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文档简介

苹果无病毒苗的繁育主讲人：于强波主要内容苹果病毒病危害脱毒方法010203脱毒苗鉴定04脱毒苗快繁技术05苹果病毒病种类苹果病毒病种类一、一、苹果病毒病种类苹果花叶病毒01一、苹果病毒病种类苹果锈果类病毒02一、苹果病毒病种类苹果褪绿叶斑病毒03一、苹果病毒病种类苹果茎痘病毒04一、苹果病毒病种类苹果茎沟病毒05苹果病毒病危害二、苹果潜隐性病毒的带毒率高达40%～100%，且多为数种病毒复合侵染。病毒病导致苹果生长势下降、品质变劣，产量降低。二、苹果毒病毒危害脱毒方法三、选择品种纯正、生长健壮、高产优质成年树的接穗嫁接于砧木上。三、脱毒方法01接穗发芽后在生长旺季，将植株置于38℃条件下生长25～50d。三、脱毒方法02选取新梢顶部1～2cm进行消毒（消毒方法一般为先用70%～75%的酒精浸泡30s左右，再用10%的次氯酸钠溶液浸泡10～15min或用0.1%升汞液浸5～7min，最后用无菌水洗3～5次。）三、脱毒方法03切取消毒过的0.1～0.3mm的微茎尖（带2个叶原基）接种在诱导培养基上。三、脱毒方法04先在25～30℃、光下培养7～10d，当茎尖膨大转绿后再转入暗培养，能够加快茎尖的生长，形成黄化苗。三、脱毒方法05一般在暗培养中增殖2～3代，随后将黄化苗再转入光下培养，光照强度1500～2000lx，使苗变绿且生长健壮。三、脱毒方法07脱毒苗鉴定四、主要采用双重芽嫁接法嫁接在指示植物上，操作简单；选择在温室内鉴定，10周左右可完成。四、脱毒苗鉴定指示植物检测法01四、脱毒苗鉴定检测速度快，能够同时进行多种样品的检测，但目前仅能鉴定苹果花叶病毒、苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒，而且经其检测为阴性的样本，还要通过指示植物检测法来最后确定。酶联免疫检测法02脱毒苗快繁技术五、01继代增殖从已确认脱毒的苹果试管苗上切取茎段，接种到培养基上，诱导产生丛生芽苗。每4～8周继代1次，每个月约可增殖5～10倍。02生根培养切取2cm以上的带顶芽的茎段，转接到生根培养基中。也可以不通过生根培养，直接将芽片嫁接到已无病毒的苹果矮化砧木上，进行微嫁接培养。02生根培养对生根困难的苹果砧木M9的试管苗生根，可以先接种在LS＋IBA2mg/L＋根皮酚162mg/L的培养基上培养4～7d后，再转入无激素的LS培养基，这样生根快而频率高。03驯化移栽苹果脱毒苗形成发达根系后，遮光炼苗2～3周；然后沙培驯化，沙培期间可浇灌1/4MS＋IAA1～1.5mg/L的营养液，保持相对湿度80%以上，温度15～20℃，光强1500

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