药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座专家讲座

第十章甾体激素类药品分析药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第1页基本结构：环戊烷骈多氢菲ABCD12345678910111213141516171819药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第2页分类：甾体激素肾上腺皮质激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第3页肾上腺皮质激素氢化可松药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第4页肾上腺皮质激素醋酸地塞米松药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第5页雄性激素丙酸睾酮药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第6页蛋白同化激素苯丙酸诺龙药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第7页孕激素黄体酮药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第8页雌激素炔雌醇药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第9页一、结构与性质1.肾上腺皮质激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应

C17

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α–醇酮基还原性药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第10页2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应

C17–

β–羟基可成酯药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第11页3.孕激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应C17–甲酮基与亚硝基铁氰化纳反应C17–乙炔基与AgNO3反应药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第12页4.雌激素主要活性基团性质A环为3–OH苯环UV、与重氮苯磺酸盐反应C17–乙炔基与AgNO3反应C17–羟基可成酯药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第13页二、判别试验（一）与强酸呈色反应甾体激素类药品呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第14页(二)官能团反应肾上腺皮质激素药品呈色四氮唑盐OHˉ1C17

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α–醇酮基还原性A.呈色反应药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第15页肾上腺皮质激素药品Cu2O↓橙红色碱性酒石酸铜B.沉淀反应Ag↓黑色氨制硝酸银药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第16页甾酮类激素药品呈色羰基试剂2.C3–酮基和C20–酮基＃惯用羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第17页异烟腙（黄色）睾酮药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第18页黄体酮异烟双腙（黄色）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第19页含有甲酮基或活泼亚甲基甾体激素类药品呈色亚硝基铁氰化纳间二硝基酚芳香醛3.甲酮基药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第20页黄体酮蓝紫色亚硝基铁氰化纳其它甾体淡橙色不显色药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第21页黄体酮药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第22页蓝紫色药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第23页有机氟Fˉ有机破坏有机氯Clˉ4.有机卤素茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸—硝酸银AgCl↓呈色药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第24页茜素氟蓝蓝紫色F-药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第25页雌激素类药品红色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羟基药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第26页含炔基甾体激素银盐沉淀硝酸银6.乙炔基↓药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第27页炔雌醇白药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第28页△KOH(三)制备衍生物测定m.p.药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第29页△△药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第30页（四）水解产物反应药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第31页药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第32页△４-3-酮240nm苯环280nm（五）UV法药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第33页3300～3000cm-13000～2700cm-11900～1650cm-11650～1450cm-11000～650cm-1（六）IR法3750～3300cm-1ν药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第34页醋酸可松结构特征：△4–3–酮、C17–OHC20–酮基、C11–酮基、醋酸酯药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第35页结构特征：△4–3–酮、C17–OHC17–乙炔基炔诺酮药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第36页结构特征：酚羟基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第37页（七）TLC法

主要用于甾体激素类药品制剂判别

方法：对照品法要求供试品溶液所显主斑点颜色和位置与对照品溶液主斑点相同。药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第38页（八）HPLC法

主要用于甾体激素类药品制剂判别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）

方法：对照品法要求在含量测定项下统计色谱图中，供试品峰tR与对照品峰tR一致。药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第39页三、杂质检验（一）其它甾体定义与标示药品结构不一样甾体化合物都称为“其它甾体”药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第40页Li/NH3C2H5OH弱酸雌二醇－3－甲醚苯丙酸诺龙合成路线III药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第41页强酸苯丙酰氯HClIII药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第42页

特点（1）可能存在多个甾体杂质（2）结构类似2.起源原料、中间体、异构体、降解产物药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第43页4.方法（含有一定分离能力）

TLC法（高低浓度对比法）

HPLC法（类似高低浓度对比法）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第44页（1）TLC法（高低浓度对比法）判定方法：要求杂质斑点数目要求杂质斑点颜色药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第45页特点：（1）简便易行，不需特殊仪器；（2）不需对照品；（3）只能控制单个杂质限量；（4）要求杂质与主成份显色灵敏度靠近。药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第46页（2）HPLC法（高低浓度对比法）判定方法：要求杂质峰数目要求杂质峰面积药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第47页（二）游离磷酸地塞米松磷酸钠氢化可松磷酸钠倍他米松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠对照品法药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第48页原理：方法：药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第49页（对照液

0.0035%KH2PO4）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第50页（三）甲醇和丙酮（灵敏度法）甲醇不得出峰检测限=3.1ng丙酮≤5.0%

内标法+校正因子GC法药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第51页炔雌醇药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第52页（四）雌酮原理Zimmermann反应碱性KOH乙醇高纯度药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第53页硒四、起源合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢原理方法药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第54页四、含量测定（一）UV法△４-3-酮240nm（±）肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯环280nm（±）雌激素药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第55页（二）反应分光光度法1.适合用于非分光光度活性药品2.使待测组分光谱位移，防止干扰3.增加测定灵敏度4.增加选择性弱、非分光光度活性药品强分光光度活性药品化学反应药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第56页

肾上腺皮质激素类C17-α－醇酮基强还原性1.原理OH-[还原]四氮唑比色法药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第57页[O]OH-分子重排药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第58页蓝四氮唑（BT）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第59页双甲瓒（暗蓝）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第60页2.方法ChPTTC（RT）BPTTC（RT）USPBT对照品法40～45′暗药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第61页3.讨论（1）基团对反应速度影响C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯C16不论何种取代基ν↓药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第62页（2）溶剂、水分影响含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→几无反应—无醛无水乙醇醛→A↑—无水乙醇药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第63页（3）O2与光线影响反应过程反应产物怕光→避光、快速O2影响颜色强度和稳定性→隔绝空气、快速、充N2药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第64页（4）碱种类及加入次序反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行以氢氧化四甲基铵结果最正确加入次序：药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第65页（5）温度与时间t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑→%↓ChP25℃40～45′BP30℃1h药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第66页4.特点：缺点影响原因太多优点测定结果能指示药品稳定性（氧化及降解产物无此反应）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第67页肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（缩合）异烟肼比色法药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第68页异烟腙（黄色）药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第69页2.方法暗45′对照品法药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第70页3.讨论反应速度（1）C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反应反应专属性C3－酮基药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第71页（2）溶剂选择异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇无水甲醇无水乙醇药物分析甾体激素类药物的分析专业知识讲座第72页（3）水分、O2与光线影响含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