紫外分光光度计及液相色谱仪的原理及使用

先决条件是什么?1、紫外线光谱产生原理：紫外－可见吸取光谱是物质中分子吸取200-800nm光谱区内的择吸取的特性。吸光光度法就是基于这种物质对电磁辐射的选择性吸取的特性而建立起来子对光产生吸取，即产生了分子吸取光谱。〔激发波长〕辐射能被激发后，电子以无辐射方式从高激发态跃迁至第一电子激发态的最低振动能级并释放局部能量放另一局部能量，该辐射能〔光〕即为荧光，其波长为放射波长，而产生的光谱即为荧光光谱。2、荧光光谱特点：以荧光强度对激发波长作图，得到激发光谱；同样以荧光强度对放射波长作图得荧光光谱。激发光谱与放射光谱的图形几乎是镜面对称。基于物质吸取光后仅释放局部能量来放射荧光，故放射波长大于激发光波长荧光波长是不变的，光谱的外形与激发波长大小无关3、产生荧光光谱的先决条件是：具有较强的紫外-可见光吸取具有肯定的荧光效率二、1、在紫外-可见光测试中所用的比色杯与荧光测试时用的比色杯有何不同？在紫外-可见光测试中所用的比色杯为两面透光，荧光测试为四周透光2254nm，另一500nm，这两种物质分别可选用哪几种比色杯？玻璃：320nm以上 石英：≥210nm其次种物质两种比色杯都可以用，第一种物质则只能用石英比色杯。3、如何清洗比色杯？① 使用后用所装的溶剂冲洗，里外都要洗。假设溶剂无毒，可装入一半，用手按住杯两端摇摆，清洗不少于三次。② 之后在用大量自来水冲洗。这一步对水溶液和盐溶液格外重要，假设溶剂不亲水，该步可放弃。③ 可以用去离子水清洗，里外都要洗。假设溶剂不亲水，该步可放弃。④ 无水渍。⑤ 假设被严峻污染，可用稀盐酸或厂家供给洗剂清洗。⑥留意事项：勿用超生波清洗〔假设确实需要，应使用专用超声波，毛面对下，使用完后立即清洗，避开洗液三、简述液相色谱仪在使用过程中主要留意事项与简洁维护〔可以从流淌相溶剂、色谱柱、进样针与仪器与色谱柱的清洗等方面分别简述。留意事项：①水相中的水须是超纯水0.45或0.22μ过滤膜过滤并脱气。③每两天更换或过滤溶剂，避开使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。④常常清洗贮液瓶，避开直接日照；四氢呋喃及醚类溶剂、水、缓冲液放在棕色瓶中为宜，以防光照变质，及长菌。常常清洗过滤头。⑤样品的检测波长至少大于溶剂的截止波长20nm；用流淌相或比其弱的溶剂解样品；在不影响分析条件的状况下，进样量尽可能要小。PH间使用柱子，分析样品时留意柱子的正反，不能反冲柱子。0.45或0.22单位的微孔滤膜过滤。简洁维护：①保证仪器、储液瓶、输液管路的清洁。②保证溶剂的相溶性③用0.45或0.22U滤膜过滤流淌相、脱气。④常常检查进样针，定期清洗或更换进样针，以确保进样的准确性⑤用0.45或0.22U⑥仪器使用完毕，用有机相冲洗整个系统。如流淌相中含有酸、碱或盐类，需先用5%或与流淌相一样比例的水与有机溶剂冲洗整个系统至少30至45分钟，然后再用有机相冲洗整15⑦定期清洗整个系统，检测各种性能，并做好维护保养工作。四、气象色谱仪由哪几局部组成，气象色谱柱在何时需要老化，如何老化及留意点？构造：①气路系统②进样系统③分别系统④检测系统⑤记录系统何时需要老化：①的未使用过的色谱柱②经从仪器上拆卸下来，在下一次使用之前③色谱图分别不佳，消灭特别〔在排解其他状况下〕老化步骤：①通常在室温下先通载气，以赶走柱内的空气②以较低的初始温度缓慢程序升温至最高使用温度，持续一段时间，老化色谱柱2-3次，或在较高的温度下老化更长的时间〔低于柱最高温度，或过夜〕留意事项：①载气的流速不易过大②温度低于柱的最高温度③不能用氢气做载气，以防爆炸④不能同时与检测器相连五、大型仪器优良的试验操作包括哪几点？① 保持试验室干净与清洁包括清洁的仪器、导管、容器、量器、样品、流淌相等。② 选择符合要求的溶剂、试剂、气体、比色杯及留意溶剂的相容性。③ 初次使用仪器，须在专职教师指导下进展操作，经教师认可后，放能独立进展操作。④ 严格依据标准操作规程SOP，进展仪器操作，不经允许不得拆卸仪器的相关部件。⑤ 使用完毕后，关闭