芳胺类药物含量测定

芳胺类药物含量测定第1页/共21页

芳胺类药物含量测定第2页/共21页非水溶液滴定法分光光度法盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定比色法高效液相色谱法第3页/共21页非水溶液滴定法定义：非水滴定是在除水以外的溶剂中进行的滴定方法。适用范围：有机碱、有机碱（K<10-7）及其盐类溶剂的选择：能增强样品的酸（碱）性；对试样的溶解性好；纯度高，使用安全，挥发性小，易回收。

第4页/共21页

常用的溶剂

质子性溶剂

非质子性溶剂

混合溶剂

注意弱碱性药物——酸性溶剂弱酸性药物——碱性溶剂

碱性溶剂:受质子如乙二胺，DMF酸性溶剂：给质子如冰醋酸无转移性质子，只起分散和稀释作用，如氯仿质子性溶剂和非质子性溶剂合用，如冰醋酸－酸酐第5页/共21页

常用的方法：非水碱量法——在酸性溶剂中用高氯酸滴定剂滴定弱碱性药物。常用溶剂——冰醋酸；滴定剂——高氯酸滴定液；指示剂——结晶紫；非水酸量法——在碱性溶剂中用甲醇钠滴定剂滴定弱酸性药物。常用溶剂：乙二胺、二甲基甲酰胺；滴定剂：甲醇钠滴定液指示剂：麝香草酚蓝第6页/共21页

盐酸利多卡因的非水滴定原理：侧链烃胺的叔氨基有弱碱性，在冰醋酸中，与高氯酸可以进行酸碱滴定。第7页/共21页醋酸汞作用：药物为盐酸盐，高氯酸滴定时有氢卤酸生成，影响滴定终点，加入醋酸汞，清除氢卤酸的干扰。醋酐作用：有利于增强被测物的碱性。非水操作、标定液温度、滴定终点的确定

注意第8页/共21页思考题？

本章药物采用非水滴定的药物有：盐酸利多卡因，盐酸丁卡因，盐酸布比卡因。它们可以用亚硝酸钠法测定吗？为什么？第9页/共21页分光光度法应用：对乙酰氨基酚原料及其制剂含量测定测量方法：

中国药典(2000版):百分吸收系数（E1％1CM）法原理：对乙酰氨基酚在0.4％NaOH溶液中，于257nm处有最大吸收。

USP(24)：对照品比较法原理：对乙酰氨基酚在甲醇－水混合溶剂中，于244nm处测A。优点：较亚硝酸钠滴定法灵敏度高，操作简单。第10页/共21页中国药典(2000版):百分吸收系数（E1％1CM）法方法：本品40mg＋0.4％NaOH50ml→

250ml，摇匀，精密量取5ml，0.4％NaOH10ml→

100ml,257nm处测A。E1％1cm

＝715计算：A=E1%cm×C×LC%=A/E1%cm水＝A×

50×100×1000715

×40样品%＝A

×FE1%cm×W第11页/共21页

USP(24)：对照品比较法方法：分别配置供试品和对照品，在同样条件下测A，计算含量。

计算：A样/A标=C样/C标样品%=A样/A标×C标×F/W×100%

比较：

USP(24)：消除其它成分、仪器和溶剂等对光的反射和吸收带来的测定误差；需要有标准品；多次测定。ChP(2000):无需标准品；测定一次；仪器等误差大。第12页/共21页荧光分析法原理：物质受光照射后，发射出荧光，在一定浓度范围内，当激发光强度等外界条件一定时，物质的荧光强度与浓度成正比关系。特点：灵敏度高，专属性好。

本身或与荧光衍生剂作用产生荧光

低浓度溶液中进行须做空白对照

要求高浓度——熄灭第13页/共21页

荧光分光光度计12λex457λem1－光源2－单色光器13、6－狭缝4－样品池5－单色光器27－检测器36吸收池；仪器装置成直角注意：F测紫外吸光度Fnm激发光谱荧光光谱第14页/共21页测定方法：

标准对照法（一点法）

Ci=(Ri-Rib)/(Rr-Rrb)×Cr

标准曲线法（y=bx＋a）由标准曲线或回归方程求出C样，再根据F，W求出样品%。注意：灵敏度高，干扰因素多，因此多采用标准品对照法.第15页/共21页

盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定：原理：芳伯氨基＋荧胺→荧光物质→测定λex

400nm,λem485nm处荧光强度。第16页/共21页

计算：

标准曲线法注意：反应条件：ＰＨ7.5(磷酸盐缓冲液)

本法也适用于普鲁卡因胺制剂的测定，若测定浓度大于0.25ug/ml～2.5ug/ml的注射液时，可用水适当稀释后测定。优点：与芳伯氨基重氮化法比较灵敏度高，操作简单.第17页/共21页比色法原理：有色物质溶液的颜色深浅与浓度有一定关系，且有色物质在可见光区有一定吸收，通过测定A来测定物质浓度。方法：（1）重氮化－偶合反应→有色偶氮染料

特点:专属性低，凡能重氮化的有机化合物均可以。

（2）经缩合反应生成有色络合物以盐酸普鲁卡因为例介绍：第18页/共21页原理：方法：标准曲线法特点：专属性强，准确。适合于盐酸普鲁卡因及其制剂，普鲁卡因青霉素及其注射剂的测定。肾上腺素、青霉素、焦亚硫酸钠、硝基苯及氯甲酚等不干扰。第19