蔬菜中维生素c含量测定

蔬菜中维生素c含量测定蔬菜中维生素c含量测定第1页

维生素C是一个己糖醛基酸，有抗坏血病作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜水果、蔬菜，尤其是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。

维生素C含有较强还原性，对光敏感，氧化后产物称为脱氢抗坏血酸，依然含有生理活性。深入水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。

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依据它含有还原性质能够测定维生素C含量。常见测定方法有：（1）2，6-二氯靛酚法

（还原型VC）（2）2，4-二硝基苯肼法

（总VC）（3）碘酸法（4）碘量法（5）荧光分光光度法蔬菜中维生素c含量测定第3页【目标】1．了解蔬菜中维生素C测定原理。2．掌握定量测定蔬菜中维生素C基础操作技术。【原理】用活性碳使样液中还原型抗坏血酸氧化成脱氢型抗坏血酸，然后使之与2,4-二硝基苯肼偶联生成红色脎。脎生成量与样液中总抗坏血酸量成正比。将脎溶于硫酸后进行比色定量。蔬菜中维生素c含量测定第4页【仪器】1．组织捣碎机2．刻度吸管3．100ml容量瓶4．50ml具塞量筒5．烧杯、三角烧杯6．电炉、滤纸7．漏斗8．移液管9．水浴锅10．722分光光度计

【试剂】1．9N硫酸2．2%2,4-二硝基苯肼溶液3．10%硫脲4．85%硫酸5．活性碳6．1%草酸溶液，2%草酸溶液。7．标准抗坏血酸应用液(100μg/ml

)蔬菜中维生素c含量测定第5页样品分析（1）样品提取

取西红柿100g，放料理机中，加2%草酸100ml，制成匀浆。称取匀浆4g,用1%草酸稀释、定容至100ml容量瓶中，过滤。（2）氧化

取上述滤液25ml于150ml锥形瓶中，加活性碳0.5g,振摇1min，过滤，滤液备用。【操作】

蔬菜中维生素c含量测定第6页（3）脎形成

取试管2支按下表操作。管号空白管样品样品氧化后滤液（ml）2.02.0

10%硫脲（滴）1

12,4-二硝基苯肼（ml）00.556℃1h取出，放置室温2,4-二硝基苯肼（ml）0.5

0样品分析蔬菜中维生素c含量测定第7页（4）脎溶解

各管置冰水浴中，分别滴加85%硫酸2.5ml，边加边振动。加完后从冰水中取出室温放置30min，在490nm波长下进行比色，以空白管调零，测样品管吸光度值。样品分析蔬菜中维生素c含量测定第8页2、标准曲线制备（1）氧化

取标准抗坏血酸应用液25ml于100ml锥形瓶中，加活性碳0.5g，振摇1min,过滤。取滤液10ml于100ml容量瓶中，用1%草酸稀释至刻度(含抗坏血酸10μg/ml)。（2）脎形成

取试管5支，按以下次序操作。管号01234抗坏血酸标准液(ml)00.51.01.52.0各管抗坏血酸含量（μg）051015201%草酸（ml）2.01.51.00.5010%硫脲（滴）111112,4-二硝基苯肼（ml）0.50.50.50.50.556℃1h取出，放置室温蔬菜中维生素c含量测定第9页2、标准曲线制备（3）脎溶解各管置冰水浴中，分别滴加85%硫酸2.5ml，边加边振动。加完后从冰水中取出室温放置30min，在490nm波长下进行比色，以0号管调零，测定各管吸光度值。以吸光度值为纵座标，抗坏血酸含量（μg）为横座标绘制标准曲线。依据样品管吸光度值查得样品中抗坏血酸含量。蔬菜中维生素c含量测定第10页式中：

X—样品中总抗坏血酸