当图标standard被选中后，消灭相关的对话框。当图标standard被选中后，消灭相关的对话框。在板布局中样品的位置样品名称3目标基因选项的复选框3目标基因选项的复选框4目标基因名称5检测目标基因使用的染料6标准浓度单元76标准浓度单元7标准浓度8内部阳性比照〔ipc〕选项的复选框9内部阳性比照〔ipc〕染料选项的组合框10样品类型符号1E8copies＝1可以通过autoseries〔请查阅〕留意：在这个对话框里可以进展编辑的目标基因的数量取决于在板布局中选择的染料的数量。选中position选中positioncontrol除了比照的名称和目标基因的数据以外，在此也可以定义基因识别〔geneidentification〕analysis也可以在amount栏内输入数值。但这在随后的分析中不是确定必要的。中选中negative中选中negativecontrol在此对话框中只输入阴性比照的名称和目标基因数据。未知样品unknown除了未知样品名称和目标基因数据以外autoseries〔请查阅节〕在对话框的下端包括useoftargetgene(s)as面板和relativequantification/geneexpressionuseoftargetgene(s)as：可以通过一个内部阳性比照或者选定相关功能键作为持家基因设定目标基因确定各自的染料。分析中由内部阳性比照或者作为持家基因设定的基因被加亮为黄色。Relativequantification/geneexpression：在此目标基因被定义为relativequantification/geneexpressionmonoplexwellwithhousekeepinggene(monoplexing)持家基因的孔可以与样品关联。孔可以与样品关联。复制和标准系列的自动建立newstandardnewstandardautoseries留意：只有当板布局中超过一个位置被选中后，该功能才能被激活。扩大对话框指明白板布局中被选中的位置，被分为复制和稀释两个区域。复制：成行或者列。为说明的目的，形式显示在窗口preview稀释：使用编辑框来明确稀释元素和稀释步骤数。通过组合框order可以明确承受升序还是降序。previewcalculatedamounts的浓度初始值，显示浓度最终值。留意：这个区域在unknowns扩大对话框中处于不活动状态。点击ok确认该对话框后，在被选区域内建立起与参数数量一样的组数。当用未知样品建立复制时，整个被选区域被填满。样品名称和全部相关的数据都被自动安排示在板布局中。定量的样品类型编制标准系列的例子：了这样的目的，首先编辑板布局中的标准，然后编辑未知样品。阴性比照也要编辑。编制标准系列的例子：目标是建立一个10－100000拷贝的三重复制子的标准系列拷贝的最高数量放置在位置A1－C110在板布局中选择区域A1－E3standardautoseries输入参数ok使得板布局为：未知样品复制编程例子：未知样品复制编程例子：目标是定义未知样品三重复制子目标基因，三倍复制被相邻放置在位置A1－C1上。在板布局上选中区域A1－C1。翻开包含有autoseriesunknown输入各参数。ok使得板布局为：处理的样品中。它们分别与非调控的参考基因〔持家基因〕相比。然后依据方法计算处理的样品中。它们分别与非调控的参考基因〔持家基因〕相比。然后依据方法计算出其表达水平。出其表达水平。全部的样品均作为未知基因进展编辑。全部的样品均作为未知基因进展编辑。plex在多plex分析中，目标基因和持家基因在一个试管内用两种不同的染料进展检测。加工过的样品：在板布局中选择B2－B4unknowntargetgene〔s〕面板选择两个基因。通过在housekeepinggeneuseoftargetgene(s)面板中明确持家基因，用组合框选择相关的染料。ok将位于B2－B4未经处理的样品〔校准器〕在板布局中选择C2－C4区域。unknowntargetgene(s)对话框选择两个基因通过在housekeepinggeneuseoftargetgene(s)面板中明确持家基因，用组合框选择相关的染料。在relativequantification/geneexpression面板中，选中复选框setsampleascalibratorok将位于C2－C4的样品化为一组。