组织培养实验器材

植物组织培养设备：1、高压消毒锅：用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。2、超净工作台：用于培养物的无菌操作。3、接种工具：包括双筒实体显微镜、镊子、剪刀、解剖刀、酒精灯或接种灭菌器（电热消毒器）等。4、培养设备：包括空调机、定时器、温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、摇床、恒温培养箱、人工培养箱等。5、化学实验及分析设备：包括分析天平,天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱、晾干架等。6、封口膜，培养瓶，试管，培养皿，专用记号笔，托盘，手术接种剪，直镊，枪型接种镊，手术刀柄，超净工作台，接种灭菌器，不锈钢接种盘，组织培养架，光照培养箱，人工气候箱，生化培养箱，恒温恒湿箱，照度计，PH计，酸度计，电导率仪，干湿温度计，玻璃棒温度计，电子天平，精密电子秤，磁力搅拌器，生物显微镜，高压灭菌锅，纯水器，组培推车，三角烧瓶，烧杯，量筒，试管架，试管刷，容量瓶，酒精灯，干燥器，吸球及移液管（0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20ML)，容量瓶，试剂瓶（含棕色试剂瓶）。组培试剂类：3.1.植物生长调节剂类Plantgrowthregulator：6-苄氨基嘌呤(6-BA)6-Benzylaminopurine；6-糠氨基嘌呤（KT；激动素）6-Furfurylaminopurine(Kinetin)；腺嘌呤（腺素）Adenine；氯吡苯脲(KT-30；CPPU)Forchlorfenuron；反玉米素Trans-zeatin；塞苯隆(TDZ)Thidiazuron；生物素Biotin；α-萘乙酸(NAA)1-Naphthylaceticacid；氧3-吲哚乙饮酸(IAA黑)3-I捷ndole座acet文i畏caci早d；俊3-吲哚丁舟酸(IBA咳)3-I来ndole个buty磨rica来cid；缎2，4-二扩氯苯氧乙酸匪(2，4-具D)2,4峰-Dich闹lorop森henox悼yacet虽icac夫id；告赤霉素GA劈3Gi盏bbere世llic委acid；弄莫奈乙酰胺（粒NAD）2恭-（1-N势aphth体yl）ac岗etami伍de；约β师-奈氧乙酸扣β势-Naph愉thoxy爷aceti嘱caci达d；乏对氯苯氧乙贼酸(防落素富)4-Ch词lorph球enoxy草aceti如caci递d；驼对溴苯氧乙星酸4-Br硬omoph魄enoxy缝aceti裂cac遇id；报对碘苯氧乙蹈酸4-Io瑞dophe鸽noxya含cetic仇acid寿；腔24-表油秧菜素内脂2滤4-Epi序brass蜘inoli裕de；挤芸苔素内酯巨Brass塔inoli杆de；怕赤霉素GA弱4+7(像GA4:G倚A7=1:创2)Gib贺berel畜linA激4+7；恳青鲜素Ma活leic歪hydra纪zide；除姜丁酰肼(比宾久)Dam紫inozi筐de；孟吲哚-3-抓丙酸Ind完ole-3底-prop忆anoic喇acid僵；傲吲哚-3-棒丙烯酸3-芹Indol废e-pro废penoi首caci明d；酷吲哚-3-当甲醇3-I趣ndole研-me隐thano车l；棋吲哚-3-灵甲醛Ind纵ole-3致-carb先oxyli栗caci位d；即吲哚-3-橡甲酸Ind训ole-3背-carb帐oxyli纯caci绿d；勿三十烷醇T默riaco额ntano坐l；仙多效唑(P策P333)西Paclo降butra菌zol；迎2，4-D看钠盐；斯缩节胺Me组piqua胁tchl插oride江；添矮壮素Ch烘lorme碑quat；戒部乙烯利Et侧hepho你n。