大规模核酸检测经验分享(郝崇华)

大规模核酸检测经验分享郝崇华目录•

1.检测前•

2.检测中•

3.检测后•

4.意外事件/事故处理流程•

5.持续改进•质量保证及其关键环节:•

检测前：标本的采集、运送和保存，试剂和耗材的准备、防护用品的准备、大规模核酸检测方案•

检测中：试剂的配置、核酸提取、扩增检测•

检测后：结果分析与报告、医疗废物的处理1.检测前大规模核酸检测方案的编制•

1.科室管理和流程协调组:

负责人员的安排调动，协调各组联动，解决过程出现的问题并记录。•

2.技术组：负责样本接收、样本检测、结果报告过程的质量监督和质量控制，随时向管理组报告过程发现的问题，并记录过程。•

3.样本接收组：负责样本接收工作场所的安排、原始样本接收流程安排、样本移交流程安排、记录安排、场地消杀安排。1.检测前大规模核酸检测方案的编制•

4.检测组：按照要求完成核酸检测和结果报告，依照医疗废物管理条例负责临床样本的储存、保留和处置。•

5.保障组：负责现场设备、试剂、耗材、防护用品、支持文件的配给、维持秩序、生活安排、信息系统协调等。•

6.感控组：监督跟踪生物安全防护、设施和环境安全控制、职业暴露应急处置等。标本的接收：•

1.标本送到检验科，与送检人员核对标本数量及信息，并签字确认。•

2.标本的编号：穿隔离衣，戴防护镜、戴N95口罩在生物安全柜内编号，编号规则：按每批90个标本编号，1-1-90，2-1-90，3-1-90（1-90，101-190，201-290）等。同时每排8个放置在专用试管架上。•

3.标本的交接：编号完成后与检测人员交接并做好记录。•

4.标本的保存：核酸检测的标本应尽快进行检测，能在

24

小时内检测的标本可置于

4℃保存；24

小时内无法检测的标本则应置于•

-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。•由于大规模筛查标本并且量非常大，并且一旦发现异常标本，需要迅速准确无误地在几千标本中找出该样本，进入复检和上报程序，这就需要标本的唯一编号清晰且适合抓取，同时也方便检测人员流程记录表的书写。检测前的准备•

1.大批量核酸检测需要大量试剂和加样枪吸头，可以在PCR外围把试剂和加样枪吸头包装盒拆除；•

2.2名工作人员穿戴好二级防护后，进入I区试剂准备区配置试剂；•

3.2--8名工作人员穿戴好三级防护后，进入II区样本制备区进行核酸的提取；•

4.I区工作人员完成试剂配置后，进入III区进行核酸扩增。•

5.人员安排考虑不同实验室人员储备、提取仪和扩增仪的数量等。试剂的配置可以提前(当日)2.检测中•

标本准备区：•

在提取核酸时，标本号与提取板的编号要一一对应，同时填写对应的流程表。提取板、标本按顺序整齐摆放，以便异常结果标本第一时间复查。结果出来后才能处理标本和提取板。同时与下一班做好交接记录。每次提取结束后，用75%酒精擦拭提取仪内部，并至少10分的紫外灯照射。工作结束后用75%酒精擦拭生物安全柜、台面。用0.2%有效氯溶液擦拭地面。开紫外灯照射120分钟，打包带走所有的医疗废物。2.检测中•

扩增检测区：按标本准备区传送过来的流程图布板扩增，同时记录结果及阴性、阳性、质控记录。用自封袋装扩增产物，工作结束后用75%酒精擦拭扩增仪、台面。用0.2%有效氯溶液擦拭地面。开紫外灯照射60分钟，打包带走所有的医疗废物。3.检测后•

每组的实验结果由组长检查原始扩增结果，组员负责提交检验结果，组长审核报告。3.检测后•

结果上报及复检原则

每板结果出来后，首先参考扩增试剂说明书判断阴性对照、环境评价和阳性对照是否在控，若失控需立即查找原因，并整改。

在阴性对照、环境评价和阳性对照均在控的情况下进行结果分析，若有内参未检出的标本，立即原管复检；若出现

ＯＲＦ１ａｂ

或

Ｎ

基因单靶位点阳性则不上报，立即使用双试剂复检；若

ＯＲＦ１ａｂ

及

Ｎ基因双靶位点阳性第一时间上报，同时立即双试剂复检。

在记录流程表时，填写复检标本的孔位，初始

Ｃｔ

值及复检

Ｃｔ值，并做好交接班记录。3.检测后医疗废物的处理：1.试剂准备区和核酸扩增区的医疗废物，样本制备区的核酸提取板，双层扎袋，鹅口扎好，外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液喷拭后运输至医疗废物存放点。2.标本制备区的医用防护服、标本放入双层医疗废物袋中，外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液喷拭后运转到高压灭菌间，高压灭菌后双层扎袋，鹅口扎好，运输至医疗废物存放点。利器盒直接封口后外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液喷拭后运输至医疗废物存放点。4.意外事件/事故处理流程•

标本溢洒的处理流程•

当出现标本溢洒时，首先在溢洒区域铺上纱布（完全覆盖），而后用0.5%的含氯消毒液喷洒在纱布上，作用

３０

ｍｉｎ

以上，再将纱布小心移除。清理过程中避免接触污染物，清理的污染物按感染性废物处置。

清除污染物后，用