处理过的样品：未经处理的样品：样品被编辑完成后，板布局如以下图所示：用作校准器的样品有淡颜色条的标志。plex对于单plex分析，目标基因和持家基因在不同的试管内承受检测，使用同样的染料。处理过的样品：处理过的样品：a〕C2－C4C2－C4unknown持家基因的名称。targetgene(s)面板中输入持家基因的名称。housekeepinggeneuseoftargetgene(s)面板中明确持家基因，用组合框选择相关的染料。okB2－B4将位于C2－C4B2－B4—在板布局中选中unknowntargetgene(s)面板中输入目标基因的名称。ok关闭unknown将位于B2－B4的样品归为一组。在该组内选中至少一个位置，然后在此翻开unknown对话框。通过组合框wellwithhousekeepinggene(monoplexing〔或赋值家基因在此被检测到。选择C2－C4的其中一个包含有持家基因的位置。在计算中，结果将合并分组样品的平均值。ok处理过的样品〔目标基因〕处理过的样品〔持家基因〕未经处理的样品未经处理的样品a)在板布局内选择C5－C7区域。unknowntargetgene(s)面板中输入持家基因的名称。housekeepinggeneuseoftargetgene(s)面板中明确持家基因，用组合框选择相关的染料。在relativequantification/geneexpression面板中，通过复选框setsampleascalibratorok将位于C5－C7b)在板布局中选择B5－B7区域。unknowntargetgene(s)面板中输入目标基因的名称。ok以关闭unknown将位于B5－B7的样品归为一组。在该组内选中至少一个位置，然后再次翻开unknown对话框。通过组合框wellwithhousekeepinggene(monoplexing〔或赋值，其中持家基因在此被检测到。选择C5－C7的其中一个包含有持家基因的位置。在计算中，结果将合并分组样品的平均值。ok样品编辑完成后，板布局如以下图所示：熔点分析中的样品类型在熔解曲线分析中，没有特别需要考虑的方面。终点测定中的样品类型在执行终点测定标准时，阴性比照和未知样品需要被查实。更多细节请查阅节中的内容。+/-检测工程中的样品类型执行一个+/-检测工程时，除了未知样品以外，还需要编辑阳性和阴性比照。样品的复制与剪切该过程中用到的copy,cut和paste命令既可以通过鼠标右键，也可以通过菜单platelayout为复制板布局样品，首先选中样品，然后通过copy命令复制样品到剪切板上。随后在板布局中选中一个位置，再使用pasteCutpaste首先选中一个或者多个样品，然后点击图标delete首先选中一个或者多个样品，然后点击图标deletesamples几个样品的归组假设板布局内的几个样品被加亮后，再选中group图标，那么这些样品就归为了一个除了在节中提到的选项以外，也可以通过将板布局中已存在的样品归为一组的形式建立复假设板布局内的几个样品被加亮后，再选中group图标，那么这些样品就归为了一个组，可以自动进展复制的统计分析了。过再次点击groupasreplicates组可以通过点击ungroup组可以通过点击ungroupreplicates前提条件是这两个检测工程包含有一样的pcrpcr步骤内。在pcr前提条件是这两个检测工程包含有一样的pcrpcr步骤内。假设加亮板布局内的全部子系统的样本，然后选中create假设加亮板布局内的全部子系统的样本，然后选中createsubassay图标，这些样本后进展的检测工程单一样品类型的测定。在程序执行和分析过程中〔请查阅节，子检测工程样品的显示是分别执行的。组可以通过deletesubassay单个子程序和它们在板布局中的位置显示在结点monitoring组可以通过deletesubassaypcrpcr执行，并且在同一个温度步骤中猎取荧光数据。中选中clear中选中clearplate完整检测工程的板布局编辑通过点击edit通过点击editmodeforplate图标，一个完整检测工程的封锁状态的板布局可以再一次被激活。一旦编辑完成，板布局可以通过再次点击该图标被锁住。