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学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精PAGE1学必求其心得,业必贵于专精PAGE专题十四生物技术实践非选择题(本题共8小题,每小题15分)1.饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质,很难被动物吸收利用,还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶,则能催化其水解为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析回答问题。(1)分离产植酸酶的菌株,需先配制合适的培养基。配制培养基时,在各成分都融化后和分装前,要进行的是____________和灭菌。对培养基进行灭菌的常用方法是______________________。(2)接种以前进行的一系列稀释操作,目的是在固体培养基表面形成______________。这种接种方法是__________________。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的____________________就能大致推测出样品中的活菌数。如果一培养基上平均有3个菌落,则1g土壤中大致的活菌数量是____________个。(3)由于植酸钙的不溶解性,使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙,菌落的周围将形成透明的区域,根据透明区域的有无,可初步判断该菌是否产植酸酶.实验结果显示A~E五种菌株中,________是产植酸酶最理想的菌株。(4)植酸酶的活力可用________________________________的量来表示.2.(2017安徽安庆一中三模,37)为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图1所示的实验.(1)配制好的培养基通常使用__________________法灭菌.步骤③与步骤②中培养基成分相比,最大的区别是________________________________________________________________________.(2)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示。该同学的接种方法是______________________,出现图2结果可能的操作失误是________________________________________________________________________.(3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作:将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为____________个。(4)步骤⑤需要振荡培养,目的是__________________________________________________.(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是______________________________________________。3.尿素是一种重要的农业氮肥,不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。回答下列问题。(1)对土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下。第一步:土壤取样。取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要______________(填“消毒”或“灭菌”).第二步:样品稀释。通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度,原因是________________________________________________________。第三步:微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上,并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖,而________________________则不能生长繁殖。(注:实验中所用的培养基经检测符合要求,且均在无菌条件下操作)(2)若对土壤悬液进行梯度稀释时,未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释,用稀释倍数为104的样液涂布到平板上进行培养和计数,统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数________。(3)对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O酚红指示剂尿素蒸馏水培养基(含量)1.4g2。1g0。2g0.01g1.0g1000mL若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,需在上表培养基配方中添加的物质是____________、________。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色,pH升高的原因是________________________________________________________.(4)分解尿素的微生物在生态系统中的作用是____________________________。4.(2017四川成都七中二模,39)近年来,纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮,其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题。(1)在果醋制作时,运用醋酸菌在________________和糖源充足时,将糖分解成醋酸;在糖源不充足时,也可以利用酒精生成醋酸,请写出该过程的化学反应式:__________________________。(2)腐乳制作的流程:让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时,应注意控制________________;配制卤汤时,要使卤汤中酒的含量控制在______%左右。(3)制作泡菜的原理是______________________________________。蔬菜在腌制过程中,会产生亚硝酸盐,在__________________条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生__________________反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________________色染料。5.(2017四川绵阳二诊,37)细腻化渣的夹江腐乳和食香雅韵的东坡泡菜是四川的特产,深受人们喜爱。而在绵阳花城果乡,多家植物园中分季节种植的有多种花卉和水果.其中玫瑰、柑橘等可以作为植物芳香油提取的原料,葡萄、蓝莓等可酿酒.请回答有关生物技术在食品加工及其他方面的应用问题。(1)人们对泡菜和腐乳的喜好主要是口感,但也关注加工中有害物质的含量。腐乳和泡菜制作中都可加一定量的酒和多种香辛料,其目的是使产品具有不同风味和口感,也具有____________________的作用。泡菜和腐乳中超标的亚硝酸盐进入人体,在特定条件下会转变成致癌物质______________。所以质检部门会检测亚硝酸盐的含量。(2)玫瑰精油的提取是通过水分子向原料渗透,使植物精油成分向水中扩散,形成油水共沸物,蒸馏出的水蒸气与精油通过________________、油水分离后得到精油。用橘皮来提取精油时,新鲜橘皮要干燥去水,并用石灰水浸透,是为了提高________________________________________________________________________.(3)萃取法可明显提高薰衣草精油的提取效率。从影响萃取的因素考虑,萃取的效率主要取决于萃取剂的____________________________,萃取液的浓缩可直接使用____________________装置。(4)酿造的蓝莓酒带有一股醋酸味,从发酵条件分析可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。6.农村中泡菜的制作方法:新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处,适宜环境温度为28~30℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸"或“酸而不咸”,据此分析,回答下列问题。(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是________________________________________________________________________。(2)若制作的泡菜“咸而不酸",最可能的原因是____________________________。