徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测

徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第1页4/26/20232内容

YY0033洁净室（区）要求

相关法规和GMP中关于洁净室（区）内容比较

洁净室（区）测试/维护及验证产品微生物检测徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第2页4/26/20233生产环境污染与生产环境质量相关微粒污染

微生物污染路径通常有4种：A：本身污染－－因为患者或工作人员本身带菌而污染B：接触污染－－因为和非完全无菌用具，器械和人接触而污染C：空气污染－－因为空气中所含细菌沉降、附着或被吸入而污染D：其它污染－－因为昆虫等其它原因而污染细菌还可能产生毒性物质、色素等代谢产物徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第3页4/26/20234空气净化主要过程空气净化主要过程一是利用过滤器有效地控制送入室内全部空气洁净度，因为细菌都会依附在微粒上，微粒过滤同时也滤掉了细菌；二是利用合理气流组织排除已经发生污染，由送风口送入洁净空气，使室内产生微粒和细菌被洁净空气稀释后强迫其由回风口进入系统回风管路，在空调设备混合段和从室外引入经过过滤新风混合，再经过深入过滤后又进入室内，经过重复循环就能够把污染控制在一个稳定水平上，这个水平就应该低于对应洁净度等级；三是经过调整，使不一样等级洁净室室内空气静压大于5帕（包含与非洁净区），与室外大气大于10帕，预防外界污染或交叉污染从门或各种缝隙部位侵入室内。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第4页4/26/20235空气净化系统三级过滤示意图徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第5页4/26/20236经过净化隔绝或排除污染合理设计建立洁净厂房和有效管理在无菌医疗器械生产中会表达出非常优越性能，它经过对墙体、地板、屋顶、管线、水源、照明、通风和温度湿度等功效设计到达内部洁净环境，经过空气三级过滤使进入洁净室空气是符合要求，它能够经过人员和物料净化程序隔绝或消除外来污染，经过气流组织、压差和换气次数等参数抑制微生物、微粒污染，它能够排除因为光、味道、相对湿度等造成任何质量损害，经过严格工艺纪律到达防止交叉污染目标。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第6页4/26/20237法规YY0033无菌医疗器具质量管理规范医疗器械管理条例其它相关规章徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第7页4/26/20238生产环境、实施及布局厂址及厂区

厂址选择：（5.1.1~5.1.2）

远离空气污染、水质污染、振动或噪声干扰区域.徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第8页4/26/20239生产环境、实施及布局厂址及厂区

厂区内布局（5.1.3~5.1.5）厂区道路和绿化、生活区和辅助区对生产区不产生污染为标准.徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第9页4/26/202310生产环境、实施及布局生产厂房

普通生产区：（5.2.1）应设计合理，采光、通风良好，能满足生产需要.徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第10页4/26/202311生产环境、实施及布局生产厂房

普通生产区：（5.2.1）应设计合理，采光、通风良好，能满足生产需要.徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第11页4/26/202312生产环境、实施及布局洁净区 洁净度等级和洁净度等级设置（5.2.2.1)附录A;附录B徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第12页4/26/202313生产环境、实施及布局无菌医疗器具产品生产环境洁净度等级设置指南（附录B） 洁净度设置标准：