宾3.2.有春机物类Or覆ganic叨matt柱er：快烟酸Nic膊otini岛caci月d；允肌醇myo诵-Inos响itol；饮革盐酸硫胺（厨VB1）T敏hiami告neHC治L,VB1椅；饱盐酸吡哆辛总（VB6）扩Pyrid拍oxin案HCL,V促B6；爪甘氨酸Gl测ycine英；戒叶酸Fol柿icac蚊id；僵核黄素(V哀B2)Ri招bofla酱vin,V午B2；绘抗坏血酸(筝VC)As替corbi览caci臂d,VC；聋富正丁酸n-沟Butyr嘉icac擦id；瞎柠檬酸Ci疑tric敌acid晶monoh鞭ydrat委e；凝蔗糖Suc照rose；筐币DL-精氨厚酸DL-A箱rgini死ne；尊腺嘌呤硫酸披盐Aden苏ines弯ulfat其e；余葡萄糖Gl痒ucose浮(Dext垫rose)扑；脚蛋白胨Pe娇ptone革；步水解酪蛋白找Casei板naci兰dhyd掉rolys授ate；拢财水解乳蛋白总Lacto糠album困inhy室droly稼sate。除飞3.3.无声机物类：豆硫酸铁Fe干rric往sulfa轰te；垄乙二胺四乙悉酸二钠盐E座thyle汗nedia裕mine谣tetra先aceti极caci格ddis员odium至salt撤；枪乙二胺四乙激酸铁钠盐E嘴thyle垂nedia看mine志tetra惜aceti蜓caci路dmon农osodi朽umfe病rric纤salt；认坑硼酸Bor筑icac张id；坦氯化钴C挪obalt催Chlo肿ride；座雾碘化钾Po犯tassi奏umlo冰dide；董垃钼酸钠So制dium郊molyb乖date；问猴无水氯化钙句Calci透umch抱olori腐dean滚hydro傲us；查二水氯化钙广Calci吼umch挨olori竖de；垦干燥氯化钙倦Calci巨umch肆olori粮de（fo恩rdry迎ing）；搁孤硝酸钙Ca商lcium煤nitr慌ate；吩所D-泛酸钙倾Calci千umD-用panto菊thena威te；炕磷酸三钙T甲ri-Ca休lcium币phos圾phate猴；稀硫酸铜Cu扫pric阴sulfa衡te；拐硝酸胺Am努moniu阵mNit纳rate；榴茂硝酸钾Po醒tassi重umNi件trate炕；雕结晶硫酸镁平Magne集sium联sulfa构te；炕硫酸亚铁F先errou满sSul孙fate；下矛磷酸二氢钾猛Potas茅sium汤dihyd鉴rogen靠phos砖phate猫；俩硫酸锰Ma港ngane盟seSu选lfate施；辅硫酸锌Zi逆ncsu茎lfate商；沃磷酸二氢钠日Sodiu鸭mpho浇sphat引emon宁obasi练c；北三氧化钼M交olybd糊enum妖Triox氏ide；币申氯化钾Po售tassi反umch且lorid麦e；陵氢氧化钾P霞otass式iumh拉ydrox软ide；荣须硫酸铵Am栋moniu骂msul薄fate；斤忌二氧化钛T巷itanl粗umdi甲oxide疗。区3.4.日夹用耗材Co阔nsump陵tive姐mater臣ialo睛fdai乐lyex掌pense堪s：漆琼脂粉Ag绵ar；硬冷凝脂Fu量ngibl灶eAga挣r；佩活性炭粉C齐arbon罪Acti浸vated欺；险超细活性炭颂粉Wisp钩yCar念bonA式ctiva纹ted。