医学实验动物学专家讲座

《医学试验动物学》试验课医学实验动物学专家讲座第1页试验一大、小鼠给药、采

血、麻醉和解剖医学实验动物学专家讲座第2页试验目标1.掌握大小鼠惯用给药方法和采血技术2.掌握大小鼠麻醉方法和解剖步骤3.熟悉大小鼠解剖结构

医学实验动物学专家讲座第3页小鼠抓取和固定医学实验动物学专家讲座第4页医学实验动物学专家讲座第5页注意点抓取小鼠时动作要快速，要轻预防被小鼠转过头咬，抓其颈后皮肤要多假如被咬，应马上挤出血液，清水冲洗医学实验动物学专家讲座第6页大鼠抓取与固定医学实验动物学专家讲座第7页小鼠灌胃（给药方法之一）将试验小鼠徒手固定灌胃针从嘴角处插入口腔内，紧贴咽后壁插入食道（1ml注射器，深度大约为3cm）推进针管给药（生理盐水）注意不要插入气管，不要抓太紧以致小鼠窒息死亡医学实验动物学专家讲座第8页医学实验动物学专家讲座第9页小鼠尾静脉注射（给药方法之二）固定器固定小鼠消毒尾部，扩张血管，左右两侧静脉将尾巴成一个适宜注射角度，1ml注射器平行向心方向刺入静脉血管干棉球压迫止血注意排除气泡注射点由尾部远端尾静脉医学实验动物学专家讲座第10页医学实验动物学专家讲座第11页小鼠眼底静脉丛采血一人徒手固定小鼠于桌面上，使眼球充分向外突出将注射器针头从内眼角位置插入眼球和眼眶之间，进针约0.5cm（1ml注射器）另一人慢慢抽动针管采血注意要将小鼠固定好，预防其头动医学实验动物学专家讲座第12页小鼠麻醉方法腹腔麻醉：进针点为右下腹腔，进针角度为与身体成45度，深度约1cm。麻药：麻醉药为3.5%水合氯醛，剂量按小鼠体重0.1ml/10g，20g小鼠为0.2ml医学实验动物学专家讲座第13页小鼠心脏采血右下腹腔麻醉（麻醉药为3.5%水合氯醛，剂量按0.1ml/10g)待其麻醉后，仰卧位固定在解剖板上胸骨左侧，腋窝平行线下2-3肋骨间，小鼠心搏动最强处斜行刺入（1ml注射器）迟缓抽动针管采血取血量多时采取（一样适合用于大鼠）医学实验动物学专家讲座第14页大鼠心脏采血麻醉：右下腹腔，麻醉药为33.5%水合氯醛，剂量按大鼠体重0.1ml/10g，心脏采血方法同小鼠医学实验动物学专家讲座第15页大鼠心脏采血医学实验动物学专家讲座第16页大致解剖观察及绘图1.将SD大鼠用33.5%水合氯醛腹腔麻醉，按0.1ml/10g体重。

2.待大鼠麻醉后，腹部朝上固定于解剖板。

3.用10cm剪刀从下腹部向上剪开皮肤，打开腹腔，观察腹腔内脏器，观察大鼠肝脏时尤其注意大鼠无胆囊。

4.用14cm剪刀打开胸腔，观察胸腔脏器。

5.依据大致解剖所见，绘图。医学实验动物学专家讲座第17页解剖观察医学实验动物学专家讲座第18页操作项目小鼠：灌胃、尾静脉注射、眼底静脉丛采血大鼠：心脏采血*、麻醉后解剖观察医学实验动物学专家讲座第19页试验二

1.模拟肿瘤（组织块）移植

2.裸鼠与正常小鼠免疫器官比较

医学实验动物学专家讲座第20页试验目标了解试验裸小鼠和KM鼠胸腔结构了解正常胸腺结构与不增殖胸腺基形态掌握正确胸腺摘除方式掌握组织块皮下移植基本技术医学实验动物学专家讲座第21页试验原理哺乳动物胸腺是T淋巴细胞分化成熟场所，而T淋巴细胞是参加宿主对异体组织或细胞排斥主要成份，裸鼠胸腺原基从第三咽囊起不能发育，所以，裸鼠囊状很小胸腺残基保持终生。胸腺不增殖造成成熟T淋巴细胞数大量降低，其结果是裸鼠机体不能排斥同种异体和异种间组织器官移植。人类肿瘤能在裸鼠体内生长，使裸鼠作为一个疾病模型载体，广泛地利用于研究人类移植性肿瘤生长和转移。医学实验动物学专家讲座第22页影响被移植动物组织或细胞成活原因组织相容性宿主对移植物血供供体组织或细胞活性其它原因医学实验动物学专家讲座第23页模拟移植物选择肾脏组织是哺乳动物中血供很好、活力较强组织医学实验动物学专家讲座第24页试验步骤1(麻醉解剖小鼠）分别将裸鼠和KM鼠腹腔注射3.5%水合氯醛，按0.1ml/10g体重。待小鼠麻醉后，腹部朝上固定于小鼠固定板上。以3%碘酒棉球和75%酒精棉球进行皮肤消毒；同时，对裸鼠腋部进行消毒。用直头剪刀于KM小鼠生殖口上端切一小口，沿腹部两侧作弧型切开，直至胸膈肌根部。医学实验动物学专家讲座第25页试验步骤2(观察胸腺)观察膈肌形状后，于两侧根部分别切一小口，将膈肌横向切开，绞断肋骨，直至锁骨，然后掀起胸骨，暴露整个胸腔。直视心脏，在心脏上部，主动脉弓处，有两片乳白色蝴蝶状小片，即为胸腺。医学实验动物学专家讲座第26页试验步骤3（取肾脏组织）用圆头镊将肠道拨向对侧，暴露肾脏。用眼科剪刀取下肾脏，剥去肾包膜，放入盛有生理盐水培养皿中。用剪刀将肾脏分解为若干2*3mm组织小块，取边缘整齐、色泽红润为佳。将一小块肾组织放入套筒针内备用。医学实验动物学专家讲座第27页试验步骤4（组织移植）选取组织目标区域，惯用区域为肋侧（近腋窝处）。在离目标区域中心点1-2cm处，用眼科小剪刀作一2-3mm切口。用套筒针在切口处刺入皮下直至目标中心区域，将组织块推入，并快速拔出。医学实验动物学专家讲座第28页试验步骤5麻醉、解剖裸鼠，与KM鼠比较胸腺区分裸鼠胸腺只剩残基，基本上看不到医学实验动物学专家讲座第29页医学实验动物学专家讲座第30页医学实验动物学专家讲座第31页试验汇报要求:完成试验指导上第3