全部在板布局中并发的转变都会被记录在userlogpcr为编辑pcr程序，工具栏里的全部如以下图所示的功能都是可以用到的：1插入步2编辑步1插入步2编辑步3删除步4去除pcr5显示梯度功能5显示梯度功能66设置测量点留意：以上这些功能也可以通过鼠标右键或者pcrprogram用模板程序建立一个pcr为编辑程序，要先选中其中一步，通过editstep图标弹出对话框，在该对话框中可当向导栏内的子项pcr为编辑程序，要先选中其中一步，通过editstep图标弹出对话框，在该对话框中可以修改温度，时间和循环数等数据。另外editstep对话框也可以通过双击某一步弹出。在这个对话框中还可以对增量，梯度功能，制热和制冷率进展设置〔情查阅〕另外，通过选中对象和添加，温度，时间和循环数等数据也可以在pcr程序中被直接修改。留意：加热盖和热模块的特性可以在programheader〔请查阅节。不用模板程序建立pcr不用模板程序建立pcr程序，首先通过点击clear不用模板程序建立pcr程序，首先通过点击clearpcrprogram程序步的插入和编辑中选中insertstep中选中insertstep当程序步被选中后，它将在光局部的左边被插入。在程序步中，假设要修改其他调整点，可以通过点击editstep图标，在弹出的对话在程序步中，假设要修改其他调整点，可以通过点击editstep图标，在弹出的对话框中可以进展全部其他设置的转变。温度温度步可以在程序的任何位置插入。温度步的主要参数，温度以及保持时间都可以在pcr程序的工作区内显示出来，并且可以直接在这里进展编辑。温度 设定的摄氏温度容许值： 4－99输入步：时间： 以分钟和秒计时的保持时间容许值： 1秒到秒输入步： 1秒温度步的其他附加功能也可以在这个窗口中实现。Tempincr.代表温度增量：编程中到下一循环的温度步温度的增加/削减的量0容许值：0－10输入步：增量在pcr程序步中带有星号：温度增量：＋增量在pcr程序步中带有星号：梯度功能from/totemp和tempincr默认设置不活动温度来源 左模块边的温度容许值 ℃到℃输入步 ℃温度去向 右模块边的温度容许值 ℃到℃选中show选中showgradient可以在参数面板中选中一个热模块。此外，梯度温度也可以在这里输入。pcr梯度温度的最大跨度取决于所使用的热模块〔见技术数据pcrTimeincr.的意思为时间增量：代表了编制温度步到下一循环的保持时间的增减量。默认设置：00：00容许值：00：0001：00输入步：1时间增：+时间减：-pcrpcr代表了温度到达设置值的速率。默认值：100％容许值：175100％输入步：1％对于制热和制冷的规程来说，用光标可以输入不同的ramp值或者移动图中的拉杆。在输入区内就会显示出当前值。制热和制冷率取决于所使用的热模块〔见技术数据值。设置测量点：在相关温度步对话框中，选中复选框setmeasuringpoint测量点通过所使用的探针来定义。这并不是由软件自动设置的。pcr被编辑一次。留意：pcrpcr程序是由重复的pcrpcrpcr。pcr留意：在设置测量点时，应确定时间步的持续时间是足够长的。对于每个滤光片一种染料，816pcr留意：测量点也可以通过图标setmeasuringpoint〔请查阅节。移去测量点，首先需要选中相应的温度步，然后通过editstep对话框或者选中工具栏中的setmeasuringpointsetmeasuringpoint循环〔1－5〕循环命令包含由一个循环内的温度步数量1-默认值：40容许值：199输入步：1保温程序保持温度值为输入温度，始终到pcr程序完毕。默认值：℃故而知容许值：到℃输入步：℃暂停程序暂停，温度值保持为最终温度命令值。当点击startporgram提示音可以发出声音信号，比方提示程序暂停或者程序执行完毕。默认值：9容许值：19〔信号发出次数〕输入步：1熔解曲线熔解曲线insertstepmeltingcurve除了熔解曲线的实际步以外，还包括初始变性步，还有初始温度和最终温度的温度步。为测定熔点需要修正参数，首先选中熔解曲线步，然后点击editstepramp时间：输入建立熔解曲线所需的时间。容许值为5－301量荧光数据。温度区分：输入熔解曲线制热率。容许值为；输入步为℃；加热温度X℃完成以后开头测量荧光数据。pcr终点翻开insertstep温度和持续时间的数据。温度 额定摄氏温度容许值：输入步：℃时间：以分秒计的保持时间容许值：01：00-99：59分：秒输入步：1程序的复制此过程所需的copypastepcrprogram制一个程序步，首先选中程序步，然后使用copy命令将其复制到剪切板上，然后选择pcr程序中的一个位置，使用paste在此，程序步总是在被加亮局部相邻的左侧被插入。