浑消毒试剂类粪：够甲醛(福尔花马林溶液)报Forma博lin；横高锰酸钾P缎otass增iump灿erman赴ganat搅e；阵新基尔灭（类苯扎溴铵溶讨液）Ben璃zalko蝶nium糖Bromi便deSo难lutio五n；盾安替福民(敏次氯酸钠溶宴液)；受过氧化氢崭30%(双娱氧水)Hy荣droge管nPer免oxide蒙氯化汞屈。照一、实验室侵设计戒1.准济备室:(1帽)进行药品乖的保存、配牢置、消毒、裕分装等。狭(2)器具裤的洗涤、干剧燥、消毒。野(3)生理管生化指标的慨测定等。兆2.接国种室：进行立材料的接种斧，内置超净映工作台或接任种箱。外设苹缓冲间-放置置拖鞋、工侵作服、工作鼓帽等。特3.培穗养室：植物隔材料的无菌相培养，室内钓主要有培养喝架和控制温役度及光照的街设备。敌4.细级胞学观察实湿验室：进行岁培养材料的挪组织学、细牵胞学、观察医照相等。摆二煤、玻璃器皿侧的选择和清舌洗遣1.玻刚璃器皿的选尚择老*试管-乏适合于用少堤量培养基及小试验各种不袋同配方时选热用。半*三角锥瓶盼-适用于陷各种培养（疯如固体培养闸、液体培养干、大规模培丽养或一般培蚀养）。携*L形管和鲁T形管-惊为专用的旋企转式液体培士养试管。娱*培养皿-冤适于作单睁细胞的固体每平板培养、威胚和花药培哨养和无菌发滤芽。蜜*角形培养也瓶和圆形培工养瓶-适足用于液体培炭养用，如单饥细胞和原生上质体的浅层偷培养。遗*果酱瓶-职常用作试呼管苗大量繁由殖用的培养著瓶。药品试剂：于MS乐培养基的配酬制步骤例这样每包次使用时，张取其总量的要1/20(孕50mL饮)吼或促1/200匹(5mL团)约，加水稀释年，制成培养胞液。现将制减备培养基母延液所需的各胶类物质的量公列出，供配面制时使用。浸大量元素亭(朱母液奖Ⅰ夺)mg胜／炒L艺NH幻4智NO酿3性330剃00耀KNO晕3赌3800糟0意CaCl填2坛·2H嫩2脉O石8800运臭MgSO损4袜·7H堪2盾O折7400杰概KH速2砖PO限4逗3400丑戏微量元素俊(皮母液廉Ⅱ撤)杨KI甩166陪H挥3胖BO与3只1240庙浮MnSO论4艰·4H唇2芳O呜4460式割ZnSO赖4腥·7H门2歉O亦172坚0仓Na竟2抄MoO前4监·2H哑2惕O识50倘CuSO圣4粒·5H上2镇O现5鞭CoCl拢2蹲·6H坏2钉O俭5躁铁盐嚷(羡母液侍Ⅲ药)租FeSO包4踪·7H喜2徒O腐5560肚村Na燃2沾-EDTA氧·2H羞2漆O乱746板0卡有机成分著(桃母液邻Ⅳ竭)本Ⅳ熔A蜘肌醇粒2000内0愚Ⅳ捆B习烟酸鸽100秀盐酸吡晌哆醇趴(裳维生素锻B6)念100饱盐酸硫墓胺素典(况维生素加B1)弃100蓄甘氨酸炎400那以上各种营劲养成分的用治量，除了母骄液珍Ⅰ念为为20兄倍浓缩液外亡，其余的均铸为阅200摆倍浓缩液掩。长上述几申种母液都要村单独配成疏1L锯的贮备液。慈其中，磁母液库Ⅰ简、母液具Ⅱ贡及母液弟Ⅳ许的配制方法泳是挽：每种母液辉中的几种成腔分称量完毕槽后，分别用鸽少量的蒸馏销水彻底溶解有，然后再将船它们混溶，么最后定容到龄1L厚。帖母液差Ⅲ鉴的配制方法畜是眉：将称好的轧FeSO4纽·7H2O盏和嚼Na2-E穿DTA·2雕H2O夫分别放到抗450m回L蓄蒸馏水中，破边加热边不克断搅拌使它存们溶解，然没后将两种溶蠢液混合，并狡将协pH冤调至赢5?5寨，最后定容尚到葛1L场，保存在棕组色玻璃瓶中劳。各种母液贪配完后，分书别用玻璃瓶证贮存，并且刊贴上标签，咏注明母液号钩、配制倍数露、日期等，储保存在冰箱钥的冷藏室中上。恨MS议培养基中还仓需要加入：内2膊，病4-贷二氯苯氧乙岸酸悉(2耽，连4-D)花、肉萘乙酸粮(NAA)厚、订6-阳苄基嘌呤易(6-BA狗)蛙等植物生长时调节物质，勤并且分别配惯成母液桑(0?1采mg/mL迹)注。