试剂与主要仪器

试剂与主要仪器第1页，共25页，2023年，2月20日，星期日引言茶叶的神奇功效：利尿排毒；除脂解腻，促进消化；消除疲劳；增强记忆力；消炎抑菌；预防龋齿；抗癌、抗辐射、抗衰老；防止高血压等第2页，共25页，2023年，2月20日，星期日分类含量（在干重中）具体成分生理作用蛋白质20％～30％各种蛋白质氨基酸1％～4％茶氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸和异亮氨酸等25种以上是人体必须的营养成分；降低血氨，治疗肝昏迷；调整脂肪代谢生物碱2％～5％以咖啡碱的含量最多提神；利尿；促进血液循环；降胆固醇；防止动脉粥样硬化等茶多酚20％～35％儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等四大类物质降血脂；消炎抑菌；防辐射；抗癌、抗突变等糖类20％～25％淀粉、纤维素、半纤维素、木质素类脂类8％脂肪、磷脂、甘油脂、糖酯和硫酯调节人细胞的渗透压

维生素0．6％～1％维生素A、维生素D、维生素C、维生素B族保护视力；增加抵抗力；抗坏血病，抗氧化、抗衰老等矿质元素3．5％～7．0％Ca、K、P、Mg、Mn、F、Cu、Zn、I、Se等防止味觉异样；防止皮肤过敏；抗氧化；增强免疫力；预防蛀牙等第3页，共25页，2023年，2月20日，星期日茶叶中主要成分含量的测定

蛋白质的测定茶多酚的测定咖啡碱的测定金属元素的测定第4页，共25页，2023年，2月20日，星期日结束语本文所述的对茶叶中主要成分含量的测定各有优缺点。但只要我们能够根据具体情况选取合适的方法，都会为研究茶叶作为药用及保健品的进一步开发利用提供参考依据。第5页，共25页，2023年，2月20日，星期日参考文献贾林艳，宋伟新，庄志萍，周靖，宿艳华《高效液相色谱法测定茶叶中水溶性维生素的含量》《中国农林副产品》2003年5月2.张国文刘永华杨振华朱志怀《赣南信丰茶叶中蛋白质、茶多酚、咖啡碱的测定》《南昌大学学报》(工科版)1996年12月杨明索南《微波加热快速测定茶叶中的茶多酚》《青海大学学报》(自然科学版)1998年第4期3.1.第6页，共25页，2023年，2月20日，星期日6.谢立群《火焰原子吸收法测定茶叶中的金属元素》

4.林郑和严兰芳《紫外分光光度法测定茶叶中的咖啡碱》《茶叶科学技术》2001年第4期5.曾建民伍炳华杨亚军《茶叶可溶性蛋白质的SDS电泳分析法》《中国茶叶》1998年6月北华大学学报(自然科学版)2000年12月第7页，共25页，2023年，2月20日，星期日谢谢大家!第8页，共25页，2023年，2月20日，星期日蛋白质的测定1）凯氏定氮法

2）SDS－PAGE电泳分析法

3）色谱法十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳法第9页，共25页，2023年，2月20日，星期日试剂及主要仪器

1)浓硫酸(A.R)2)硫酸钾(A.R)3)硫酸铜(A.R)4)3.0%NaOH溶液

5)2%硼酸溶液

6)0.05mol/L的标准HCl溶液7)0.1%混合指示剂:0.1%甲基红酒精溶液和0.1%甲基蓝酒精溶液按1：1混合8)微量凯氏定氮仪第10页，共25页，2023年，2月20日，星期日处理样品准确称取样品2g,小心移入烧瓶中,再CuSO41g,K2SO410g和浓H2SO450mL。用电炉加热消化至液体变成蓝绿透明后,冷却,定容至100mL。测定先用蒸汽洗涤微量凯氏定氮装置后,精确移取消化液10.00mL,量取NaOH25mL,加至反应室中,蒸气蒸馏直至硼酸溶液由葡萄紫色变成绿色,最后再用0.05mol／LHCl溶液滴定至淡葡萄紫色。处理样品测定第11页，共25页，2023年，2月20日，星期日粗蛋白百分含量=式中:V1—样品消耗盐酸标准液的毫升数;V2—试剂空白消耗盐酸标准液的毫升数;C—盐酸标准液的浓度;0.014—1mol／LHCl标准液1mL相当于氮的克数;6.25—氮换算成蛋白质的因数。返回第12页，共25页，2023年，2月20日，星期日茶多酚的测定1)高锰酸钾容量法2)微波加热法