首先选中某个温度步，然后点击delete首先选中某个温度步，然后点击deletestep测量点的测定在温度步中，单击〔使加亮〕某步，选择setmeasuring在温度步中，单击〔使加亮〕某步，选择setmeasuringpoint量点了。留意：测量点由所用的探头来定义。并不是由软件直接设置的。留意：在pcrpcr程序是由重复的pcr循环组成的。在每一个pcr循环中猎取数据，但是基于计算的软件却只可以在第一个pcr循环内进展。pcr留意：在设置测量点时，应确定时间步的持续时间是足够长的。对于每个滤光片一种染料，816pcr移去测量点，首先选中相应的温度步，然后通过editstep对话框或者选中工具栏中的setmeasuringpointsetmeasuringpoint热盖设置在程序开头处的热盖设置中，基于相应程序设置掌握策略以及加热盖的性能。加热盖温度：加热盖温度被预设为105℃，并且不能更改。Mastercycler在此可以在热模块mastercyclerep梯度功能和ep梯度功能S选择任何一个都是可以的。它们都具有默认设置。留意：〔增减度范围，制热制冷率。Control该命令用于明确模块温度掌握的调整类型。模块：热模块上的温度经过测量后，设置额定温度〔默认设置。Sim.试管：作为该试管类型的功能，热模块的温度被调整到试管和样品的温度。Tspheatedlid只有当加热盖温度值到达时，pcr程序才开头启动。假设没有选择这个功能，那么pcr程序将在程序开头后直接启动。Switchofflidatlowblocktemp37℃以下持续了多于5分钟，那么加热盖将被自动关闭。假设没有选择这个功能，那么加热盖只有在程序完毕时才被关闭。留意：37℃，并且功能switchoffladatlowblocktemp处于不活动状态。SimulatemastercyclergradientpcrpcrSimulatemastercyclergradient允许mastercycler证已建立程序的简洁转换。这个设定允许对mastercycler梯度的温度掌握性能进展仿真，并由此，在对mastercyclereprealplex无进一步优化的状况下，建立起一个通用的mastercycler具体做法为，在pcr程序下的assaysetup中输入mastercycler梯度的pcr程序标题中激活复选框simulatemastercyclergradient。保存后，程序可以不经过对参数的再次优化，在mastercyclereprealplexImpulse具有银模块的设备〔热模块mastercyclerep增减度S，可以通过impulse加热的过程。假设选择其他模块或者选中simulatemastercyclergradient功能处于不活动状态。操作〔监测〕样品的加载mastercyclereprealplex96pcr96pcr起来。在使用试管时，为了保证加热盖的均匀受压，建议在热模块的每个角放置一个试管。其它的各个试管也应当在模块内均匀的分布开。记住在进展实时pcr〔请查看分类信息。达标的试管〔约12℃。对于密封pcr板的盖子来说，也具有同样耐热约束。留意：个角上。留意：pcr板应当只在边上使用标签，由于标签也有可能具有荧光性。模块温度掌握为，首先在realplexsystemconfiguration对话框下的cycler盖子〔请查阅节。留意：在程序开头时，各自程序的设置都有优先级别。在一个程序正在执行时，不能启动单独的热模块温度掌握。样品体积之间。pcr程序的程序标题中，可以在温度掌握模式blocksimtube〔请查阅节。在检测工程96pcr10ul100ul之间。启动检测工程然后，程序开头启动。选中startcurrentcycler选中startcurrentcyclerprogram过菜单项command检测工程开头运行后，显示出startpcr存在背景板的状况下重选择一个背景板。这个动作将被记录在报告中〔请查阅节。假设在pcrmonitoring〔请查阅节。荧光强度在此显示为循环数和时间的函数。下面为随时间变化的温度分布图。当复选框legendplexshowdyes可以选择某染料。单个样品的选择全部的样品都被列在samples下的向导栏内。各自的样品类型。