杆其配制方法高是盏：分别称取航这钞3赴种物质各超10mg吓，将幼2识，喉4-D堂和等NAA楼用少量村(1mL窝)只无水乙醇预狂溶，将裕6-BA抚用少量颂(1mL油)栗的物质的量旺浓度为做0.1m弊ol/L趋的谎NaOH掏溶液溶解，芽溶解过程需奇要水浴加热惰，最后分别狼定容至带100m咏L顾，即得质量蚕浓度为容0?1m狱g/mL古的母液。部配制培养液脆用量筒或移轰液管从各种栗母液中分别搜取出所需的痒用量条：母液遍Ⅰ乏为足50mL走，母液笋Ⅱ员、浴Ⅲ旱、罢Ⅳ奇A详和末Ⅳ糠B壁各苗5mL轿。再取栏2萄，抢4?D5冰mL震、惑NAA1白mL驼，与各种母拌液一起放入霞烧杯中。蝶MS哑培养基配制利培养液时的拔注意事项立配制培养液沸时应注意役：季①快在使用提前胡配制的母液锅时，应在量练取各种母液桥之前，轻轻折摇动盛放母终液的瓶子，供如果发现瓶兽中有沉淀、足悬浮物或被瓶微生物污染趁，应立即淘树汰这种母液桑，重新进行沙配制；膛②奴用量筒或移汁液管量取培拼养基母液之挺前，必须用理所量取的母骡液将量筒或反移液管润洗池2民次；谁③医量取母液时叙，最好将各谋种母液按将裕要量取的顺症序写在纸上业，量取柔1理种，划掉浴1昌种，以免出克错。溶化琼裙脂隶用粗天平分殃别称取琼脂坊9g揪、蔗糖帖30g签，放入犬1000兴mL舒的搪瓷量杯模中，再加入大蒸馏水姨750m迟L滚，用电炉加包热，边加热蛛边用玻璃棒晕搅拌，直到按液体呈半透伟明状。然后埋再将配好的牧混合培养液邪加入到煮沸寻的琼脂中，归最后加蒸馏砖水定容至唇1000痕mL读，搅拌均匀基。气需要注意的否是堡，在加热琼亩脂、制备培染养基的过程睬中，供操作者千万旋不能离开嗓，否则沸腾浅的超琼脂贺外溢，就需叨要重新称量秤、制备。此奶外，悦如果没有搪袄瓷量杯，可漏用大烧杯代浸替旷。但要注意卫大烧杯底的协外表面不能喂沾水器，否则加热音时烧杯善容易炸裂秀，使溶液外腐溢，举造成烫伤羽。调兆pH编用滴管吸取商物质的量浓裙度为映1mol桂/L米的肺NaOH枝溶液，逐滴宪滴入溶化的大培养基中，脾边滴边搅拌左，并随时用汉精密的罩pH逃试纸总(5.4庄～披7.0)净测培养基的燥pH度，一直到培晃养基的他pH掀为急5.8循为止士(请培养基的督pH怪必须严格控货制在络5.8)樱。培养基的狭分装烘溶化的培养幻基应该趁热透分装。分装殖时，先将培垮养基倒入烧引杯中，然后济将烧杯中的查培养基倒入每锥形瓶构(50m雪L阅或射100m篮L)州中。聋注意不要让展培养基沾到纳瓶口和瓶壁闪上先。锥形瓶中继培养基的量保约为锥形瓶蛙容量的柳1/5皂～无1/4时。每颗1000敞mL遗培养基，可枣分装美25符～脖30摊瓶。培养基菜分装完毕后芬，应及时封登盖瓶口。用脊2俘块硫酸纸当(阵每块大小约鸟为触9cm×尘9cm)葬中间夹谣1呆层薄牛皮纸校封盖瓶口，案并用线绳捆址扎。最后在袋锥形瓶外壁叨贴上标签。味B5富培养基配方才成分第使用浓度唯(mg/L惕)鲜大量元素岔硝酸钾条KNO3内2500蚀MgSO4万·7H2O式唯250斯CaCl2虚·2H2O朱150肃(NH4)隐2SO4任134怀微量元素蛋KI侨0.75乞H3BO4朽3.0省MnSO4款·4H2O辛瓶10浪ZnSO4绕·7H2O石赴2.0盾Na2Mo凡O4·2H服2O孔0.25拒CoCl2蝶·6H2O锈0.025披铁盐固CuSO4抢·5H2O铅看0.025株Na2-E隶DTA盐37.3娱FeSO4笼·7H2O吓27.8抵有机成分累肌醇迫100猪烟酸端1.0沸盐酸吡哆醇蹲1.0臭盐酸硫铵驾10硬MS软培养基配方惕:拥绸叮决屠想省姜富夜签成分婚锄赛际分子量福擦聋需使用浓度京(mg/L勤)捎胀菌袋喂弹辱群愈冲硝酸钾他KNO3

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