(3)制作过程中,需要加入盐水,其中清水与盐的比例应为______________,加入“陈泡菜水”的作用是__________________________________________。(4)若要获得优良乳酸菌菌种,应选用培养基培养。培养基中应含有______、______、水和无机盐,同时需要在培养基中添加________。纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有__________。培养时还需提供__________条件。7.(2017重庆一中月考,11)研究发现柚皮精油具有抑菌、抑制肿瘤等作用,是一种具有广阔开发前景的芳香油资源。青蒿素是目前公认的最有效治疗疟疾的药物,易溶于有机溶剂,60℃以上易分解.回答下列问题。(1)柚皮精油可采用水蒸气蒸馏法提取,它是利用____________将__________较强的柚皮精油携带出来,形成油水混合物。在油水混合物中,加入________________________________________________________________________________可使油水出现明显分层;分离得到的油层应加入______________进行除水.(2)水蒸气蒸馏易使柚皮精油有效成分部分水解,为避免此缺点,可采用________法提取柚皮精油。为提高出油率,需先对柚皮进行的处理是__________,以分解果胶。(3)青蒿素宜采用萃取法提取,现有四氯化碳(沸点76.5℃)和乙醚(沸点34。5℃)两种溶剂,应选用________作为萃取剂,不选用另外一种的理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。8.请回答与微生物分离和培养有关的问题。(1)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是________________________________________________________________________(填序号)。为减少误差,一般要设置________或以上数目的平板。①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液③吸取0。1mL溶液进行涂布平板④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度(2)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。其中对培养基进行灭菌的常用方法是______________________;要求实验操作应在________________________________________________________________________进行,以避免周围环境中微生物的污染。(3)如图是某同学对萃取的胡萝卜素样品所做的鉴定实验的结果。图中实验组是________,实验得出的结论是________________________________________________________________________.【答案与解析】1.(1)调整pH高压蒸汽灭菌法(2)单个菌落稀释涂布平板法菌落数3×106(3)E(4)单位时间单位体积内底物消耗(产物产生)【解析】(1)分离产植酸酶的菌株,需先配制合适的培养基,配制好的培养基要先调整pH再灭菌,常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌.(2)接种以前进行的一系列稀释操作,表明该接种方法为稀释涂布平板法,目的是在培养基表面形成单个菌落。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数;如果按题中处理后,统计的平板上平均有3个菌落,则1g土壤中大致的活菌数量=3÷0。1×105=3×106(个)。(3)分析题图可知,菌落E周围的透明圈最大,是产植酸酶的理想菌株。(4)植酸酶的活力可用单位时间单位体积内底物消耗的量来表示.2.(1)高压蒸汽灭菌石油是唯一碳源(2)稀释涂布平板法涂布不均匀(3)5。7×107(4)提高培养液中(溶解)氧的含量,通过振荡可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率(5)筛选出分解石油能力最强的细菌【解析】(1)培养基灭菌通常使用高压蒸汽灭菌法。步骤③与步骤②中培养基成分相比,最大的区别是石油是唯一碳源,用以筛选高效分解石油的细菌。(2)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示,菌落密集处呈片状分布,说明该同学的接种方法是稀释涂布平板法,出现图2结果可能的操作失误是涂布不均匀。(3)将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57,则平均菌落数为(56+58+57)÷3=57,每升样品中的活菌数为57×10×100×1000=5.7×107(个)。(4)步骤⑤需要振荡培养,目的是使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率,同时提高溶氧量。(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌。3.(1)灭菌土壤中各种微生物的数量不同不能利用尿素的微生物(2)偏高(3)葡萄糖琼脂尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨(合理叙述即可)(4)将有机物分解为无机物(将尿素分解为氨)【解析】(1)为了防止外来杂菌的污染,应对取样前的工具和信封都进行灭菌.在稀释样品时,分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度,原因是土壤中各种微生物的数量不同,所以稀释倍数不同,因为是以尿素为唯一氮源,所以在该培养基上不能利用尿素的微生物是不能生长的。(2)如果没有振荡,取上层的菌液进行计数,因为下层是土壤,此时的细菌主要在上层菌液中,所以应比正常的操作得到的菌落数偏高。(3)该培养基中还没有碳源,所以应加入葡萄糖,要做鉴别应在固体培养基上培养,所以还应加入琼脂。因为加入的有酚红指示剂,尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨,pH升高,酚红指示剂变红。(4)分解尿素的微生物在生态系统中是分解者,其作用是将有机物分解为无机物。4.(1)氧气C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O(2)盐的用量12(3)乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖,将葡萄糖分解成乳酸盐酸酸化重氮化玫瑰红【解析】(1)在果醋制作时,当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸,其化学反应式为:C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。(2)腐乳制作流程中,加盐腌制时,应注意控制盐的用量;配制卤汤时,要使卤汤中酒的含量控制在12%左右,若酒精含量过高会延长腐乳成熟的时间,若酒精含量过低则不足以杀菌.(3)制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖,将葡萄糖分解成乳酸。在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。5.(1)防腐杀菌(抑制杂菌的生长)亚硝胺(2)冷凝出油率(3)性质和使用量蒸馏(4)酒精发酵后期进入了空气,温度上升导致醋酸菌大量生长产生醋酸【解析】(1)腐乳和泡菜制作中都可加一定量的酒和多种香辛料,其目的是使产品具有不同风味和口感,也具有防腐杀菌(抑制杂菌的生长)的作用。泡菜和腐乳中超标的亚硝酸盐进入人体在特定条件下会转变成致癌物质—-亚硝胺。(2)玫瑰精油的提取是通过水分子向原料渗透,使植物精油成分向水中扩散,形成油水共沸物,蒸馏出的水蒸气与精油通过冷凝、油水分离后得到精油。用橘皮来提取精油时,新鲜橘皮要干燥去水,并用石灰水浸透,是为了提高出油率。(3)从影响萃取的因素考虑,萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量,萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置。(4)果酒制作需要无氧环境,适宜的温度是18~25℃;果醋制作需要有氧环境,适宜的温度是30~35℃。若酿造的蓝莓酒带有一股醋酸味,则原因可能是酒精发酵后期进入了空气,温度上升导致醋酸菌大量生长产生醋酸。6.(1)消毒(2)盐过多抑制了乳酸菌发酵(3)4:1提供乳酸菌菌种(4)碳源氮源维生素平板划线法或稀释涂布平板法无氧【解析】(1)泡菜的制作过程中,用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒.(2)泡菜的制作原理是利用乳酸菌的无氧呼吸产生乳酸,若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是加入的盐过多,抑制了乳酸菌发酵,产生的乳酸过少。(3)制作过程中,需要加入盐水,其
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