1、依据产品技术要求，采取使污染降至最低限技术；

2、依据工序不一样要求，采取不一样洁净度等级.可采取局部工作区与和全室空气净化相结合.徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第13页4/26/202314生产环境、实施及布局洁净区内表面（5.2.2.2）洁净区密封性（5.2.2.3）洁净区门设置（5.2.2.4/5）工艺流程布局（5.2.2.6）洁净区内水电设施（5.2.2.7）洁净区照明（5.2.2.8）洁净区内操作台要求（5.2.2.9）洁净区内使用压缩空气要求（5.2.2.10）水池、地漏等（5.2.2.11）徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第14页4/26/202315生产环境、实施及布局人员净化 人员净化室（5.3.1） 净化程序（5.3.2） 人员净化中换鞋要求（5.3.3） 人员流向（5.3.4） 盥洗室和风淋房设置（5.3.5/6） 洁净区人均面积限制（5.3.7）徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第15页4/26/202316生产环境、实施及布局物料净化 清洁办法（5.4.1） 物料传递（5.4.2） 物料包装（5.4.3）徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第16页4/26/202317生产环境、实施及布局工艺布局 按产品形成过程顺向布置（5.5.1） 洁净室内工艺装备和设施、产品中间库、不一样洁净等级之间物料传递（5.5.2/3/4） 洁净室内器具和洁具管理（5.5.5/6）徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第17页4/26/202318洁净区周围环境及格局洁净室（区）周围环境应保持清洁整齐，没有露土地面。洁净厂房周围道路面层，应选取整体性能好、发尘少材料。洁净厂房周围应进行绿化，可铺植草坪，但不应种植对生产有害植物，并不妨碍消防作业。洁净室（区）应布置在厂区内环境清洁，人流物流不穿越或少穿越区域。洁净室（区）应为密闭厂房。生产企业能够依据产品分类和用途确定对应洁净等级，并据此结合生产工艺进行净化厂房设计和施工，以确保产品在符合要求环境里生产。应考虑与产品生产流程相匹配。以最短时间，即最小被污染标准来制订。普通来说，生产流程是按照产品生产流向次序排列，不迂回交叉，不相互影响；应考虑影响洁净指标原因，主要是厂房结构、装修材料、门窗、生产设备、布局、工艺、人员等等，应在满足使用要求同时满足洁净要求。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第18页4/26/202319洁净室基础要求HVAC系统工程、工艺布局和相关维护设施应遵照物料和产品发生任何污染危险度降至最低标准。当生产技术不能确保生产不受污染或不能有效排除污染时，该生产区域洁净等级应在条件许可前提下提升生产控制区应为密闭空间，内表面应平整光滑，无颗粒物脱落，墙面和地面能耐受清洗和消毒，以降低灰尘积聚。应使用现行设计和安装标准徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第19页4/26/202320对洁净室（区）测试要求换气次数（截面平均风速）温度相对湿度静压差悬浮粒子浮游菌沉降菌噪声照度徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第20页4/26/202321各国法规比较药品生产质量管理规范（1998年修订）兽药生产质量管理规范（年修订）CodeofGMPforMedicinalProducts(Draft,，FDA)AustralianCodeofGMPforMedicinalProducts(16August)CodeofGMPforMedicinalProducts(，EU)ISO14644CleanroomsandassociatedcontrolledenvironmentsISO14698Cleanroomsandassociatedcontrolledenvironments－BiocontaminationcontrolUSP27-1116MicrobiologicalEvaluationofCleanRoomsandOtherControlledEnvironmentsPDABethesda,Maryland,USA－

MicrobiologicalRiskAssessmentinPharmaceuticalCleanRoomsGB50073－

洁净厂房设计规范JGJ71－90洁净室施工和验收规范等等徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第21页4/26/202322以悬浮粒子为例与国际标准比较动态与静态分级数值对关键区控制徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第22页4/26/202323ISO/TC20914644.1Classificationnumber(N)0.10.20.30.515ISOclass1102ISOclass210024104ISOclass31000237102358ISOclass4100002370102035283ISOclass51000002370010200352083229ISOclass6100000023700010352008320293ISOclass735832002930ISOclass83508329300ISOclass93500830293000徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第23页4/26/202324以浮游菌为例与国际标准比较EUGMP附录

1FDAGMPUSP27TGAGMPISO14644洁净度等级标准洁净度等级标准洁净度等级标准洁净度等级标准洁净度等级GradeA<1100<1M3.5≤3GradeA<1Class5GradeB≤101000≤7//GradeB≤10Class6GradeC≤10010000≤10M5.5≤20GradeC≤100Class7GradeD≤200100000≤100M6.5≤100GradeD≤200Class8/////////徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第24页4/26/202325以沉降菌为例与国际标准比较EUGMP附录

