尿液干化学检测操作规程

实用标准文案尿液干化学检测(一)检验目的对泌尿系统疾病、肝胆疾病、糖尿病等疾病进行辅助诊断与疗效观察，对安全用药进行监护，以及评估健康状态。(=)测定方法以及体系干化学试带法：包括尿液分析仪，分析仪试剂带；尿的干化学试带可检测pH值等。快速敏感的干化学试带技术和自动化分析技术在尿液检查中得到普遍应用，上述指标的检测极为简便，而且提高了检验质量，为尿液化学检查开拓了更广阔的领域。(三)检测原理及干扰因素尿液分析仪检测原理：尿液中相对的化学成分使尿多联试带上各种含特联试带置于尿液分析仪比色进样槽，各模块依次受到仪器光源照射并产生不I理器由下列公式计算山各测试项目的反射率，然后与标准曲线比较后校正为测定值，最后以定性或半定量方式自动打印出结果。用于对尿液进行定性和半定量检测。葡萄糖检测原理：尿糖形成的原因和机制为：当血中葡萄糖浓度大于8.8mml/L时，肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收能力即可出现糖尿。葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物精彩文档实用标准文案酶的作用下释放新生态氧[0]，新生态氧[O]再还原碘化钾，发生颜色变化。(2)干扰因素：本实验对葡萄糖豹检测是特异性的，大量维生素c可使实验出现假阴性结果；高比重碱性尿，亦可造成糖检出偏低，使低糖浓度尿呈阴性。胆红素检测原理：直接胆红素在酸性条件下与二氯苯胺重氮盐偶联，生成偶氮染料。干扰因素：标本必须新鲜，以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素；尿液中含高浓度维生素C定呈假阴性；产物时呈假阳性。酮体检测原理：乙酰乙酸、丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠反应．生成紫红色化合物。干扰因素：和结果偏低；分析结果有差异。比重检测原理：采用多聚电解质离子解离法。尿中以盐类形式存在的电解质(MX)精彩文档实用标准文案中的M阳离子(以Na为主)与离子交换体反应置换出氢离子，氢离子与酸碱其他方法较低的读数。(1g／L一原理：血红蛋白具有过氧化物酶样活性，可使过氧化物分解释放出新生态氧，使邻甲苯胺变成邻甲联苯胺，出现颜色变化。干扰因素：造成仪器法与镜检法有差异；c酸碱度：采用酸碱指示剂法(1）原理：尿液酸度即尿的pH值，反映肾脏调节体液酸碱平衡的能力。正常人在普通膳食的条件下尿液pH值为46～8O。pH值广泛试带是多种指示剂混合的试带，灵敏度约为pH值0．05，试带与标准色板比较可知尿液的pH值近似值。干化学试带的测试模块中含甲基红和溴麝香草酚蓝，两种指示剂适量配合可测试尿液酸碱度。(2)干扰因素：尿pH值受饮食种类影响很大，如进食蛋白质较多，则由尿排H{的磷酸盐和硫酸盐增多，尿pH值较低，而进食蔬菜多时尿pH值常大于6。当每次进食后，由于胃黏膜在分泌多量盐酸以助于消化，为保证有足够的氢离子，精彩文档实用标准文案和氯离子进入消化液，则尿液泌H‘减少和cL一的重吸收增加，而使尿pH值增加，呈碱性c如运动、饥饿、出汗等生理活动，夜间入睡后吸收变慢，体内酸性代谢产物可使尿pH值降低。药物、不同疾病等多种因素亦影响尿液pH值。细菌繁殖尿样可影响pH值，使尿液呈碱性。影响尿液pH值常见因素见表10。表10影响尿液pH值常见因素表影响因素酸性尿液碱性尿液肾功能肾小球滤过增加，肾小管保碱能力正常肾小球滤过正常，肾小管保存碱能力丧失食物肉类含硫、磷及混合性食物蔬菜、水果、含钾、钠生理活动剧烈运动、大汗、应激状态、饥饿饭后、消化高潮疾病酸中毒、肾炎、糖尿病、饥饿状态、尿碱中毒、膀胱炎、肾盂肾炎、尿路草酸盐、酸盐或胱氨酸结石磷酸盐或碳酸盐结石药物氯经钙、氯化铵、氯化钾、稀盐酸等小苏打、碳酸钾、碳酸镁、枸橼酸钠、酵母制剂等其他尿内含酸性磷酸盐尿内混入多量脓、血、细菌污染、分解尿素等pHpH5～9的变异范围，基本能满足临床对尿pH蛋白质检测原理：本法是利用指示剂的蛋白质误差原理(即pH值指示剂离子因与白蛋白携带电荷相反而结合，故使其反应显示的pH值产生颜色变化，这种pH值颜色改变的幅度与白蛋白含量成正比)。该法有简便快速等优点，适用于人群普查，还可以用于尿液分析仪。以减少误差。不同厂家、不同批号试剂带显色有差异，因此应强调采用经严格标准化的试带。干扰因素：对于高度缓冲的碱性尿．有可能得到假5如果尿样被铵盐类化合物及某些防腐剂或清洗剂污染也会导致假精彩文档实用标准文案阴性。尿胆原检测原理：尿胆原在强酸性条件下，与重氮盐偶联生成紫红色染料。干扰因素：结果出现假阳性；9.亚硝酸盐检测原理：采用亚硝酸盐还原法。亚硝酸盐与芳香族氨基磺胺发生重氮反应，生成重氮化合物，而重氮化合物与四氢苯并喹啉3一酚偶联，生成红色偶氮染料。亚硝酸盐的检出率受三个因素影响：干扰因素：(1)尿路感染的细菌是否含有硝酸盐还原酶；(2)食物中是否含有硝酸盐；4小时以上。符合以上三个条件，此试验的检出率为80白细胞检测原理：采用白细胞酯酶法。吡咯酚酯在中性粒细胞中酯酶的水解作用下，产生游离酚，游离酚与苯基重氮盐偶联，生成紫红色偶氮染料。干扰因素精彩文档实用标准文案结果。的测试结果则表明是临床的蛋白尿症。蛋白试纸用于尿液中白蛋白的检测。试纸对黏蛋白和球蛋白的敏感度较低，一般在60mg／d1或者更高才能被检测出来。肉眼可见的【II【尿(5mg／d1)也可能出现假阳性反应。抗坏血酸检测原理：采用还原法。抗坏血酸具有1，2一烯二醇还原性基团，在碱性条件巾，将氧化态蓝色的2，6一二氯酚靛酚染料还原为无色的2，6一二氯二对酚胺。干扰因素：当尿中含有氧化剂时(如高锰酸钾、次氯酸盐等)会影响本检验的灵敏度(见表11)。参干扰因素检测项目参干扰因素检测项目反应原理灵敏度考范围假阳性假阴性标本久置后，细菌繁殖或CO2丢失，pH值↑↓酸碱度4.6（pH酸碱指示剂法4.5～9.0～值）精彩文档8.0实用标准文案对白蛋白敏感（70～pH值指示剂蛋100mg/L),对阴白质误差法球蛋白、黏蛋性白、本周蛋白对白蛋白敏感（70～pH值指示剂蛋100mg/L),对阴白质误差法球蛋白、黏蛋性白、本周蛋白敏感性差（PRO ) 季铵类消毒剂 等非电解质蛋白葡萄糖(GLU)

