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文档简介
肌糖原的酵解作用第1页,共12页,2023年,2月20日,星期四目的与要求
了解糖酵解作用在糖代谢中的地位和生理意义掌握鉴定糖酵解作用的原理和方法。第2页,共12页,2023年,2月20日,星期四动物淀粉,是动物的糖贮存库(体内能源库)。糖原的结构与支链淀粉有基本相同的结构,只是糖原的分支更多。在动物的肝脏和肌肉中含量最大,当动物血液中葡萄糖含量较高时,就会结合成糖原储存于肝脏中,当葡萄糖含量降低时,糖原就可分解成葡萄糖而供给机体能量。
糖原第3页,共12页,2023年,2月20日,星期四糖酵解(EMP)途径是指细胞在胞浆中分解葡萄糖生成丙酮酸的过程,并伴有少量ATP的生成。在缺氧条件下丙酮酸被还原为乳酸(lactate)称为糖酵解。有氧条件下丙酮酸可进一步氧化分解生成乙酰CoA进入三羧酸循环,生成CO2和H2O。
第4页,共12页,2023年,2月20日,星期四肌糖原的酵解作用:即肌糖原在缺氧的条件下,经过一系列的酶促反应,最后转变成乳酸的过程。肌糖原的酵解作用是糖类供给组织能量的一种方式。第5页,共12页,2023年,2月20日,星期四1.糖原→(糖原磷酸化酶)→1-磷酸-葡萄糖→6-磷酸葡萄糖,进入糖酵解。
1/n(C6H10O5)n+H2O2CH3CHOHCOOH
无O2第6页,共12页,2023年,2月20日,星期四
2.乳酸的鉴定(灵敏度1~5微克/毫升)紫红色第7页,共12页,2023年,2月20日,星期四
催化酵解作用的酶系统全部存在于肌肉提取液中,而催化呼吸作用(即三羧酸循环)的酶系统,则集中在线粒体中,因此可用淀粉代替糖原。第8页,共12页,2023年,2月20日,星期四影响显色的因素
1.糖的影响加Ca(OH)2
和CuSO4去除。
2.蛋白质加三氯乙酸(TCA)沉淀。
3.无机离子
Mg2+是许多酶的辅助因子,必定影响酶促反应速度。
Cu2+可增强乳酸的颜色反应。
第9页,共12页,2023年,2月20日,星期四试剂和器材试剂:
0.5%淀粉溶液;20%TCA溶液,
1/15M磷酸缓冲液(pH7.4),氢氧化钙(粉末),饱和硫酸铜;浓硫酸;对羟基联苯试剂。
器材
37℃
恒温水浴,沸水浴,冰水浴。
材料
兔肉糜。
第10页,共12页,2023年,2月20日,星期四注意事项1.加入少许液体石蜡隔绝空气,以1毫升/管为宜;2.37℃保温1小时;3.为使糖沉淀完全,放置30分钟并不时振荡(封口膜);4.在乳酸测定中,试管必须洁净、干燥,防止污染;4支试管洗净放入烘箱烘干5.所用滴管大小尽可能一致,减少误差。若显色较慢,则可将试管放入37℃恒温水浴中保温10min,再比较各管颜色。6.第二次过滤,EP管离心第11页,共12页,2023年,2月20日,星期四思考题人体
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