3)分光光度法4)原子吸收法

第13页，共25页，2023年，2月20日，星期日试剂及主要仪器1)微波炉

2)724型分光光度计3)酒石酸亚铁溶液:称取1000g硫酸亚铁和5000g酒石酸钾钠,用水溶解并定容至1L,pH=7.54)磷酸盐缓冲液:取mol／L的mol／L磷酸二氢钾溶液850ml和磷酸二氢钾溶液150ml混合均匀第14页，共25页，2023年，2月20日，星期日称取磨碎茶叶试样0.3g(准确至0.0001g)于100mL容量瓶中,加蒸馏水40mL,用密封带密封瓶口,橡皮筋系紧,置于微波炉内,于中档功率微波加热5min,端出转盘,取下密封带,过滤至50mL容量瓶中,定容。准确吸取上述试液1.00mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL,充分混合再加pH=7.5的缓冲液至刻度,用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)

第15页，共25页，2023年，2月20日，星期日茶多酚(%)=式中:L1—试样的总量(ml);L2—测定时的用液量(ml);M—试样的质量(g);m—试样干物质含量的百分率(%);1.957—用10mm比色杯,当吸光度等于0.50时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。返回第16页，共25页，2023年，2月20日，星期日咖啡碱的测定

碘量法重量法紫外分光光度法薄层扫描法

第17页，共25页，2023年，2月20日，星期日为什么？利用咖啡碱结构上的嘌呤环具有共轭双键体系，因而具有独特的吸收光谱，在波长272～274nm处具有最大吸收值，其消光度与咖啡碱含量呈线性关系。故可通过消光度求其含量第18页，共25页，2023年，2月20日，星期日试剂及主要仪器

8)0.01NHCl溶液:取比重1.19的浓HCl0.831)电子分析天平2)752分光光度计3)恒温水浴锅4)吸滤装置5)移液管6)锥形瓶7)碱性乙酸铅溶液:称取50g碱性乙酸铅,加水100mL,静置过夜；ｍL,稀释至１升。9)咖啡碱标液:准确称取100mg咖啡碱（纯度不低于99％）溶于100mL水中，作为母液。准确吸取5.00mL加水至100mL作为工作液。（每毫升含0.05mg）第19页，共25页，2023年，2月20日，星期日

准确称取3.0000g均匀地磨碎茶样于500mL锥形瓶中,加沸蒸镏水450mL,立即移入沸水浴中，浸提完毕立即趁热减压过滤。滤液移入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸镏水洗涤2～3次，并将滤液拼入上述容量瓶中，用水稀释至刻度。用移液管准确吸取试液10.00mL，移入100mL容量瓶,加入5mL0.01N盐酸和1mL碱性乙酸铅溶液，用水稀释至刻度，充分混匀，静置过滤。准确吸取25.00mL滤液注入50mL容量瓶中，加入3滴6N硫酸溶液，加水稀释至刻度、混匀、静置过滤。用10mm比色杯，在波长274nm处，以试剂空白为溶液参比，测定其吸光度（Ａ）。

准确称取均匀磨碎的茶样3.0000g于500mL锥形瓶中,加沸蒸镏水450mL,立即移入沸水浴中，浸提完毕立即趁热减压过滤。滤液移入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸镏水洗涤2～3次，并将滤液倒入上述容量瓶中，用水稀释至刻度。返回第20页，共25页，2023年，2月20日，星期日金属元素的测定

1)火焰原子吸收法

2)离子色谱法3)电感耦合等离子体质谱法

第21页，共25页，2023年，2月20日，星期日试剂与主要仪器1)WFX－1F2B2原子吸收分光光度计;2)Ca,Mg,Mn,Fe,Zn,Cu,Ni,Co3)二氯化锶：5%分析纯;的标准贮备液：1ｍg/ｍＬ(北京国家标准物质研究中心);4)硝酸、盐酸、高氯酸：分析纯。第22页，共25页，2023年，2月20日，星期日样品来源及样品的制备准确称取茶叶5.0ｇ于烧瓶中,加20mLHNO3,静置消化12min,次日加入5mL高氯酸,于小火加热至无色透明近干为止,冷却后转移到25mL容量瓶中,用3%HNO3定容,摇匀备用。标准工作曲线绘制配制各元素标准工作使用液,按仪器工作参数表测定溶液的吸光度,绘制工作曲线,并计算回归方程和相关系数。第23页，共25页，202