葡萄糖氧化酶 法乙酰乙酸：50～

阴 高VitC、乙酰乙酸，L-多性 过氧化物、强氧化剂污染 巴代谢物，高比密低pH尿酮体(KET)亚硝酸基铁氰化钠法酮体(KET)亚硝酸基铁氰化钠法100mg/L；丙酮：400～700mg/L；与β-羟丁酸不反应隐血（BLD)过氧化物酶法Hb0.3～0.5mg/L；RBC<10/ul性 苯丙酮、多巴代谢物 旧尿胆红素（BIL)尿胆原

偶氮法

5mg/L

阴 肌红蛋白、易热性触酶性 氧化剂和菌尿阴 吩噻嗪类药性阴性

VitC、蛋白尿、糖尿VitC、亚硝酸盐、光照（UBG)亚硝酸

偶氮法或Ehrich反应

10mg/L 或弱阳性

吩噻嗪类药物、胆色素原、亚硝酸盐、光照、重氮药胆红素、吲哚 物pH值<5，尿量过多、食盐（NIT）(LEU/WBC)

偶氮法中性粒细胞酯

0.5～0.6mg/L

阴 陈旧尿、亚硝酸盐或偶氮试剂污染、食物硝酸盐性 量丰富阴 甲醛、氧化剂、胆红素、

物硝酸盐含量过低、尿在膀胱内停留<4小时、非含硝酸盐还原酶细菌感染、VitC、亚硝酸盐以淋巴或单核细胞为主、酶法25ul 酶法25ul 性呋喃类药蛋白、庆大霉素1.0多聚电解质中03H+解离量与离子浓度相关1.010～1.030 ～1.0电解质性尿蛋白致SG↑碱性尿致SG↓3维生素C（VitC