为便利给样品安排荧光曲线，荧光曲线的颜色也在该表中显示出来。品并同时按住<shift>键时，上面的样品首先被加亮，然后是下面的样品。假设被选中的样品不是相邻的，在选择的过程中，应当同时按住<ctrl>键。各个样品类型的选择showsampletype/隐蔽，激活或停顿各个样品类型。循环仪状态启动以后，马上在cyclerstatusmonitoringpcr全部信息。在状态显示中，可以监测到正在运行的程序的进展状况。面板左边的栏中显示当前的循环，还有当前的温度步和温度步的持续时间。Cyclerstatus面板的右边栏供给了当前运行的pcrmonitoring模式转变到pcr程序模式，还可以看到pcr色。当前运行检测工程的中断pausecurrentpausecurrentcyclerprogram然后状态将显示为pause。程序可以在任何时刻连续运行下去〔请查阅节〕或者终止〔请查阅节。连续运行检测工程然后通过start然后通过startcurrentcycler当检测工程连续运行后，状态中显示running。点击pause当检测工程连续运行后，状态中显示running。点击pausecurrentcyclerprogram当随后点击abortcurrentcyclerprogram在状态中将显示idle信息。mastercyclereprealplex的pcr在状态中将显示idle信息。mastercylereprealplex也可以只作为热循环仪来使用。具体做法为，翻开一个的检测〔请查阅节assay－setup中只建立了一个pcr〔请查阅节pcr状况下不设置测量点。Pcr留意：板布局保持空白，不选择染料，否则在开头启动时，会提示出错信息。mastercyclereprealplexmastercyclereprealplex可以独立于pcr，而用来做荧光测量。在这种状况下，只执行终〔请查阅节〕必需谨记进展该测定，必需进展背景校准。另外，对待检测的染料也必需进展颜色校准。留意：校准时，模块和加热盖的温度必需和随后的荧光测定条件相全都。关闭mastercyclereprealplex然后关闭软件，关闭计算机，关闭设备。假设已经计算数据，那么不妨保存检测工程，原始数据将被自动保存。留意：当mastercylcereprealplex关断时，realplex块受到污染。留意：在两个都在运行时，密封夹应当处于开锁位置。分析当检测工程被第一次通过openassay留意：当运行一个检测工程时，可以在analysis下分析这个已完成文本〔请查阅节〕在向导栏的相应结点下查看板布局和pcr程序的相关信息，同时对应的检测工程也显示在assaysetup概要翻开检测工程openassay检测工程被翻开后，在右侧的工作区，analysis下将自动显示出原始数据。这些数据是检测得来的荧光值或在进展背景和颜色校准时设置的荧光值模式而有所不同，将在不同分析模式评估的各个章节中具体介绍。翻开一个正在运行的检测工程当前运行检测工程的数据猎取过程中，可以分析已经完成的文本。具体做法是，在assays评估这个检测工程。在点击ok确认以后，这个检测工程将显示在analysis留意：在当前运行检测工程的数据猎取过程中，不能查看已完成检测工程的板布局或pcr程序信息。翻开子检测工程假设子检测工程在板布局中被定义过，那么在analysis下，将显示为单独的结点。名称subassayB2－G3指明白其在板布局中的位置。当一个子检测工程被选中时，只有与该子检测工程相关的数据被加载到工作区内，并在此进展分析。子检测工程全部的分析都将被储存在assay下。单个检测工程的选择在向导区samples下，列出了全部的样品。展为一个结果表。时，首先〔用鼠标〕加亮最上面的那个样品，然后同时按住<shift>键再加亮最下面的那个样品。当要选择不相邻的几个样品时，在选择过程中，需要按住<ctrl>键。通过双击样品表中的每列的首部，可以转变样品的挨次。使样品处于不活动状态analysis下的样品表中选中一个或者几个样品，然后点击鼠标右键，选中deactivatesample(s)功能键就可以了。不活动的样品在样品列表中样品类型上被标了一个叉。鼠标右键，选择activatesample(s)功能。单个样品类型的选择为了显示或者隐蔽工作区中的某个样品类型的曲线，通过相应的复选框，在showsampletype分析模式的选择typeofapplication在工作区内显示出相应的数据。