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文档简介

血清学反应的主要类型颗粒性抗原(完整的细菌细胞或血细胞等)与相应的抗体,在适量电解质的条件下,相互凝集形成肉眼可见的凝集块或沉淀物,称为凝集试验。用于此反应中的抗原又称凝集原,抗体则称凝集素。不同凝集程度记录为++++(100%凝集)、+++(75%凝集)、++(50%凝集)、+(25%凝集)和-(不凝集)。根据每管内细菌的凝集程度判定血清中抗体的含量,以出现50%凝集(++)以上的血清最高稀释倍数为该血清的凝集价(或称效价、滴度)。1.凝集试验可溶性抗原与相应的抗体在合适条件下反应,出现肉眼可见的白色沉淀物现象,称为沉淀试验。用于反应的抗原称为沉淀原,常见的是蛋白质、多糖或类脂等,如细菌外毒素、内毒素、菌体裂解液、病毒悬液、病毒可溶性抗原、血清和组织浸出液等。反应中的抗体又称沉淀素。常用的沉淀试验有环状沉淀试验、絮状环状沉淀试验、琼脂扩散试验和疫苗电泳试验等。2.沉淀试验(1)环状沉淀试验环状沉淀试验是一种在两种液体界面上进行的试验,目前仍广泛应用。(2)琼脂凝胶扩散试验(3)免疫电泳免疫电泳技术是把凝胶扩散试验与电泳技术相结合的免疫检测技术。补体结合试验是应用可溶性抗原,如蛋白质、多糖、类脂质、病毒等,与相应抗体结合后,其抗原抗体复合物可以结合补体,但该反应肉眼不能察觉,如再加入致敏红细胞(溶血系),即可根据是否出现溶血反应判定反应系统中是否存在相应的抗原和抗体。参与补体结合反应的抗体称为补体结合抗体。补体结合抗体主要为IgG和IgM,IgE和IgA一般不能结合补体。通常是利用已知抗原检测未知抗体。3.补体结合试验由特异性抗体抑制相应抗原的生物学活性的反应,称为中和试验。该反应有严格的种、型特异性,主要用于病毒感染的血清学诊断、病毒分离株的鉴定、病毒抗原性的分析、疫苗免疫原性的评价、血清抗体效价的检测等。中和试验可在体内进行也可在体外进行。但该方法操作较为麻烦,判定结果的时间也较长。4.中和试验上述各项技术,一般均局限于几类经典的抗原与抗体间的血清学反应。现代免疫学技术发展极快,尤其以免疫标记技术的发展最快、应用最广。免疫标记技术就是将抗原或抗体用小分子的标记剂如荧光素、酶、放射性同位素或电子致密物质等加以标记,借以提高其灵敏度和便于检出的一类新技术。其优点是特异性强,灵敏度高,应用范围广,反应速度快,容易观察;既可用于定性、定量分析,又可用于分子定位等工作。5.免疫标记技术(1)免疫荧光技术免疫荧光技术又称荧光抗体法。(2)免疫酶技术又称酶免疫测定法,是一种利用酶作标记的抗体或抗抗体以进行抗原、抗体反应的高灵敏度的免疫标记技术。(3)免疫印迹几种相对分子质量不同的蛋白质先经SDS凝胶电泳分离出不同的条带,再转印至硝酸纤维膜上,然后用酶标记的抗体对条带进行显色和鉴定。(4)放射免疫测定法放射免疫测定法是一类利用放射性同位素标记的抗原或抗体来

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