酸性环境中还 原染料

阴 巯基化合物、胱氨酸、内 碱性性 源性酚精彩文档实用标准文案))(四)标本要求标本采集：见标本采集手册。2小时，没有按规定使用洁净、干燥的容器以及低于10ml的尿液。标本保存：应在2(五)设备和试剂设备。尿液分析仪，尿液分析仪通常由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。试剂。与尿液分析仪配套试纸条，在25±5℃干燥环境内贮存。试带以滤纸为载体，将各种括碘酸盐层和试剂层，碘酸盐层可破坏Vitc等干扰物质，试剂层与尿液所测定物质发生化学反最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。有些试带无碘酸盐层，但相应增加了1块检测Vitc精彩文档实用标准文案在。8保存。每周对尿液分析仪做维护保养。每月应进行尿液分析仪之间比对，取当日新鲜尿液阳性标本41份阴性标本，比对合格后写出比对报告，若不合格，检查原因，维护仪器，校准仪器，合格后再进行比对，并写校准、比对报告留档。(六)检测步骤(18～25℃)，上下颠倒几次混匀，拧开瓶盖后，直接将质控液滴在试纸上(多余的质控液不要吸人瓶中，在吸水纸蘸干)，用尿液分析仪测试。仪器操作步骤见使用说明书．原始测定数据应粘贴留档保存。审核者。(七)结果报告精彩文档实用标准文案(八)注意事项不得使用超过效期或变质的试纸条；试纸的变质会使反应区的颜色变浅或变深。能使用一次。为保护试剂的反应活性必须隔绝周围环境中的潮气、光和热。不要触摸试纸条的反应区，避免阳光直射。状态、人员操作等，纠正后，室内质控合格，方可检测临床标本。(九)质量控制分析前的质量控制正确留取标本，并在规定的时间内进检，运输时应避免阳光直射。vitc本久置，葡萄糖被细菌或细胞酶分解，可引起假阴性。了解检验对象可能影响尿化学检测的进食及使用药物的情况。尿样保存：尿样收集后应在2腐剂并冷藏保存。注意准确有效地标记尿标本。分析中的质量控制(1)用尿液质控品(阴性和阳性)监控仪器的工作状态；(2)严格、规范、正确的实验操作；(3)应使用与尿液分析仪配套的专用试带，注意试带的效期，注意防潮，避免变色后干扰实验。精彩文档实用标准文案分析后的质量控制分析检验结果的相关性，如有不符应及时复检，如表12表12检验结果的相关性分析化学分析结果潜血阴性潜血阳性WBC阴性WBC阳性蛋白质阴性

镜检结果多量RBC不见或少量RBC多量WBC不见或少量RBCWBCRBC管型增多

可能原因药物或其他物质RBC破碎药物干扰或慢性炎症其他物质干扰出现假阳性其他物质干扰出现假阴性化学分析亚硝酸盐为阳性，而尿蛋白质和白细胞均为阴性，可能因摄食含硝酸盐丰富的食物有关而造成的假阳性。糖尿病检验对象尿糖检测阴性，而VitC含量很高，会出现假阴性。检测结果有异议时应了解检验对象可能影响尿化学检测的进食和用药情况。尿化学分析结果与镜检不一致，应进一步查明原因。参考范围的认可：尿干化学分析仪检测白细胞、红细胞出现“假阴性”时，应以镜检为准；c精彩文档实用标准文案细胞破坏，中性粒细胞酯酶释放到尿中，导致仪器分析(+)，镜检反而(一)；②红细胞：肾病检验对象尿巾红细胞常破坏而释出血红蛋白或某些患者尿巾有高活性不耐热的触酶时均可导致仪器分析(+)，镜检却为(一)。尿液煮沸冷却后再测试可排除不耐热的触酶造成的假阳性。其他情况要结合临床实践，不能一概否定或肯定仪器检测结果，更不能随意调节改变仪器的灵敏度。(十)生物参考区间及临床意义pH值：随机尿pH值为2．比重：成人：1.003一l.030；新生儿：l.002～l.004。时比重增高，常见于糖尿病；有价值，慢性肾功能不全呈低比重尿。3.白细胞：阴性。阳性结果提示泌尿系及邻近器官有感染性病变如急、慢性肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎等；急性肾小球肾炎也可出现短期的白细胞尿。4.潜血：阴性。增加常见于肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤。蛋白质：阴性。病理性蛋白尿：可分为肾前性、肾性及肾后性蛋白尿。道的炎症、肿瘤、结石等。精彩文档实用标准文案亚硝酸盐：阴性。阳性多见于由大肠埃希菌引起的尿路感染。糖及精神激动等也可致阳性反应。服用大量维生素c娠剧吐、长期饥饿、营养不良、剧烈运动后也可呈阳性反应。对象的尿中，一般不见胆红素。尿胆原。正常人为弱阳性反应，尿液稀释20塞性黄疸。屎胆原增加常见于溶血性疾患及肝实质性病变如肝炎时。抗坏血酸(维生素阴性。尿微量白蛋白：阴性。当尿液中出现微量