1FDAGMPUSP27TGAGMPISO14644洁净度等级标准洁净度等级标准洁净度等级标准洁净度等级标准洁净度等级GradeA<1100<1M3.5/GradeA<1Class5GradeB≤51000≤3//GradeB≤5Class6GradeC≤5010000≤5M5.5/GradeC≤50Class7GradeD≤100100000≤50M6.5/GradeD≤100Class8/////////徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第25页4/26/202326以换气次数、压差为例比较换气次数静压差关于测试状态徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第26页4/26/202327洁净室（区）分类举例首先应布局合理、质量可控其次应重视HVAC系统功效协调(1)洁净送风机组：三级过滤、去湿增湿、空气调整等装置等。系统新风量为总送风量10～30％，普通人均新风占有量为40m3，洁净机组送风量设计换气次数应大于验收标准，机组功效是处理新风和回风；(2)送回风管路：管道、调整筏、防火阀，有装有消声装置等，功效是输送较为洁净空气；(3)洁净室布局按最低污染标准，主要是明确生产工艺流程、明确人流物流和气流走向、预测若到达设计指标后净化系统运转产生后果，然后确定最终格局。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第27页4/26/202328值得关注问题空调机组设计和安装与生产需求不适应回风管道设计和安装不合理厂房布局不适应工艺流程及其空气洁净度要求，比如，生产区作为人流或物流通道，交叉往返太多，盥洗室和生产区或贮存区直接往来相通。不一样生产操作和相邻厂房之间未能有效隔离，且有妨碍不一样空气洁净度等级洁净室（区）之间人员和物料出入，没有预防交叉污染产生，尤其室等级不一样窗户之间没有缓冲设施洁净室（区）与非洁净室（区）之间，没有些人、物独立缓冲设施，人流、物流走向也不合理10000级洁净室（区）使用传输设备穿越了更低等级区域徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第28页4/26/202329洁净室（区）测试方法测试人员测试仪器测试方法注意事项徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第29页4/26/202330人员和物品出入控制在洁净室（区）内，所需工作人员应满足最小数量，同时，洁净环境以外区域工作人员也应尽可能监控。这在满足测试条件时尤其主要；不得在洁净室（区）内佩戴腕表和饰物、不得化装；洁净工作服选材、式样及穿戴方式应与生产操作空气洁净度等级要求相适应全部工作人员，包含与测试、维护相关人员，应该定时接收与洁净室（区）生产相关培训，其中包含包括到卫生知识和基础微生物知识洁净室（区）测试人员应进行本专业培训并取得对应资格后才能推行对洁净室（区）测试职责徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第30页4/26/202331注意事项在进行测试之前，应先确定待测区域、测试状态、仪器设备、测试规程、采样点位置、评价标准以及相关注意事项；建立环境监测程序，这么才能证实设备以及产品接触环境是洁净和卫生，并能够确定潜在污染物是否能被控制到适当水平；全部仪器设备在未进入被测区域时，应确保其符合性、有效性和已完成清洁，或在对应洁净室内准备和存放（用保护罩或其它适当地外罩保护仪器）；测试人员在测试时必须穿戴符合被测环境等级洁净工作服；在测试时应防止肤屑、微生物或人体皮肤上油造成潜在污染；徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第31页4/26/202332测试方法测试次序温度,相对湿度影响换气次数/风速影响静压差影响气流组织与自净时间对测试影响测试数据处理徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第32页4/26/202333检测结果评价检测数据经过整理后，能够与标准值比较后得出结论。检测时应做好统计，统计包含足够信息。现场统计会发给大家。标题、统计唯一性标识（如编号等）、工序或洁净室名称、检测日期、采取标准、采取仪器名称及编号、检测项目、检测数据及其计算、署名等徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第33页4/26/202334维护及验证微生物控制人员以及管理良好规范以及执行Part2SupplierGuidePart1UserGuide徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第34页4/26/202335人员管理有能力，有资格，有经验数量充分组织机构完善、关键岗位人员配置合理生产，工程，维护，保洁等部门全部员工培训：洁净厂房，卫生学，微生物学以及行为基础培训制订健康要求，行为规范，服装规则控制人员到最小量，出入控制徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第35页4/26/202336ＨＶＡＣ系统验证测试项目气溶胶对ＨＥＰＡ检漏气溶胶测定仪1.jpg自净时间气流流型动态重现性关键区控制微生物其它常规项目标测试验证评价回顾性验证徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第36页4/26/202337HVAC系统验证步骤常规验证工作有以下几个步骤；1，设置验证组织机构（验证小组等）；2，制订验证计划，确定所需设备、系统、过程和时间表；3，制订验证方案，必须确定为到达预期目标含有可操作性验证方法；包含验证目标、适用范围、系统或设备、验证方法、可接收标准、实施步骤等4，按照验证方案实施；5，搜集验证数据出具验证汇报，包含验证结果、验证评价和提议，再验证周期等。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第37页4/26/202338微生物基础知识定义：自然界中除动植物外，还存在一个庞杂，形态微小结构简单生物类群，因个体微小，肉眼不能看到，需借光学显微镜或电子显微镜放大几百，几千，几万倍才能看到。这类微小生物统称为微生物（microorganism）特点：形体小，结构简单，新陈代谢能力强，生长繁殖快，细胞未显著分化，易发生变异，种类多分布广。举例：细胞，真菌分布：土壤，空气，水，动植物人体表，腔道中等徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第38页4/26/202339微生物主要特征细菌和菌类名称

