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文档简介

生物化学一、DNA复制的起始

1.复制起始的酶类：（1）在拓扑异构酶、解螺旋酶及单链DNA结合蛋白等的共同作用下，DNA解旋、解链，形成复制叉。

（2）依赖于单链模板，由引物酶催化按碱基配对规律合成一小段RNA引物(原核细胞引物长50-100个碱基，真核约10个碱基)。5´3´3´5´引物酶解螺旋酶SSB

拓扑异构酶引物5´5´3´5´3´原核生物复制叉结构DnaA2.DNA复制起始的过程DNA双螺旋的解旋复制的引发2.1DNA双螺旋的解旋在拓扑异构酶I的作用下解开负超螺旋，并与解链酶共同作用，在复制起点处解开双链。解链过程中必需有SSB蛋白来稳定已解开的单链，以保证该局部结构不会恢复成双链。2.2复制的引发所有的DNA聚合酶都需要3’羟基端起始DNA合成。3’羟基端被称为引物。DNA聚合酶需要3‘羟基端来起始复制二、DNA复制的延长（2）合成时，一条与解链方向相同的子链，能连续进行合成，称为领头链。另一条合成走向与解链方向相反的子链，需多次生成引物进行延长,是不连续合成，形成数个DNA片段（又称冈崎片段），称为随从链。

1.复制延长的过程

（1）由DNApolⅢ

催化，在引物3'-OH末端逐一添加与模板链对应互补的脱氧核苷磷酸,使新合成的链不断延长。

半不连续复制复制叉的移动方向拓扑异构酶DNA聚合酶III解螺旋酶RNA引物引物酶DNA聚合酶ISSB3´3´5´领头链随从链3´5´5´RNA引物3´3´2.有关复制延长的几个重要概念④冈崎片段（Okazakifragment）：不连续复制的片段③随从链:

链的延长方向(5’3’)与解链方向相反，为不连续复制。②领头链:链的延长方向(5’3’)与解链方向相同,为连续复制。①半不连续复制：DNA复制时，一条链是连续复制，另一条链是不连续复制的现象。三、DNA复制的终止冈崎片段引物的消除和连接RNA引物DNApolIDNApolIDNA连接酶

1.复制终止

由于DNA复制的不连续性，随从链生成了许多DNA片段。一个片段存在着3′－OH末端，而另一个片段有5′－P末端，需要DNA连接酶连接缺口形成3′5′-磷酸二酯键，使随从链成为完整的DNA子链。

2.原核生物DNA复制终止大肠杆菌DNA具有复制终止位点，此处可以结合一种特异的蛋白质分子叫做Tus，通过阻止解链酶的解链活性而终止复制。链的终止需要Tus蛋白参与。当复制叉前移，遇到20bp重复性终止子序列（Ter）时，Ter-Tus复合物能阻挡复制叉的继续前移，等到相反方向的复制叉到达后在DNA拓扑异构酶IV的作用下使复制叉解体，释放子链DNA。2.1终止序列（ter元件）E.coli有两个终止区域，分别结合专一性的终止蛋白序列一：terEterDterA序列二：terFterBterC每个区域只对一个方向的复制叉起作用

2.2Tus蛋白专一性终止蛋白E.coli中由tusgene编码（terminusutilizati

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