另外，在右边选择legend，则图例会被插入进来。留意：假设选项中没有所需的分析模式，那是由于在板布局中没有进展该分析模式的设定。随后板布局的更改可以在editmodeforplatelayout模式下进展〔请查阅节。分析模式不行用，也有可能是由于在pcr更改。plexdyealldyes地显示一个或者全部染料的数据。图标缩放通过unselect通过unselectzoomfunctions通过zoomin通过zoom通过zoomout中选中unzoom图标时，被选的图表可以显示为默认大小。unselectzoomfunctions可以是图表大小恢复默认值。选中这个功能键后，可以存储参数发生转变的默认设定。存储默认设置选中这个功能键后，可以存储参数发生转变的默认设定。图表的保存和复制图表的保存和复制假设此时选中命令savechartasmetafilepictureemfwindows<windowspictureandfaxviewer>程序，图表可以被保存为其他图形格式，或者转换成编辑程序<windowspaint>的图形。Copycharttoclipboard样品数据的保存和复制样品数据的保存和复制edit另外，用光标选中向导栏中的表samples，弹出相应菜单，然后通过鼠标右键将其翻开。copysampledata插入到其他文件中。Savesampledatatxt格式保存samples编辑报告另外，通过图标printreport同样可以翻开report屏幕上，或者通过打印机打印出来，或者以pdf格式显示为可打印文件。在菜单file另外，通过图标printreport同样可以翻开report通过查看data面板中的各个复选框，用户可以选择将要在报告中列出的数据。其中包括概中上面的复选框不活动。留意：只有由用户执行过并在analysis下具有相关数据记录分析，或者由用户之前保存过的分析，才可以被选择。当至少一个打印机与计算机相连时，才可以使用功能键preview，printexport。另外，通过功能键edit，同样可以翻开edit另外，通过功能键edit，同样可以翻开editheader&footer通过该图标，可以删除掉已经在companyiconfor通过该图标，可以删除掉已经在companyiconforreport该功能键被选中后，标志被加载到companyiconforreport只有bmp该功能键被选中后，标志被加载到companyiconforreport模板报告的应用具体用户的模板报告可以在reporttemplate修改完报告以后，使用这个功能键来翻开savetemplate修改完报告以后，使用这个功能键来翻开savetemplate通过选中该图标，可以删除模板报告。使用模板报告来预备报告，需要在reporttemplates面板中用复选框selecttemplatereportconfiguration通过选中该图标，可以删除模板报告。分析的保存假设在一个检测工程中对所得数据进展分析，在翻开另一个检测工程或者关闭检测工程时，使用者会被自动提示保存设置。这个同样应用于现存分析发生更改时。调用分析当要翻开一个已保存分析的检测工程时，在analysis模式下，原始数据首先显示在工作区中。假设在组合框typeofapplication定。定量完成一个检测工程，或者翻开一个已完成的检测工程时，原始数据将在analysis下被加载到工作区。在此，荧光强度显示为循环数和时间的函数。下面显示随时间变化的温度图形。当在组合框当在组合框typeofapplicationquantification式。假设想要数据以线性显示，则必需使功能键logscale首部同样显示出datasource栏，指明白所示的分析是以哪个数据源作为根底的。根本上来说，共有三个不同的数据源：终点测定，pcr数据以及熔解曲线分析。分析中应用的数据源是在设置检测工程中被确定下来的。留意：只有在基因测定和+/-检测工程的分析模式中才可以在datasource据。阈值确定阈值确定阈值用于确定样品的CT值。在此CTPCR期得到的数据点，在右边区域被用来确定阈值。threshold按钮noiseband上，从而测定该阈值。Noiseband使用功能键bestR^2，软件在某区域内找出阈值，在此区域内，标准的全部曲线都具有一度，该功能才能被激活。