单体尺寸（μm） 菌类（含真菌） 3··80

枯草菌 5··10

水肿菌 5··10

肺炎杆菌 1.1··7

乳酸菌 1··7

白喉菌 1··6

大肠菌 1··5

结核菌 1.5··4

破伤风菌2··4

伤寒杆菌 1··3

普通化脓杆菌 0.7··1.3

白色（黄色）葡萄球菌 0.3··1.2

炭疽杆菌

0.46··0.56徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第39页4/26/202340微生物基础知识对于细菌生长来说所需营养物质有：水，碳源（有机：糖类；无机：CO2），氮源（N2，硝酸盐，铵盐，有机蛋白胨，氨基酸等），生长因子（维生素，氨基酸，嘌呤，嘧啶），无机盐（磷酸盐，硫酸盐，氯盐，

钾盐，钠盐，镁盐，钙盐等）徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第40页4/26/202341微生物基础知识生长条件：1.充分营养2.适当pH值，6.8-7.43.适当温度，哺乳动物寄生为35℃，其它腐生为25℃

4.气体：氧气，二氧化碳徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第41页4/26/202342微生物基础知识培养方法：固体培养基：接种于平板固体培养基上，由单个繁殖形成肉眼可见集团—菌落菌落特点判定：大小，形状，光滑或粗糙，色泽（固体培养基上）；若于液体培养基中，有菌生长则呈混浊。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第42页4/26/202343微生物基础知识细菌生长：分为延迟期，对数生长久，稳定时，衰亡期。其中，对数生长久是细菌生长最旺盛时期，很多药品选择在这一时期作用最有效，咱们观察细菌生长也是在这一时期最显著。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第43页4/26/202344微生物基础知识霉菌：丝状真菌统称，有分支或不分支菌丝与孢子组成，形成菌落疏松呈绒毛状絮状。结构：细胞壁，细胞膜，细胞浆，细胞核。特点：对酸不敏感，pH2-9，生长温度为22-28℃。徐敏凤医疗器械无菌环境控制及微生物检测第44页4/26/202345革兰氏染色法分类判定菌种主要指标初染（结晶紫）媒染（碘液）脱色（95%乙醇）复