卫生化学 ppt课件 荧光分析法

荧光分析法营养学教研室：周丽二0一五年十一月Contents概述基本原理荧光分析仪器荧光分析方法与应用原子荧光分析法磷光分析法简介练习题分子荧光分析法光致发光：指物质吸收光子（或电磁波）后重新辐射出光子（或电磁波）的过程。荧光：物质吸收紫外或可见光后，从第一激发单重态的最低振动能级去激发回到基态所发出的光。磷光：物质吸收紫外或可见光后，从第一激发三重态的最低振动能级去激发回到基态所发出的光。第五节原子荧光分析法概述基本原理原子荧光光度计一、概述二、基本原理练习题一、名词解释荧光效率荧光荧光光谱荧光熄灭二、填空题1.

荧光分析法和紫外可见分光光度法相比较，前者测定的是

光的强度，后者测定的是

光的强度。（发射、吸收）2.激发态分子将能量转变为热能而回到基态，这一无辐射失能过程称为

。（无辐射跃迁）3.荧光分析中，溶剂分子吸收光能后，跃迁到

能级，在极短时间内返回到原来的振动能级而发射出和

相同波长的光，这种光称瑞利散射光。（较高、激发光）4.

受溶液pH影响的荧光物质一般是

或

物质。（酸性、碱性）5.荧光定量分析公式为F=KΦI02.3abC，应用此公式的限制条件是

。（A≤0.05）6.测定荧光的仪器需有两个

，第一个放在光源和液槽之间，其作用是

；第二个放在液槽和检测器之间，以滤去

，让

通过。（单色器；得到合适的单色激发光；反射光、散射光以及杂质产生的荧光；待测物荧光）

7.荧光分光光度计的主要部件有

、

、

、

。（激发光源、样品池、单色器、检测器）

8.

常遇到的荧光熄灭剂有

、

、

、

等。（卤素离子、重金属离子、氧分子、硝基化合物）

9.荧光分析法中

光谱是选择激发波长的依据，而

光谱是选择荧光光谱的依据。（激发、荧光）

10.荧光分析中，其它实验条件不变，当温度升高时，该荧光物质发射出的荧光强度

。（降低）

三、选择题

1.对分子荧光强度的测量时，要在与入射光成直角的方向上检测是由于

A.荧光是向各个方向发射的B.只有在和入射光方向成直角的方向上才有荧光

C.为了消除透射光的影响D.克服散射光的影响

2.荧光法中，荧光效率的计算式是

A.=发射荧光的电子数/吸收激发光的电子数

B.=发射荧光的光量子数/吸收荧光的光量子数

C.=发射光的强度/吸收光的强度

D.=发射荧光的光量子数/吸收激发光的光量子数

3.

处于第一电子单线激发态最低振动能级的分子以辐射光量子的形式回到单线基态的最低振动能级，这种发光现象称为

A.分子荧光B.分子磷光C.化学发光D.拉曼散射

4.荧光光度计中第一滤光片的作用是

A.消除杂质荧光B.得到合适的单色激发光

C.消除激发光产生的反射光D.消除瑞利散射，拉曼散射

5.荧光物质的荧光光谱和它的吸收光谱的形状是

A.相同B.相同且重叠C.对称D.相似且成镜像

6.比较荧光物质激发光谱的波长和其发射光谱的波长

A.相同B.不同C.前者稍长D.前者稍短

7.荧光物质的分子一般都含有

A.离子键B.共轭双键C.氢键D.金属键

8.下列哪种光的峰位与激发光波长无关

A.瑞利散射光B.拉曼光C.仪器表面的散射光D.荧光

9.激发光波长固定后，荧光波长与荧光强度的关系曲线称为

A.吸收光谱B.激发光谱C.荧光光谱D.分子光谱

10.荧光波长固定后，激发光波长与荧光强度的关系曲线称为

A.荧光光谱B.激发光谱C.发射光谱D.吸收光谱四、简答题

1.简述影响荧光效率的因素。

影响荧光效率的因素包括荧光物质本身的分子结构及外部影响因素。（1）分子具有共轭双键、刚性平面结构有利于产生荧光，取代基效应影响荧光效率；（2）影响荧光强度的外部因素有温度、溶剂、溶液pH值、散射光、荧光熄灭。

2.荧光定量分析为什么要在很稀的溶液中测定？

（1）荧光定量分析公式为F=KΦI02.3abC，此公式成立的前提条件是A≤0.05，要求是很稀的溶液；（2）浓度高时，会产生荧光熄灭。

3.与紫外可见分光光度法相比，荧光分光光度法具有较