血清中葡萄糖浓度

血清中葡萄糖浓度第1页，共12页，2023年，2月20日，星期日问题：血清中葡萄糖浓度测定的方法有很多，在实验设计上，这些方法分别利用了葡萄糖的那些性质？如何排除血清内其他物质的干扰，使所测血清葡萄糖浓度更准确？葡萄糖氧化酶法测血糖的原理是什么？本实验为何需要用到两种酶？与其他方法相比，本实验有哪些优缺点？第2页，共12页，2023年，2月20日，星期日知识窗酶法分析是指用酶作为工具定量测定某种物质含量的分析方法。定量分析的目标可以是酶的底物，辅酶，也可以是酶的激活剂或抑制剂。第3页，共12页，2023年，2月20日，星期日酶法分析的主要方法：

单酶反应定量法和偶联酶反应定量法单酶反应定量法：指用一种酶为工具酶定量测定某种物质的方法。偶联酶反应定量法：当单酶反应底物或产物反应底物或产物噢物理化学手段无法区分时，还可以借助另一种酶作为指示酶，通过欧联反应进行定量分析。第4页，共12页，2023年，2月20日，星期日实验目的：掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理。掌握血糖变化的临床生理意义第5页，共12页，2023年，2月20日，星期日实验原理：血清葡萄糖是用以过氧化物酶作指示酶的偶联酶反应定量法测定的。葡萄糖氧化酶利用氧将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时释放出过氧化氢。过氧化物酶催化过氧化氢氧化色素原，并使色素原氧化成色素，即Trinder反应。葡萄糖+O2+H2O

GOD葡萄糖酸+2H2O22H2O2+4-氨基安替比林+苯酚POD

红色醌类化合物第6页，共12页，2023年，2月20日，星期日操作步骤：

取三只试管按表操作

项目空白管标准管测定管血清（ml）

————0.020葡萄糖标准液（ml）——0.020——蒸馏水（ml）0.020————酶-酚混合试剂（ml）3.003.003.00混匀，置于37度水浴中，保温25min,在波长510nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管的吸光度第7页，共12页，2023年，2月20日，星期日计算公式：

A测定血清葡萄糖浓度=×5mmol／L

A标准参考值：空腹血清葡萄糖浓度:3.89～6.11mmol／L

第8页，共12页，2023年，2月20日，星期日注意事项：葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖高度特异，葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。此法可直接测定脑脊液葡萄糖的含量，但不能直接用于测定尿液葡萄糖含量。因红细胞的酵解将导致测定结果偏低，建议测定样品以草酸钾-氟化钠为抗凝剂抑制葡萄糖酵解。严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先之辈无蛋白血滤液，然后再进行测定。第9页，共12页，2023年，2月20日，星期日临床意义：生理性高血糖：摄入高糖食物，情绪紧张病理性高血糖：①糖尿病②内分泌腺功能障碍③颅内压增高④脱水引起高血糖生理性低血糖：见于饥饿和剧烈运动病理性低血糖：特发性功能性低血糖，依次是药源性，肝源性和胰岛素瘤等。第10页，共12页，2023年，2月20日，星期日思考题：标准葡萄糖储存液与应用液中都含有苯甲酸钠，苯甲酸钠起什么作用？列举几种血清葡萄糖定量测定的方法和原理。本实验原理为酶促化学反应，为何未加终止剂终止酶的反应？本实验涉及显色反应，该反应与血清碱性磷酸酶活力测定中的显色反应有何异