中选中manually按钮时，阈值通过手动输入一个荧光值来确定。也可以通过使用鼠标左键在图中移动阈值。基准线测定基准线测定在面板baselinesettings基准线自动计算是默认设定，在该状况下，对每一个样品都单独计算出优化的基准线。为调整基准线，选中manualbaselinecyclerange。315另外，基准线偏差可以在这个面板上，通过driftcorrection的曲线产生同等的影响。留意：在这个面板上设置的一切设定都会影响到曲线外形和CT值。标准曲线标准曲线软件自动使用标准的CT值计算标准曲线，在该曲线上，CT值是使用核酸总量的函数。在板布局中编辑标准时测定标准浓度单元。斜率：标准曲线的增量效率：pcrE效率：pcrE1R^2：标准曲线相关系数标准曲线的测量值被标上红色小方块的记号，而未知样品则被标上黑叉的记号〔见上。假设在样品表中选择了某标准，那么相关的测量值在标准曲线上被标上黄色方块的记号。在板布局中确定样品的位置。为简化工作，样品依据其类型还被标上符号。样品名称CT在板布局中确定样品的位置。为简化工作，样品依据其类型还被标上符号。样品名称CT假设选中未知的某个样品，则在标准曲线中，测得的CT值和未知样品的相应的浓度显示为红色的线。分析标准曲线可以另用户通过具体的CT值，推断出未知样品的最初核酸总量。结果由软件自动标准曲线可以另用户通过具体的CT值，推断出未知样品的最初核酸总量。结果由软件自动加以计算，并显示在表sample/analysis中。内部阳性比照最初的核酸总量，由用户依据标准确定。依据未知样品以及阴性比照，该值当在复制中测定未知样品时的平均值由软件基于标准曲线计算得出。内部阳性比照最初的核酸总量，由用户依据标准确定。依据未知样品以及阴性比照，该值当在复制中测定未知样品时的平均值当在复制中测定未知样品时的偏差留意：只有在板布局中定义过复制时，才会有此项当在复制中测定未知样品时的偏差目标基因〔在编辑样品时的板布局中确定其名称〕留意：只有在板布局中定义过复制时，才会有此项。目标基因〔在编辑样品时的板布局中确定其名称〕留意：样品次序可以通过双击样品列表每列的首端来转变。multiplex分析在多plex分析中，不同的基因被并行进展定量，每个基因都要建立一个单独的标准曲线。在上端的面板中用组合框dye当在组合框dye能同时显示标准曲线。相对定量相对定量相对定量法基于方法，这个方法用于比较一个目标基因在不同处理下的不同表达水平。相对于一个非调整的参考基因〔持家基因〕pcr效率为条件的，比较目标基因和参考基因的扩增值，并且在两种状况下〔E＝1〕作出优化。相对定量法基于方法，这个方法用于比较一个目标基因在不同处理下的不同表达水根本上，在进展多plex分析和单plex分析时，都可以执行相对定量。在进展多plex记。多plex分析中，根本上可以测定大约三个不同的目标基因和一个参考基因。而对于单plex分析来说，目标基因和参考基因在两个不同的试管中进展检测，探针上也只标有同一染料。翻开检测工程以后，原始数据被加载到工作区。它们与分析模式quantification的数据有由方法计算的样品表达水平由方法计算的样品表达水平然后通过组合框tpyeofapplication阈值的测定dye关于阈值测定的更多信息请查阅节。plex分析的估算被列出。另外，对处理过的样品，同时计算出了其表达水平，该计算基于方法。依据在结果列表sample/analysis中使用的染料，每个样品的目标基因和持家基因的CT值被列出。另外，对处理过的样品，同时计算出了其表达水平，该计算基于方法。确定样品在板布局中的位置。为简化起见，样品依据各自的样品类型，还被样品名称目标基因的CT确定样品在板布局中的位置。为简化起见，样品依据各自的样品类型，还被样品名称目标基因的CT〔在此：fam〕plex持家基因的CT〔在此：vic〕持家基因的CT〔在此：vic〕熔解曲线分析熔解曲线分析熔解曲线分析一般都在一个pcr品的荧光强度执行。在这个过程中，测定一个pcr产品的熔点温度T〔如：标记上sybr－绿，或者通过特定的探针，测定所得混合物的熔点温度。在完成一个检测工程，或者翻开一个已经完成的检测工程之后，原始数据就会在analysis为了分析熔点，首先在组合框typeofapplication中，选中meltingcurve度值前的最大值。〔〔代表了其最顶峰值。最大峰值消灭的位置对应当产品的熔点温度。这个位置由软件测定后标上垂直线。阈值的测定33％。另外，阈值也可以通过手动移动红线来转变。在右边的阈值输入处被读取。分析由软件测定的样品的熔点显示在sample/analysis列表中。确定板布局中样品的位置。为简化起见，样品依据其各自样品类型被标以符样品名称说明熔点是否被识别，以及识别熔点的个数号。确定板布局中样品的位置。为简化起见，样品依据其各自样品类型被标以符样品名称说明熔点是否被识别，以及识别熔点的个数由软件测定的样品熔点的峰值，在样品列表中将没有输入。在这种状况下，分析可以通过手动进展。由软件测定的样品熔点终点测量终点测量是通过在pcr程序中包含endpoint步来实现的。在这里，数据猎取发生在pcr数据建立之后，但也可以在pcr〔请查阅〕当完成一个检测工程或者翻开一个已经完成的检测工程后，在analysis下，原始数据被加载到工作区内。在这里，荧光强度显示为时间的函数。以下图是温度随时间变化的曲线。在组合框typeofapplication中选中endpoint，则在使用单一试管时，pcr义的复制被标上了带颜色的三角形标记〔请查阅。假设在板布局中，样品被定义了阴性比照，那么通过激活在面板general复选框subtraction，在全部其他测量值中扣除阴性比照的荧光值。当有多余一个阴性比照时，被减掉的是它们的平均值。在列表samples/analysis中列出了全部的测量值。标准曲线显示出来。在板布局编辑标准时打算其单元。slope：标准曲线斜率Y－intercept：标准曲线与YR^2：标准曲线的相关系数标准的测量值被标上了红色的方块，而未知样品的测量值则被标以黑色的叉。分析标准曲线用来对未知样品或者阴性比照计算每个已测荧光值总量。它们显示在samples/analysis确定板布局中样品的位置。为简化起见，样品依据其样品类型被标以符号。确定板布局中样品的位置。为简化起见，样品依据其样品类型被标以符号。样品名称。核酸初始量，由用户依据标准确定。对于未知样品和阴性比照，该值由软件终点测定过程中测得的样品荧光强度。依据标准曲线计算得出。样品名称。核酸初始量，由用户依据标准确定。对于未知样品和阴性比照，该值由软件终点测定过程中测得的样品荧光强度。复制状况下测定未知样品的平均值。留意：只有在板布局中定义了复制，才复制状况下测定未知样品的平均值。留意：只有在板布局中定义了复制，才复制状况下测定未知样品的标准偏差。留意：只有在板布局中定义了复制，才是处于活动状态的图标。+/-检测工程在+/-assay分析模式下，可以分析终点测量的数据或者一个pcr。当翻开一个检测工程时，在右边的工作区内将因此显示出pcr运行的原始数据以〔或者进展终点测定的原始数据。将终点测定作为数据源的+/-检测工程分析模式假设在组合框typeofapplication+/-assay，并在组合框datasourceendpointdata，则将在板布局的全部安排的位置中显示出带状的断电测量的荧光数据。在这里，复制组被标以带颜色的三角符号〔请查阅节。阈值的测定对阈值的测定可以定义出样品是取正值+〕还是取负值-general中明确阈值的类型。阈值在pcrthreshold被选中时，可以在面板thresholdsettings结果也可以通过输入数值或者通过移动标尺来实现最大值相关。阈值的位置被标以红色线：留意：假设转变阈值的荧光值，将导致正负分类结果的转变及其推论结果的转变。假设样品在板布局中已经定义为阴性比照，则要通过激活复选框substraction，在全部其其平均值。pcr+/-assaydatasource下的pcrdatatypeofapplication+/-assay，则荧光曲线将显是在右边的工作区内。阈值测定多具体信息清查看节。位于上边面板的view功能键可以用来显示工作区中的结果。位于上边面板的view功能键可以用来显示工作区中的结果。在已安排的板布局中，结果显示为颜色不同的，高度全都的条。图标符号显是在面板+/-result中。除了正负结果，不确定结果也显示出来。不确定代表了那些位于阈值范围内的样品，这些样品被标上了inconclusive。假设没有阈值范围，而只确定了阈值，那么不行能有被标上inconclusivesamples/analysis+/-result[dye]列中，列出了样品的正值，负值和不确定值的描述。中选中这个功能键以后，终点测量或者pcr中选中这个功能键以后，终点测量或者